李梅
- 作品数:53 被引量:131H指数:7
- 供职机构:天津医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市科技攻关项目天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 单纯疱疹病毒Ⅰ和Ⅱ型共同抗原gD在大肠埃希菌中的重组表达被引量:5
- 2002年
- 目的 克隆人单纯疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ (HSV Ⅰ、Ⅱ )型共同性抗原gD基因 ,构建重组表达载体pMAL c2 gD ,诱导融合蛋白MBP gD的表达。方法 提取病毒DNA ,PCR扩增出gD基因 ,克隆于原核表达载体pMAL c2并转化大肠埃希菌DH5α。PCR、双酶切及测序证实插入的gD基因序列正确后 ,IPTG诱导表达融合蛋白MBP gD ,并进行免疫学鉴定。结果 构建的重组表达质粒pMAL c2 gD在大肠埃希菌中能高效表达。经SDS PAGE分析 ,表达产物约占菌体总蛋白 35 5 % ,其中 39%以可溶蛋白形式存在于胞质中 ,61 %以包涵体形式存在。结论 构建了pMAL c2 gD表达质粒 ,Westernblot证实 ,HSV ⅠgD单克隆抗体DL6可特异识别表达的gD蛋白 。
- 李梅李晓眠刘民
- 关键词:人疱疹病毒膜糖蛋白类
- 抗SARS-CoV重组纤突蛋白单克隆抗体的制备和鉴定被引量:1
- 2005年
- 秦宇李梅刘中华石立莹毛乃颖许文波李晓眠
- 关键词:SARS-COV单克降抗体
- GD白细胞减少易感性与HLA-DRB1基因多态性的关联和GD患者血清GM-CSF的变化及其血清成分对CFU-GM的影响
- 第一部分:Graves病白细胞减少易感性与HLA-DRB1基因多态性的关联.目的:研究天津地区汉族Graves病(GD)白细胞减少易感性及其易感性与HLA-DRB1基因的关联.结论:天津地区汉族GD白细胞减少易感性与HL...
- 李梅
- 关键词:HLA-DRB1基因粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子他巴唑
- 文献传递
- Mab筛选和应用的研究进展被引量:2
- 2007年
- 单克隆抗体(monoclonal antibodies,Mab)是指只针对一个抗原表位的结构与各种特性完全相同的高纯度抗体。Mab的制备方法经历了从杂交瘤抗体到转基因动物抗体到基因工程抗体的过程。首先是基于杂交瘤抗体具有鼠源性,应用到人体会产生人抗鼠抗体反应(human anti-mouse antibody,HAMA),而产生了转基因动物Mab。
- 李越李晓眠李梅
- 关键词:单克隆抗体基因工程抗体分子进化噬菌体展示技术核糖体展示技术
- HSV-1感染大鼠骨髓间充质干细胞及形成潜伏感染的初步研究被引量:3
- 2008年
- 在体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察单纯疱疹病毒1型感染骨髓间充质干细胞情况。分离并鉴定BMSCs;HSV-1感染BMSCs,观察细胞病变(CPE);建立BMSCs的HSV-1潜伏感染模型。提取总DNA,PCR法扩增BMSCs内的HSV-1特异性片段,检测HSV-1感染BMSCs及潜伏感染。结果显示骨髓间充质干细胞经14d诱导后,碱性磷酸酶含量增高、形成钙结节,表现出成骨细胞特性。HSV-1感染BMSCs,出现典型的CPE,PCR法证实BMSCs内存在HSV-1的特异性片段。HSV-1潜伏感染的BMSCs,未出现明显的CPE,细胞传至7代,仍可测到HSV-1的基因片段,表明BMSCs有可能形成HSV-1的潜伏感染。大鼠骨髓间充质干细胞在体外可以向成骨细胞方向分化,可作为组织工程学的种子细胞。HSV-1可以在体外感染骨髓间充质干细胞并有形成潜伏感染的趋势。
- 潘丽李晓眠李梅王卿
- 关键词:单纯疱疹病毒1型骨髓间充质干细胞器官移植
- SD大鼠脂肪源间充质干细胞分离培养特性及影响因素被引量:9
- 2011年
