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刘民: 作品数：66 被引量：204H指数：8; 供职机构：天津医科大学更多>>; 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金天津市科技发展战略研究计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>

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胶质瘤耐药细胞株的建立及其继发性耐药相关基因的筛查被引量：1: 2007年; 目的:构建胶质瘤耐替尼泊苷(teniposide,又称VM-26)细胞株,利用基因芯片筛查该细胞株继发性耐药相关基因并证实其表达。方法:选用人胶质瘤细胞系SHG44为靶细胞,从低剂量起始逐步递增用药量(每4 000个细胞VM-26剂量由0.135 ng至4.5 ng)诱导建立对VM-26耐药的细胞株,绘制亲代细胞系和耐药细胞株增殖曲线比较两者倍增时间,采用细胞毒性实验计算半数抑制浓度(IC_(50))比较两者耐药程度的差异。应用人类cDNA表达谱芯片检测耐药和敏感细胞基因表达谱的变化,筛查出与耐药有关的基因并经半定量RT-PCR验证。结果:经过72代诱导培养,建立了稳定耐药的细胞株SHG44/VM-26,耐药性是亲代细胞的52.6倍;耐药细胞倍增时间明显长于亲代细胞(25.6 vs 48.9 h);cDNA芯片筛选出11个基因表达上调,42个基因表达下调;半定量RT-PCR证实基因MDR1、NGFR、HSP22、CX IX、CDKN3和NADE的表达与基因芯片结果基本一致。结论:成功建立胶质瘤耐替尼泊苷细胞株SHG44/VM-26,该细胞株的继发性耐药与基因MDR1、NGFR、HSP22的高表达和CX IX、CDKN3和NADE的低表达相关。; 强兆艳汤华李欣刘民; 关键词：胶质瘤替尼泊苷耐药细胞株 CDNA芯片耐药相关基因

用间接ELISA法检测柯萨奇B组病毒特异性IgM抗体: 1994年; 用间接ＥＬＩＳＡ法检测柯萨奇Ｂ组病毒特异性ＩｇＭ抗体李晓眠，刘民，罗世春，马海伦，任中原（天津医学院微生物学教研室，天津３０００７０）特异性ＩｇＭ抗体的检测是早期诊断传染病的可靠方法之一。在病毒感染疾病中已广泛应用直接、间接和抗体捕捉ＥＬＩＳＡ法作早...; 李晓眠刘民罗世春马海伦任中原; 关键词：柯萨奇病毒 ELISA 免疫球蛋白M

MicroRNA在6种肿瘤细胞中的表达差异被引量：10: 2007年; 目的:利用生物芯片技术分析6种不同器官肿瘤细胞中microRNA(miRNA)的表达差异。方法:将210个与已知人类和小鼠miRNA互补的序列(206个miRNA,4个阳性对照)作为探针,点于玻片上制备寡核苷酸芯片。提取肿瘤细胞HeLa(人宫颈癌上皮细胞)、MCF-7(人乳腺癌细胞)、A549(人肺腺癌细胞)、HT-29(人结肠腺癌细胞)、ES-2(人卵巢透明细胞癌)、K562(人慢性髓细胞性白血病细胞)的miRNA,荧光染料Cy3标记,并与制备好的芯片杂交;用ScanArrayTM Express1.0扫描仪扫描荧光信号,采用ScanArray3.0和Cluster3.0软件分析处理扫描结果;Northern blotting和RT-PCR方法对芯片检测结果进行验证。结果:在6种不同器官肿瘤细胞中,检测到115种miRNA存在差异,91种miRNA没有明显差异;其中,miR-21在6种肿瘤细胞表达水平均较高,miR-125b表达水平均较低,let-7不同亚型在6种细胞系中表达水平较低;miR-17-5p和miR-20a呈集簇表达,在卵巢肿瘤ES-2细胞中的表达水平高于其他细胞,乳腺肿瘤细胞系MCF-7和宫颈癌细胞系HeLa的miRNA表达谱聚为一类。Northern blotting检测到miR-17-5p及其前体在K562细胞中均见表达,A549和ES-2细胞中只见较弱的前体表达,MCF-7、HeLa和HT-29中可见明显的前体和较弱的成熟miRNA的表达。RT-PCR检测到miR-17-5p前体在K562细胞中表达水平高于其他几种细胞,在ES-2细胞中的表达量低于K562细胞,同时高于另外4种细胞;miR-21在6种肿瘤细胞中表达水平均较高,在A549细胞中表达最高。结论:应用生物芯片技术检测肿瘤细胞中miRNA的表达差异为进一步探索miRNA与肿瘤间的关系奠定基础。; 马卓娅汤华李欣刘民吴海东王晶; 关键词：MICRORNA 肿瘤细胞寡核苷酸芯片

miR-1236在制备抑制肝癌细胞生长药物的用途: 本发明公开miR-1236在制备抑制肝癌细胞生长药物的用途，采用miRNA生物信息学网站预测的方法，首次发现miR-1236是AFP的上游调控分子，且在肝癌组织及与癌旁正常肝组织中的AFP mRNA和miR-1236的表...; 汤华高蕊张怡刘民万海英王芳; 文献传递

