王丽娜
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
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- 发文基金：军队“十一五”科技攻关课题军队医药卫生科研基金“十一五”国家科技攻关计划更多>>
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- 11β-HSD2重组真核表达载体构建及对A549细胞IL-6的影响
- 2013年
- 目的本文旨在构建11β-羟基类固醇脱氢酶2（11β-HSD2）基因的重组真核表达载体，并检测其转染人哺乳动物细胞后对白介素6（interleukin-6，IL-6）表达水平的影响。方法用PCR方法扩增11β-HSD2基因的全长cDNA，先亚克隆至pGMT载体，测序正确后再亚克隆至pcDNA3．1myc-hisC以构建其重组真核表达载体。将重组的真核表达载体瞬时转染人肺腺癌细胞系A549，用Western blot方法鉴定表达情况，并用ELISA方法检测IL-6表达水平。结果测序表明11β-HSD2的重组真核表达载体构建成功，Western blot显示真核表达载体能够在A549细胞中成功表达，并可使IL-6表达水平升高。结论成功构建了11β-HSD2基因的重组真核表达载体，初步验证了该基因的促炎效应。
- 陈晓琳江红王兴友王丽娜宋何煜金帮明
- 关键词：基因表达A549细胞白介素6
- 11β-羟基类固醇脱氢酶1在炎症调控中的作用被引量：2
- 2011年
- 11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD)是调节糖皮质激素(GC)作用的关键酶。11β-HSD有两个同工酶:11β-HSD1和11β-HSD2,催化具有活性的皮质醇与无活性的可的松之间的相互转化。1βl-HSD1主要表达于GC的靶器官,如肝脏、肺、脂肪组织、卵巢、脑组织等,在体内主要作为还原酶起作用,催化可的松还原为皮质醇。11β-HSD1在下丘脑-垂体-肾上腺轴及代谢综合征、肥胖、胰岛素抵抗、炎症调控等众多领域中有重要作用。11β-HSD1的作用越来越受到重视,现阐述11β-HSD1在炎症调控中的意义。
- 王丽娜陈晓琳王兴友
- 关键词：11Β-羟基类固醇脱氢酶1炎症调控
- 抑制11β-HSD_2对GC保护血管内皮细胞炎性损伤的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨阻断11β-HSD2的表达对GC保护血管内皮炎性损伤中的影响。方法用甘草次酸(GA)抑制人脐静脉内皮细胞11β-HSD2的表达,观察GA作用后体外培养的人脐静脉内皮细胞在LPS和(或)Dex刺激下IL-6等炎性细胞因子的分泌及发生凋亡的变化,同时观察不同浓度的GA对人脐静脉内皮细胞11β-HSD2的表达的抑制情况。结果 GA单独作用于人脐静脉内皮细胞时,对11β-HSD2 mRNA的表达无明显影响。但GA在HUVEC受到LPS刺激时能够明显抑制LPS诱导的11β-HSD2 mRNA的表达。此外GA与GC合用可进一步增强对11β-HSD2 mRNA的表达的抑制,GA能显著抑制LPS诱导的HUVEC分泌IL-6和sICAM-1,同时显著降低LPS诱导的HUVEC的细胞凋亡率。结论 11β-HSD是GC作用的受体前调节的关键物质,GA又是传统的11β-HSD抑制剂,因此11β-HSD2完全可以作为GA抗炎等作用的1个靶点。GA通过抑制11-HSD2 mRNA的表达是其增强GC(Dex)抗炎作用的一个主要机制。GA与GC合用可进一步增强对11β-HSD2 mRNA的表达的抑制,同时加强了GC对LPS诱导的血管内皮炎性损伤的保护作用。表明GA与GC合用能够通过受体前调节机制加强抗炎效应,是一个值得关注的途径。
- 王兴友王丽娜陈晓琳陈杭薇
- 关键词：糖皮质激素受体甘草次酸
- 11β-羟基类固醇脱氢酶2与炎性疾病的关系被引量：4
- 2011年
- 11β-羟基类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)是糖皮质激素代谢的关键酶,可以促进有活性的皮质醇转化为可的松,从而降低有活性的糖皮质激素浓度。机体处于患有溃疡性结肠炎、风湿性疾病、呼吸系统炎性疾病等病理状态时,在炎性因子的刺激下11β-HSD2发生变化。炎性刺激可以通过调节11β-HSD2的表达促进细胞内糖皮质激素的活化,提高局部糖皮质激素的浓度,有助于为未来的临床干预提供一个新靶点。
- 陈晓琳王丽娜王兴友
- 关键词：11Β-羟基类固醇脱氢酶炎症糖皮质激素
- 体外细胞炎性损伤模型的建立被引量：1
