沈楠
- 作品数：9 被引量：35H指数：3
- 供职机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经胶质样细胞的实验研究被引量：3
- 2005年
- 目的观察体外以不同方法诱导的骨髓间充质干细胞(Bonemarrowmesenchymalstemcells,MSCs)分化为神经胶质样细胞,探讨MSCs作为组织工程周围神经种子细胞的可行性。方法以大鼠MSCs为研究对象,分化学诱导组,共培养诱导组,未经诱导的MSCs作为对照组。通过体外动态观察细胞形态,免疫细胞化学,westernblot,RT-PCR等手段对各组诱导后的细胞进行鉴定。结果形态学观察显示两种诱导过程中的部分MSCs细胞都出现明显的神经胶质细胞的形态,共培养诱导组的MSCs在诱导后仍可继续传代培养,对照组细胞形态无变化。细胞免疫组织化学染色,westernblot和RT-PCR结果显示两个诱导组细胞都能够表达神经干细胞标志性抗体(Nestin)、神经胶质纤维酸性蛋白抗体(GFAP)和S-100抗体。结论我们推断MSCs很有可能成为TEPN的理想种子细胞来源。
- 刘鹏金岩张勇杰胡世颉轩东英王亦菁沈楠国生辉
- 关键词：骨髓间充质干细胞干细胞分化雪旺细胞
- 化学萃取异种组织工程化神经支架的方法和组织学研究被引量：6
- 2005年
- 目的:研究新的化学萃取方法,清除成年兔坐骨神经中的细胞和髓鞘,建立成年兔坐骨神经的化学萃取方法,获得去细胞异种神经体移植物。方法:切取健康成年兔双侧坐骨神经,以tritonX-100和脱氧胆酸钠溶液按一定浓度和程序进行化学处理。萃取神经和新鲜神经行HE染色及电镜检查,以观察细胞、髓鞘及神经基底膜;免疫组织化学染色以显示雪旺细胞基底板层,并进行组织相容性的试验。结果:去细胞神经的延展性和神经外膜的韧性和弹性良好,细胞和髓鞘被彻底清除,神经基底膜被保留,雪旺细胞基底板层保留完好,去细胞神经为一种没有细胞髓鞘及其碎片的空的神经基质管,其植入的临近部位无急性炎症反应,有较好的生物相容性,无脓肿形成和组织坏死发生。结论:TritonX-100及脱氧胆酸钠化学处理方法,可有效清除周围神经中的细胞及髓鞘,萃取长段的去细胞神经,该神经移植物保持了网管柱状组织结构,保留了雪旺细胞板层素,可能是制备具有仿生结构的组织工程化神经支架较为理想的方法。
- 国生辉金岩张勇杰王彦亮沈楠刘鹏
- 关键词：神经移植异种周围神经
- 转化生长因子β对周围神经缺损修复的影响
- 目的:探讨转化生长因子β(TGF-β)在周围神经缺损修复中的作用。方法:取5～7d 的SD 仔鼠坐骨神经分离培养雪旺细胞(Schwann cells,SC),分为TGF-β组和空白组。TGF-β组加入50ng/ml TG...
- 张勇杰金岩聂鑫国生辉刘鹏沈楠
- 关键词：转化生长因子Β雪旺细胞神经再生
- 文献传递
- 复合转化生长因子-β的组织工程化周围神经修复坐骨神经缺损被引量：7
- 2007年
- 探讨了转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)在周围神经缺损修复中的作用。将50 ng·ml-1 TGF-β加入体外培养的雪旺细胞(Sehwann cells,SC)中,MTT和流式细胞仪观测到TGF-β能够明显促进SC增殖;ELISA方法检测到TGF-β组上清神经生长因子(NGF)含量高于对照组(P<0．05);将牛去细胞基质(Bovine acellular matrix,BAM)、SC、血清和培养基按一定的比例混合,注入聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)神经导管去修复15 mm坐骨神经缺损。30只SD大鼠分为3组,实验组:PLGA导管+SC+TGF-β;空白组PLGA导管+SC;和自体神经移植组。16周后通过电生理、透射电镜等检测方法显示各组坐骨神经均得到再生,修复效果实验组与自体神经移植组无显著性差异,均优于空白组。TGF-β一方面可以明显促进SC的增殖,另一方面可以增强SC分泌NGF的功能。因此周围神经修复过程中使用外源性的TGF-β对修复周围神经缺损有较好的疗效。
- 张勇杰金岩聂鑫王彦亮刘鹏沈楠国生辉
- 关键词：转化生长因子-Β神经再生
- 去细胞周围神经移植物的制备及生物相容性评测被引量：20
- 2006年
