杨延辉 作品数:46 被引量:39 H指数:4 供职机构: 宁夏医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 宁夏回族自治区自然科学基金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 化学工程 更多>>
中医辟谷养生术对肠道菌群的调节作用研究 被引量:1 2022年 目的观察中医辟谷养生术对肠道菌群的调节作用。方法共计23名受试者进行5~7天辟谷,同时练习养生功法。分别于辟谷前3天、辟谷后3天及2个月采集受试者粪便样本,对样本进行DNA抽提和检测、16S r DNA序列扩增、Mi Seq测序和数据分析。结果23名受试者中18名完成了辟谷干预及3次粪便样本采集。与辟谷前比较,辟谷后2个月拟杆菌丰度在门、纲、目水平均明显增多(P<0.05),厚壁菌门的毛螺菌科丰度明显减少(P<0.05),厚壁菌门/拟杆菌门比例由辟谷前的0.65±0.67,降至辟谷后0.43±0.25,以及辟谷后2个月的0.40±0.29。辟谷后2个月,“代谢”“糖合成及代谢”“非基本氨基酸代谢”“代谢性疾病”功能菌群丰度均明显增高(P<0.05,P<0.01),“信息处理”“膜转运”功能菌群丰度明显降低(P<0.05)。结论辟谷可改变肠道菌群结构与相关功能。 郭建红 郭建红 燕晓雯 王俊磊 马英锋 杨延辉关键词:治未病 肠道菌群 医学微生物学课程实现知识传授与价值引领相结合的探索与实践 被引量:3 2020年 医学微生物学是医学专业本科生必修的重要专业基础课程,传统的教学偏重专业知识和实践技能的培养,未涉及思想政治教育的课程规划。本文介绍在医学微生物学课程教学过程中围绕"知识传授与价值引领相结合"的课程目标,实施课程思政的路径;探讨如何在医学微生物学的学科架构和教学过程中体现立德树人,推动思想政治教育融入学科专业知识教育;实现专业知识传授、能力奠定和价值引领的有机结合。 张艳丽 林源 杨延辉 王琦 李燕关键词:教学 医学微生物学 细粒棘球蚴慢性感染病人外周血中gammadelta T细胞比例与功能的初步分析 研究背景:γδT淋巴细胞,作为天然免疫细胞,在肿瘤、感染性疾病中的发挥积极重要免疫作用。迄今为止,国内外尚缺乏全面深入地在细粒棘球蚴感染中γδT淋巴细胞免疫作用机制研究的报道。目的:探讨γδT淋巴细胞在包虫病亚型分布、抵... 王浩 赵嘉庆 韩梅 张艳丽 摆茹 王大军 杨延辉 万巧凤 林源 龚歆关键词:ΓΔT细胞 文献传递 用于筛选抗结核药物的组合物和方法 本发明涉及用于药物筛选的组合物,具体地,通过建立用于筛选以泛酸合成酶为靶点的抗结核药物的组合物和相应的筛选方法,快速、经济地筛选抗结核药物。 肖春玲 龚立康 杨延辉 郝雪秦 关艳 高鹏 张章文献传递 基于CRISPR-Cas技术检测结核分枝杆菌利福平耐药性点突变的crRNA 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas技术检测结核分枝杆菌利福平耐药性点突变的crRNA,本发明以MDR‑TB利福平耐药性点突变(rpoBL378D)为检测靶位点,设计并合成靶向该目的序列的crRNA;构建基于CRIS... 杨延辉 王大军 杨丽 唐静 李晓雨 马凯 杨玉玛 王琦 林源 马国荣 马虹 姚青 黄凌 张炜 郭若莹 赵艺卿文献传递 基因编辑与诊断工具酶LwCas13a的克隆表达、纯化与酶活性鉴定 2023年 目的开发可大量制备具有天然酶活性的基因编辑与诊断工具酶LwCas13a的技术,为研究基因编辑或开发基因诊断试剂提供稳定的酶。方法以LwCas13a蛋白基因序列为模板,采用PCR技术扩增目的基因LwCas13a,运用NotⅠ和BamHⅠ进行双酶切,将酶切产物与相同酶切获得的载体pC013用T4 DNA连接酶连接构建成含有融合表达His标签的原核表达载体pC013-Twinstrep-SUMO-huLwCas13a,选择经酶切和测序鉴定均正确的质粒转化到E.coli BL21感受态细胞中,用0.5 mmol·L^(-1)的异丙基-β-D-硫代丰乳糖苷在16℃条件下诱导16 h,表达LwCas13a酶,产物经SDS-PAGE电泳检测,获得可溶性表达条件后,进行大量蛋白诱导表达,使用Ni^(2+)亲和层析法,纯化LwCas13a蛋白。利用LwCas13a酶的“侧向切割活性”检测纯化获得的酶。