- 2013年
- 目的体外复制细胞炎性损伤模型用于体外炎症研究。方法将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养后分组,用不同浓度(0、0.1、1、10、20μg/ml)的脂多糖(LPS)刺激,在不同时间点(4、12、24、48h)收样品,检测细胞上清中的白介素-6(IL-6)水平。结果每个时间点的HUVEC:LPS(0.1、1、10、20μg/ml)比LPS(0μg/ml)刺激后IL-6分泌明显增高(P<0.05);48h内随时间增加,IL-6分泌增加,呈线性关系;相同时间点不同LPS浓度(0.1、1、10、20μg/ml)刺激细胞产生的IL-6分泌差异无统计学意义(P>0.05)。结论体外LPS刺激HUVEC是理想的细胞炎性损伤模型。
- 王丽娜江红王兴友陈晓琳宋何煜金帮明
- 关键词：脂多糖白介素-6
- 大剂量糖皮质激素上调血管内皮细胞MR表达的意义被引量：2
- 2012年
- 目的观察LPS和Dex对人脐静脉内皮细胞盐皮质激素受体(MR)的表达情况,以探讨糖皮质激素作用的新机制。方法利用内毒素脂多糖LPS"致伤"血管内皮细胞,用地塞米松进行"治疗",然后通过RT-PCR和免疫组化的方法检测血管内皮细胞盐皮质激素受体(MR)的表达情况。结果内皮细胞本身能明显表达MRmRNA,运用不同浓度Dex和100 ng/mlLPS刺激后,可使人脐静脉内皮细胞内MRmRNA表达明显下降,应用大剂量(10-6 mol/L)的Dex刺激细胞3 h,MRmRNA的表达无明显变化,6 h开始有升高,12 h达高峰,24 h回升近刺激前水平。免疫组化的结果与RT-PCR一致。结论大剂量的DEX(10-6 mol/l)可上调MR的表达,GC引起GR和MR表达的不同变化可能是机体对损伤应激的一种调节机制,表明糖皮质激素作用存在新的机制。
- 王兴友陈晓琳王丽娜陈杭薇
- 关键词：糖皮质激素受体
- 大剂量糖皮质激素下调血管内皮细胞GR表达的意义
- 2012年
- 目的观察LPS和Dex对人脐静脉内皮细胞糖皮质激素受体(GR)的表达情况。方法利用内毒素脂多糖LPS"致伤"血管内皮细胞,用地塞米松进行"治疗",然后通过RT-PCR和免疫组化的方法检测血管内皮细胞糖皮质激素受体(GR)的表达情况。结果内皮细胞本身能明显表达GRmRNA,运用不同浓度Dex和100 ng/ml LPS刺激后,可使人脐静脉内皮细胞内GRmRNA表达明显下降,应用大剂量(10-6mol/L)的Dex刺激细胞3h,GRmRNA的表达无明显变化,6 h开始明显下降,12 h达高峰,24 h回升近刺激前水平。结论大剂量的Dex(10-6mol/L)可下调GR的表达,表明严重创伤时血管内皮细胞中糖皮质激素作用存在其他的作用机制。
- 王兴友陈晓琳王丽娜陈杭薇
- 关键词：糖皮质激素受体
- 抑制11β-HSD2对GC保护血管内皮细胞炎性损伤的影响
- 目的：探讨阻断11β-HSD2的表达对GC保护血管内皮炎性损伤中的影响.材料与方法：用甘草次酸(GA)抑制人脐静脉内皮细胞1 1β-HSD2的表达,观察GA作用后体外培养的人脐静脉内皮细胞在LPS和/或Dex刺激下IL-...
- 王兴友王丽娜陈晓琳陈杭薇
- 诱导11β-HSD1表达对GC保护血管内皮炎性损伤作用的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨诱导11β-HSD1的表达在GC保护血管内皮炎性损伤中的影响。方法用甘草次酸(GA)诱导人脐静脉内皮细胞11β-HSD1的表达,观察GA作用后体外培养的人脐静脉内皮细胞在LPS和(或)Dex刺激下IL-6等炎性细胞因子的分泌及发生凋亡的变化,同时观察不同浓度的GA对人脐静脉内皮细胞11β-HSD1的表达的诱导情况。结果 GA单独作用于人脐静脉内皮细胞时,能够上调11β-HSD1mRNA的表达。GA与GC(Dex)合用也可促进11β-HSD1mRNA的表达。GA能显著抑制LPS诱导的HUVEC分泌IL-6和sICAM-1,同时显著降低LPS诱导的HUVEC的细胞凋亡率。结论 GA通过诱导11β-HSD1表达,可增强GC抑制IL-6等前炎症细胞因子的产生,加强对血管内皮细胞炎性损伤的保护。
- 王兴友王丽娜陈晓琳陈杭薇
- 关键词：糖皮质激素受体人脐静脉血管内皮细胞甘草次酸
- 大剂量糖皮质激素上调血管内皮细胞MR表达的意义
- 目的：观察LPS和Dex对人脐静脉内皮细胞盐皮质激素受体(MR)的表达情况,以探讨糖皮质激素作用的新机制。材料与方法：利用内毒素脂多糖LPS"致伤"血管内皮细胞,用地塞米松进行"治疗&quo...
- 王兴友陈晓琳王丽娜陈杭薇
- 关键词：糖皮质激素受体