- 目的:制备去细胞周围神经移植物并评测其生物相容性。方法:实验于2005-05/12在解放军第四军医大学口腔医学院组织病理教研室和组织工程实验中心完成。①将猪肋间神经经低渗、-80℃反复冻融和NaOH裂解等方法制备去细胞神经异体移植物;光、电镜观察其结构特征。②材料细胞毒性试验按照GB/T16886.5-2003《医疗器械生物学评价》体外细胞毒性试验的试验方法进行,毒性程度的评估标准参见美国药典。③大鼠皮下植入试验,取成年SD大鼠9只,于脊柱中线两侧约2cm处平行各取2点作为皮下植入点,植入1cm去细胞异体神经移植物。于手术后第1,2,4周时各取1只大鼠麻醉状态下处死,作组织切片检查。结果:去细胞神经异体移植物的制备:①应用正常猪的周围神经,清除许旺细胞、神经外膜和束膜细胞以及神经纤维的髓鞘和轴突,保存由许旺细胞基底膜管以及神经外膜和束膜的细胞外基质构成的三维支架结构。②生物相容性测试结果:显示去细胞神经异体移植物细胞毒性试验为1级。③SD大鼠皮下植入试验结果:去细胞神经异体移植物无明显的免疫排斥反应。结论:该方法所制备的去细胞神经移植物神经膜管结构保存完好,有良好的组织相容性,可能成为自体神经移植的替代材料。
- 沈楠金岩张勇杰聂鑫樊立宏刘鹏赵宇
- 异种去细胞组织工程化神经支架的制备与形态学研究被引量：2
- 2005年
- 目的:研究新的化学萃取方法,清除成年兔坐骨神经中的细胞和髓鞘,建立成年兔坐骨神经的化学萃取方法,获得去细胞异种神经体移植物。方法:切取健康成年兔双侧坐骨神经,以Triton X-100和脱氧胆酸钠溶液按一定浓度和程序进行化学处理。萃取神经及新鲜神经行HE染色及电镜观察细胞、髓鞘及神经基底膜;免疫组织化学染色显示雪旺细胞基底板层,并进行组织相容性试验。结果:去细胞神经的延展性及神经外膜的韧性和弹性良好,细胞和髓鞘被彻底清除,神经基底膜被保留,雪旺细胞基底板层保留完好,去细胞神经为一种没有细胞髓鞘及其碎片的空的神经基质管,植入的临近部位无急性炎症反应,有较好的生物相容性,无脓肿形成及组织坏死发生。结论:Triton X-100及脱氧胆酸钠化学处理方法,可有效清除周围神经中的细胞及髓鞘,萃取长段的去细胞神经,神经移植物保持了网管柱状组织结构,保留了雪旺细胞板层素,该方法可能是制备具有仿生结构的组织工程化神经支架较为理想的方法。
- 国生辉金岩张勇杰刘鹏沈楠王彦亮
- 关键词：神经移植异种周围神经组织工程化
- 组织工程活性人工神经修复周围神经缺损的研究
- 周围神经组织损伤后的修复、再生一直是神经科学、创伤医学、康复医学的研究热点之一。自体神经移植修复的方法由于存在来源受限和牺牲供区感觉功能的问题，不能满足长段神经缺损修复的需要，异体神经移植由于存在免疫排斥反应，会影响神经...
- 沈楠
- 关键词：周围神经神经缺损雪旺细胞去细胞神经
- 文献传递
- 骨髓间充质干细胞分化为雪旺细胞样细胞的实验研究
- 目的:体外观察诱导的骨髓间充质干细胞(Bone Marrow MesenchymalStem Cells,MSCs)分化为雪旺细胞样细胞(Shwann-like cells),探讨MSCs 作为周围神经组织工程细胞来源的...
- 刘鹏金岩张勇杰胡世颉聂鑫王亦菁国生辉沈楠
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化雪旺细胞
- 文献传递
- 构建神经再生室培养成年SD大鼠许旺细胞被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨从成年SD大鼠坐骨神经分离培养获得大量许旺细胞的有效手段。方法:实验于2005-05/11在解放军第四军医大学口腔医学院组织病理教研室和组织工程实验中心完成。①取成年SD大鼠1只截断坐骨神经5mm,缝接入20mm硅胶管中,形成神经再生室。7d后重新打开伤口,刨开硅胶管,截取再生室内神经段置离心管中作为实验组。②取SD仔鼠5只,无菌条件下取双侧坐骨神经混合于离心管中作为对照组。③将两组坐骨神消化培养。通过相差显微镜活细胞计数和S-100细胞化学标记相结合鉴定了许旺细胞增殖和纯化程度。结果:①两组培养的细胞光镜观察结果:实验组的许旺细胞密度高于对照组,特别是在培养4d后细胞的密度差别尤为显著。实验组的许旺细胞密度大于600个/mm,而对照组密度不足200个/mm。②两22组许旺细胞免疫组织化学染色:实验组衬染后计数许旺细胞的纯度为(98.0±1.2%,对照组许旺细胞的纯度为(93.0±2.1)%(P<0.05)③)而。两组细胞的生长曲线:培养7d,实验组细胞数量较对照组明显增加,达到(49.6±3.5)×10L-1,远高于对照组的(31.7±3.9)×10L。77-1结论:从成年SD大鼠坐骨神经分离培养方法能获得大量高纯度的许旺细胞,为自体许旺细胞在修复周围神经缺损中的应用提供了可能。
- 沈楠金岩张勇杰聂鑫赵宇
- 关键词：细胞培养许旺细胞神经再生SD