结果PCR扩增获得3479 bp序列完全正确的LwCas13a基因,重组蛋白以融合蛋白形式可溶性高效表达,纯度达到98%。经比较优于商业化的LwCas13a酶。结论成功获得具有天然侧向剪切活性的LwCas13a酶,为开发使用LwCas13a酶的分子诊断试剂提供原材料奠定了基础。 李晓雨 倪江萍 朱玥 杨玉玛 薛依凡 张斯涵 妥蓉蓉 杨延辉关键词:原核表达 蛋白纯化 基于CRISPR-Cas技术检测结核分枝杆菌利福平耐药性点突变的crRNA 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas技术检测结核分枝杆菌利福平耐药性点突变的crRNA,本发明以MDR‑TB利福平耐药性点突变(rpoBL378D)为检测靶位点,设计并合成靶向该目的序列的crRNA;构建基于CRIS... 杨延辉 王大军 杨丽 唐静 李晓雨 马凯 杨玉玛 王琦 林源 马国荣 马虹 姚青 黄凌 张炜 郭若莹 赵艺卿以IspD为靶点的新型抗结核药物筛选研究 被引量:4 2015年 目的:筛选靶向结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸-胞嘧啶转移酶(2-C-methyl-D-erythritol-4-phosphate cytidylyltransferase,Isp D)的新型抗结核化合物,研制具有全新作用机制的新型抗多药耐药MTB药物。方法:应用高通量的微生物体外微量、直观快速的药敏试验方法,筛选得到具有抑制MTB生长的阳性化合物;同时在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中重组表达MTB的Isp D,建立酶活测定方法,构建Isp D酶抑制剂筛选模型,从具有抑制MTB生长的阳性化合物中筛选Isp D抑制剂;对在酶水平上具有良好抑制活性的化合物进行作用机制研究,确定其对MTB(H37Rv)的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),评价其抗菌谱,测定其对非洲绿猴肾细胞(Vero)和人肝癌细胞(Hep G2)的毒性。结果:从4万多个化合物中初步得到了159个具有抑制MTB生长的阳性化合物,从中筛选得到了5个Isp D的抑制剂,其中的IMB-4901显示出较好的Isp D抑制活性(50%inhibiting concentration,IC50=19.3μg·m L-1)和抗MTB活性(MIC=1.6μg·m L-1)。结论:成功获得了以Isp D为靶点的新型抗MTB药物先导化合物。 鲁众阳 杨延辉 蒙建州 关艳 郝雪秦 肖春玲关键词:结核分枝杆菌 高通量筛选 抗结核药物 以耻垢分枝杆菌为模式菌快速筛选新型抗结核药物 被引量:5 2014年 目的:评价以耻垢分枝杆菌(Msm)进行抗结核药物筛选的可行性与局限性,并应用该菌快速筛选新型抗结核药物先导物。方法:测定抗结核药物对Msm的最小抑菌浓度(MIC);用基于微孔板的高通量方法筛选抑制Msm和结核分枝杆菌(MTB)的化合物;用MTT法测定抗结核化合物的细胞毒性。结果:靶向于分枝菌酸和蛋白质合成、能量和核酸代谢的药物,在抑制Msm和MTB方面具有平行性;从7万余样品中筛选到5个对MTB(H37Rv)的MIC小于10μg·mL-1的化合物;其中的IMBYH2232为喹啉胺类化合物,对MTB(H37Rv)的MIC为0.125μg·mL-1,该化合物对巨噬细胞J774A.1、人肝细胞L02和人肾上皮细胞293T的ID50分别为12.5,15.2和10.5μg·mL-1。结论:本研究确定了Msm高效快速表型筛选模型的可行性与局限性,发现了具有极强的抗结核活性的化合物。 关艳 杨延辉 周爽 何琪扬 蒙建州 司书毅 肖春玲关键词:耻垢分枝杆菌 结核分枝杆菌 高通量筛选 泛酸激酶及其抑制剂的研究进展 被引量:2 2014年 辅酶A的生物合成对于病原微生物的生存及致病性至关重要,而作为辅酶A生物合成途径的限速酶——泛酸激酶控制着辅酶A生物合成的起始步骤,且其普遍存在于病原体,并与人体中的同源蛋白相似度极低,故引起人们广泛兴趣,成为潜在的新型抗菌靶标研究的热点,其小分子抑制剂有望开发成为具高选择性、低毒副作用的抗菌药。综述泛酸激酶的分类、特性、晶体结构特征及其调控和成为潜在抗菌药物靶标的可行性,并概述具不同结构类型和抗病原微生物活性的在研泛酸激酶抑制剂。 杨延辉 赵建新 王浩 摆茹 韩梅关键词:辅酶A 抑制剂