李艳春
- 作品数:6 被引量:29H指数:3
- 供职机构:中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国科学院科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 实验性肿瘤再生长延缓模型的建立被引量:3
- 1989年
- 再生长延缓(regrowth delay)是实验肿瘤研究中较实用的观察肿瘤生长特性的指标,经常用以观察实验肿瘤放射治疗及化学治疗效果。
- 汪俊柳保全李艳春王争苏学清糜福顺沈瑜谷铣之
- 关键词:放射生物学近交系小鼠瘤株放射增敏剂照射方法
- 中性彗星分析法检测肿瘤细胞的放射敏感性被引量:6
- 2004年
- [目的]研究中性彗星分析法检测肿瘤细胞内在放射敏感性的可靠性和影响因素。[方法]人鼻咽高分化鳞癌细胞株CNE鄄1和人纤维肉瘤细胞株HT1080细胞,用6MVX线以0、100、200、300、400、600、800、1000cGy等不同剂量点照射,克隆形成法制定存活曲线,比较其放射敏感性的差异。然后进行两种细胞于600cGy照射后1、2、4、8h的中性彗星分析,以尾力矩为指标,动态检测不同时间点残留的DNA双链断裂,并与克隆形成分析结果相比较。[结果]克隆形成分析法显示CNE鄄1细胞的放射敏感性低于HT1080细胞,其2Gy照射后存活分数(SF2)和平均致死剂量D0值分别为0.397、0.331和1.898、1.287。两种细胞在照射后1、2、4h的中性彗星尾力矩分别为0.148±0.106、0.100±0.083、0.058±0.043和0.297±0.179、0.157±0.092、0.092±0.060,各时间点之间有显著性差异(P<0.05),但差别逐渐减小;照射后2h和4h的尾力矩比值分别为0.637和0.630,与SF2比值和D0比值的倒数(0.834和0.678)较接近;两种细胞照射后8h的尾力矩比较差异无显著性。[结论]中性彗星分析法与克隆形成分析法的检测结果有确切的相关性,照射后一定时间内的残留DNA双链断裂有可能成为检测肿瘤细胞放射敏感性的指标。
- 张玉晶闫洁高远红李艳春杨伟志
- 关键词:彗星分析法双链断裂放射疗法肿瘤
- 应用抑制性消减杂交技术分离E1A药敏相关基因被引量:3
- 2004年
- 背景与目的:大量研究已经证明,腺病毒5型E1A基因能抑制肿瘤的生长和转移,逆转其恶性表型,特别是能提高肿瘤细胞对多种化疗药物的敏感性,对射线也具有明显的增敏作用。但E1A基因通过哪些基因发挥作用还不知道。本研究利用抑制性消减杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)技术在药物敏感的肿瘤细胞中分离差异表达的E1A药敏相关基因。方法:以E1A蛋白处理的人头颈淋巴结转移肿瘤细胞LN686为实验组,以亲本LN686细胞为对照组,提取mRNA,构建消减cDNA文库。随机挑取克隆,采用斑点杂交技术鉴定差异基因片段的表达水平,分析所获cDNA核苷酸序列,并在GenBank中进行比较,半定量RT-PCR鉴定实验组和对照组中新基因的mRNA水平。结果:文库包含约7000个阳性克隆,随机挑取384个克隆进行PCR鉴定,其中362个有插入片段,通过斑点杂交技术,证实这些基因在实验组中表达水平较对照组显著提高。将这362个克隆进行测序并经过BLAST分析,表明10个为新基因,已在GenBank中登录。对其中7个新基因进行半定量RT-PCR检测,证明经E1A蛋白处理的LN686细胞中,新基因的表达水平明显高于亲本LN686细胞,相差3~8倍。结论:应用抑制性消减杂交技术筛选到10个新基因片段,为进一步克隆其全长基因、研究其功能打下基础。
- 马业伟千新来赵清正周小山李艳春
- 关键词:肿瘤化学治疗耐药性抑制性消减杂交
- “彗星”法分析人肿瘤细胞DNA放射损伤和修复被引量:16
- 2000年
