杨卫冲
- 作品数:6 被引量:47H指数:2
- 供职机构:扬州大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金:江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省科技攻关计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 重组牛γ干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定
- 本研究分别以真核表达质粒pVAX1-PreBovIFN-γ和纯化的原核表达融合蛋白rHis-BovIFN-γ为免疫原,并以纯化的融合蛋白rGST-BovIFN-γ为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制出4株稳定分泌抗r...
- 杨卫冲焦新安潘志明张苏华孙泉云黄金林
- 关键词:原核表达真核表达单克隆抗体
- 文献传递
- 牛结核病诊断技术的研究进展
- 本文介绍了几种牛结核病的新型检测技术,包括结核菌素试验、血清学诊断、淋巴细胞增殖实验、细胞因子检测法、PCR技术以及核酸探针技术等等.
- 杨卫冲焦新安
- 关键词:牛结核病结核菌素试验血清学诊断PCR技术
- 文献传递
- 牛结核病诊断技术的研究进展
- 结核病是人类已知的最古老的疾病之一,自从它如幽灵一般在这个地球上开始游荡的那一天起,就一直严重威胁着人类和动物的健康,并给整个社会造成了巨大的经济和物质损失。牛结核病被国际兽疫局(OIE)列为B类动物疫病,是一种人兽共患...
- 杨卫冲
- 文献传递
- 重组黑白花奶牛γ-干扰素在大肠杆菌中的原核表达与鉴定
- 2014年
- 根据黑白花奶牛γ-干扰素(BovIFN-γ)基因的序列,通过RT-PCR扩增出BovIFN-γcDNA,并将其定向插入原核表达质粒pET-30a(+)和pGEX-6P-1,经DNA测序后,分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,分别表达出大小在23和43 ku左右的融合蛋白。通过对诱导剂的浓度、诱导起始时间、诱导持续时间的筛选,对表达条件进行了优化,BL21(DE3)/pET-30a(+)-BovIFN-γ与BL21/pGEX-6P-1-BovIFN-γ的融合蛋白的相对表达量最高时可分别达到菌体总蛋白的60%和45%左右。使用纯化的融合蛋白rHis-BovIFN-γ和rGST-BovIFN-γ进行细胞病变抑制试验,证实表达产物具有较高抗病毒感染活性,在牛肾细胞(MDBK)上抑制水疱性口炎病毒的活性分别为2.15×107和1.21×105U·mg-1。
- 范锋徐正中倪谷音毛爱民杨卫冲陈祥
- 关键词:奶牛原核表达
- 重组牛γ-干扰素单克隆抗体的研制被引量:14
- 2009年
- 为制备针对重组牛γ-干扰素(rBoIFN-γ)的单克隆抗体(mAb),以纯化的原核表达融合蛋白rHis-BoIFN-γ为免疫原,用纯化的rGST-BoIFN-γ为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制抗rBoIFN-γ的mAb。结果获得13株稳定分泌抗BoIFN-γmAb的细胞株,命名为1C12、1F7、1G5、3E6、4D5、5E11、5G4、6F8、6G6、7E9、8D3、8F8和9G11。腹水的效价除单抗9G11外,其余效价都在1∶80 000以上;除5G4mAb亚类为IgG2b外,其余均为IgG1。Dot-ELISA结果表明,所得单抗只与融合蛋白rHis-BoIFN-γ和rGST-BoIFN-γ反应,而不与其它重组细胞因子和对照细菌反应,显示其良好的特异性。Western blot显示所获单抗能与相应的融合蛋白发生反应,出现特异性条带。同时所获单抗均能与牛IFN-γ标准品反应。13株单抗均为针对rBoIFN-γ的特异性mAb,为进一步研究rBoIFN-γmAb在牛的免疫调控、牛疫病的致病机制及其诊断中的应用奠定基础。
- 张成全陈祥牛中伟杨卫冲徐正中孟闯潘志明黄金林焦新安
- 关键词:原核表达单克隆抗体
- 牛结核病诊断技术的研究进展被引量:38
- 2004年
- 杨卫冲焦新安
- 关键词:牛结核病发病率卡介苗艾滋病OIE动物疫病