- 背景:脂肪源间充质干细胞因为容易大量获得、抽取后残留于供区的脂肪组织仍可扩增、供区的损伤小等优点,成为干细胞生物工程研究的理想种子细胞来源。但是,脂肪源间充质干细胞分离培养有较大困难。目的:探索脂肪源间充质干细胞的分离培养方法及其生长特性。方法:分别取4周龄和10月龄不同性别的SD大鼠腹股沟、肩部和腹腔脂肪组织,经细胞培养液洗涤、离心后接种于细胞培养瓶,放置体积分数5%CO2孵箱中培养,分别于24,48,72h后换液。待细胞密度达到约80%时,用0.25%胰酶-EDTA消化,传代培养。分析SD大鼠的年龄、性别、采集脂肪组织的部位、胶原酶Ⅰ的浓度和消化时间,以及原代细胞的首次换液时间等对脂肪源间充质干细胞培养的影响。结果与结论:原代脂肪源间充质干细胞呈梭形或多角形。随着传代和培养时间的延长,脂肪源间充质干细胞由多边形、成巢分布,逐渐连接成片,伸展为梭形或多角形。培养48h后,含脂滴的细胞数量逐渐增多,但仍有90%的脂肪源间充质干细胞始终不表现向脂肪细胞自发分化的趋势。4周龄雌性SD大鼠腹腔脂肪组织在一定条件下传代培养最佳。提示,从SD大鼠腹腔脂肪组织中分离的脂肪源间充质干细胞可在体外稳定传代,SD大鼠的年龄、性别、采集脂肪组织的部位、胶原酶Ⅰ的浓度和消化时间,以及原代细胞的首次换液时间等均影响脂肪源间充质干细胞的分离培养效果。
- 侯凯李梅杨逸昆李纯李金茹黄德清
- 关键词:脂肪源间充质干细胞细胞来源生物工程
- 副粘病毒Tianjin株F基因真核表达载体的构建及初步鉴定
- 2007年
- 为研究仙台病毒主要表面抗原f蛋白对小鼠的免疫效果,应用RT-PCR从副粘病毒Tianjin株基因组中扩增出F基因,将其插入pcDNA3的Pcmv下游,构建了F基因真核表达载体,同时使用PCR、限制性酶切和测序等方法对其进行了鉴定,鉴定结果证实构建成功.构建好的F基因真核表达载体可为下一步的体外表达和动物免疫实验奠定基础.
- 张国际李晓眠钟启平李梅
- 关键词:F基因真核表达载体
- H102对APP转基因小鼠脑内IDE和NEP表达的影响被引量:2
- 2010年
- 目的:观察H102对β淀粉样蛋白前体(APP)转基因小鼠脑内胰岛素降解酶(IDE)及脑啡肽酶(NEP)的影响。方法:将APP转基因小鼠随机分为模型组和给药组,每组10只;并设10只同月龄同背景C57BL/6J小鼠为对照组。对照组、模型组每日侧脑室注射生理盐水,给药组每日注射H102(80μmol/L)生理盐水溶液。4周后行Morris水迷宫测试。之后采用免疫组化方法观察小鼠脑组织内IDE及NEP阳性细胞的表达变化及蛋白质免疫印迹技术半定量检测两者的含量。结果:⑴Morris水迷宫测试:给药组小鼠比模型组小鼠学习记忆能力提高(P<0.05,P<0.01)。⑵免疫组化测试:给药组及对照组小鼠脑内IDE及NEP阳性细胞表达均比模型组增强(P<0.01)。(3)蛋白质免疫印迹检测结果:对照组及给药组小鼠脑组织内Aβ42与APP含量均低于模型组(P<0.01),且IDE与NEP含量均高于模型组(P<0.01)。结论:H102可提高APP转基因小鼠脑内IDE及NEP的活性及含量,改善学习记忆能力,降低Aβ及APP的水平,有助于改善阿尔茨海默病(AD)病情,为治疗AD提供前景。
- 宋明李梅林来祥徐淑梅
- 关键词:转基因小鼠IDENEP阳性细胞表达注射生理盐水胰岛素降解酶
- 临床分离531株革兰阴性杆菌的分布与耐药性分析
- 2007年
- 【目的】了解从临床患者分离的革兰阴性杆菌的分布及其耐药性特征,指导临床合理使用抗菌药物。【方法】用药敏纸片法对我院2005年1月-2005年12月各类感染标本中分离的革兰阴性杆菌共531株进行药敏试验和用表型确证试验进行ESBLs的检测。【结果】我院分离的革兰阴性杆菌主要为大肠埃希菌(36.3%)、铜绿假单胞菌(23.0%)、肺炎克雷伯菌(14.7%)。这些菌株对12种抗生素的敏感率各不相同,亚胺培南仍是对革兰阴性杆菌抗菌作用最强的一类抗生素,头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦也有较好的抗菌活性。大肠埃希菌和肺炎克雷菌ESBLs的检出率分别为26.9%和38.5%。产酶菌株对抗菌药物的敏感率显著降低。【结论】我院分离的革兰阴性杆菌耐药性强且多重耐药,临床实验室应加强对ESBLs的检测,了解各菌种的耐药特点,指导临床合理使用抗菌药物并严密监控新的耐药菌的产生。
- 靳颖张爱民汤庆林李梅
- 关键词:革兰阴性杆菌药物敏感试验耐药性
- H102对APP转基因小鼠胆碱能系统及自由基的影响
- 阿尔茨海默症(Alzheimer’sd isease,AD)是一种神经退行性疾病,已成为导致老年人死亡的三大疾病之一。研究表明β-淀粉样蛋白沉积是AD发病的中心环节,而H102恰是一种用于阻止可溶性β-淀粉样蛋白寡聚体和...
- 李梅林来祥徐淑梅
- 文献传递