- 探讨“彗星”分析法 (CA)在检测体外培养人肿瘤细胞DNA放射损伤与修复和放射敏感性的关系。方法 采用碱性CA检测鼻咽高分化鳞癌上皮细胞系 (CNE 1)、食管鳞癌上皮细胞系 (Ec 10 9)、肺腺癌细胞系 (GLC)和胃低分化腺癌细胞系 (BGC 82 3)经 6MVX射线照射后单细胞内DNA单链断裂 (SSB)程度及其与放射剂量的关系 ,以及CNE 1和GLC细胞系在分别接受了 16GyX射线照射后的自身修复情况 ,同时与相应的细胞存活曲线比较。结果 碱性CA可以检测出 4个细胞系DNA的SSB ,并与放射剂量呈良好的线性关系。 16Gy剂量下各细胞系的SSB程度依次为CNE 1>Ec 10 9>GLC >BGC 82 3。CNE 1,Ec 10 9,GLC和BGC 82 3细胞系的Do值分别为 1.2 5 ,1.2 7,1.88和 1.5 6。 16Gy诱导CNE 1和GLC细胞系的DNA损伤后 ,其半修复时间分别为 7.4,17.8min。结论 采用碱性CA能确切反映 4种人肿瘤细胞系DNA的定量损伤程度及其与放射剂量的关系 ,并能确切反映辐射损伤后自身修复能力 (CNE 1和GLC)在受测时间中的定量变化情况。自身修复能力的大小在鳞癌和腺癌细胞系间与放射敏感性的大小 (Do值 )有较好的对应关系。
- 吕长兴杨伟志殷蔚伯董秀李艳春
- 关键词:彗星分析法肿瘤细胞DNA损伤DNA修复
- 改造的腺病毒5型E1A基因对TNF-α诱导的猪血管内皮细胞中NF-κB活性的抑制作用
- 2003年
- 在延缓性免疫排斥反应(DXR)过程中, NF-κB发挥着关键作用. 如何恰到好处地抑制其活性是本领域研究的重要问题之一. 用改造的E1A基因(E1A)包括功能区(1 ~ 80氨基酸)和核定位区(139 ~ 243氨基酸), 删除其中可能对人体有害的CR2区, 将其克隆到真核表达载体pcDNA3中, 并转染猪血管内皮细胞(PAEC), 经G418筛选, 获得稳定表达细胞株. RT-PCR技术和细胞生长曲线分析, 证明E1AΔ基因能在PAEC中稳定表达, 且不影响细胞的正常生长, 并能抵抗肿瘤坏死因子-α (TNF-α)诱导的细胞凋亡. 报告基因分析表明, E1A(能抑制由TNF-α诱导的NF-κB活性, 其抑制率为53%, 对NF-κB信号转导途径下游的一个重要炎症基因--E-选择素基因的表达抑制率达63%. 综上, E1AΔ基因的这些功能基本符合异种器官移植中克服DXR的要求, 为利用E1AΔ基因克服DXR的可行性提供了实验依据.
- 马业伟周小山赵清正杨军高新李艳春刘玉英王争
- 关键词:猪血管内皮细胞活性抑制腺病毒TNF-Α
- 特异启动子调控的MDR1和MnSOD基因对骨髓的选择性保护作用被引量:2
- 2003年
- 目的探讨特异保护骨髓细胞免受抗癌药物及射线损害的新途径。方法 构建了由APN骨髓特异性启动子调控的耐药、耐辐射基因的逆转录病毒载体,导入骨髓母细胞及癌细胞中,用细胞存活实验对耐药耐辐射性能进行观察。分离小鼠骨髓细胞,经转染基因后,再输回到预先用射线处理以破坏骨髓系统的同种受体小鼠体内。经化疗药物或射线处理后,不同时间采血,计算白细胞数,观察在药物或射线照射后导入耐药或耐辐射基因对造血细胞的保护作用。结果 导入MDR1基因的KGla细胞对秋水仙素、足叶乙甙、长春新碱、阿霉素及紫杉醇与对照组相比,各提高了10.6,10.4,11.2,4.2和14.2倍。导入由APN启动子驱动的MnSOD基因,使KGla细胞比对照组对射线(10 Gy)的耐受性提高3.7倍。相反,导入以上两个基因后,肝癌细胞BEL7402的化、放疗耐受性未见明显变化。体内实验表明,转染了MDR1和MnSOD基因的小鼠血液中,白细胞数量明显高于对照组(P<0.01)。结论体外由APN骨髓启动子调控的MDR1和MnSOD基因能特异性地保护骨髓细胞,而对肿瘤细胞无明显影响。体内,在用药物或射线处理动物时能重建造血功能。此研究为肿瘤患者在接受化、放疗时特异性保护骨髓系统,提供了新的思路和依据。
- 梁利波马业伟周小山杨军李艳春王争周兰萍章扬培赵清正
- 关键词:化学治疗造血功能骨髓细胞MDRL基因