新型含悬挂羧基聚乳酸的制备及其血液相容性和细胞粘附性被引量：1: 2008年; Biodegradable α-hydroxyl polyesters,such as poly(lactic acid)(PLA)and poly(lactic-co-glycolic acid)(PLGA)were investigated as scaffolds for tissue engineering.However,polymeric materials on the basis of lactide are limited in blood vessel engineering due to their poor hydrophilicity and low affinity for the cells.In this study,the functional polylactide with pendant carboxyl(PLMACA)was synthesized,which was expected to improve the blood compatibility and cell adhesion of polyester based on PLA.The structure and composition of PLMACA were confirmed via {}1H NMR spectrum and the compatibilities for blood and cell were stu-{died.} The results show that the PLMACA is hopeful to be used as blood vessel substitute with good HUVEC adhesion and anti-platelet adhesion.; 王蔚贾小华刘媛王亮袁直汤石明刘民汤华; 关键词：聚乳酸血液相容性内皮细胞粘附

间接ELISA检测无菌性脑膜炎患儿的埃可病毒特异性IgM抗体被引量：1: 2001年; 目的 :研究检测患儿脑脊液和血清标本的特异性IgM在诊断埃可病毒感染的无菌性脑膜炎的实用价值。方法:采用埃可病毒混合抗原包被酶标板 ,用间接ELISA方法检测脑脊液和血清标本的特异性IgM抗体。结果 :在临床诊断为无菌性脑膜炎患儿的78份脑脊液和203份血清标本中分别有14份 (17.9 % )和48份 (23.6 % )阳性 ,而36份细菌性脑膜炎和30份脑外伤患者脑脊液仅1份阳性 ;细菌性脑膜炎、正常成人血清均为阴性。结论:本方法快速、简便、可靠 ,适合于临床早期诊断。; 刘民李晓眠; 关键词：埃可病毒无菌性脑膜炎

促甲状腺激素液相芯片检测法的建立和方法学评价被引量：3: 2009年; 目的建立用液相芯片技术测定促甲状腺激素（TSH）的方法，对其方法学和临床应用价值作评价。方法通过抗TSH的单抗交联单色荧光微球，采用标记有生物素的另一配对抗TSH的单抗以及由藻红蛋白（PE）标记的亲合素组成相应的荧光报告系统，用液相芯片仪Luminex100检测待检标本荧光强度，通过TSH标准浓度绘制出标准TSH浓度荧光强度剂量曲线。用液相芯片技术测定100份临床血清标本的TSH浓度并与拜尔的化学发光法的测定结果做方法学比较。结果液相芯片技术测定TSH的线性范围为0．3～162μIU／mL，高、中、低3个浓度的批内精密度为10．00％、6．91％、17．80％。高、中、低3个浓度的回收率为94．3％、96．7％、95．2％。与拜尔的化学发光法的相关系数为0．965（P=8．77×10^-57）。结论本研究建立的液相芯片技术在TSH测定中的主要技术指标与拜尔的化学发光法相近，有临床应用价值。; 刘民汤华杨洋浦永董卓亮李欣; 关键词：液相芯片促甲状腺激素

PIWIL4的克隆及其抗体制备和初步应用: 2010年; 目的制备兔抗人PIWIL4的多克隆抗体，鉴定其特异性，并应用该抗体检测内源性PIWIL4在人各细胞系中的表达差异及细胞定位。方法构建原核表达质粒pGEX-5X-1．PIWIL4，转化大肠杆菌BL21，PIWIL4蛋白经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达。融合蛋白通过切胶纯化后免疫家兔制备抗体血清。以间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗体效价，Westernblot鉴定抗体特异性及检测PIWIL4在各细胞系中的表达差异，免疫荧光染色观察PIWIL4的细胞定位。结果成功构建原核表达质粒，表达并纯化PIWIL4蛋白。免疫大白兔后得到PIWIL4多克隆抗体，ELISA检测抗体效价为1：20000，Westernblot和免疫组化确定抗体具有高度特异性，并成功地应用该抗体检测到PIWIL4在人多种细胞系中的表达差异及细胞定位。结论PIWIL4蛋白及其多克隆抗体的成功制备，为进一步研究PIWIL4的生物学功能奠定了基础。; 苏畅浦永孔鹏洲王萌刘民汤华; 关键词：原核表达抗体肿瘤

miRNA-10a在制备抑制结肠癌的侵袭和转移药物中的应用: 本发明公开了miRNA-10a在制备抑制结肠癌的侵袭和转移药物中的应用，所述miRNA-10a是序列表中SEQ ID NO：1所述的核苷酸序列。通过实验表明：与低转移性细胞株SW480相比，miRNA-10a在高转移性细...; 汤华李欣吴海东刘涛万海英李怡璇王芳刘民; 文献传递

MicroRNA-17-5p反义寡核苷酸阻滞白血病K562细胞的细胞周期: 2010年; 目的:以反义寡核苷酸技术研究microRNA-17-5p(miR-17-5p)对人慢性髓系白血病K562细胞增殖的影响及其可能的机制。方法:脂质体法将miR-17-5p反义寡核苷酸(miR-17-5p antisense oligonucleotide,miR-17-5p-ASO)和对照无义寡核苷酸(control nonsense oligonucleotide,Ctrl-NSO)转染入K562细胞,同时设未转染对照组(Ctrl)。MTT法检测K562细胞的增殖,TUNEL法检测K562细胞的凋亡,流式细胞术检测K562细胞周期的改变。结果:MTT检测结果显示,miR-17-5p-ASO组K562细胞增殖活性为Ctrl-NSO组的(61.7±4.7)%,miR-17-5p-ASO转染显著抑制K562细胞的增殖(P<0.05)。TUNEL检测显示,miR-17-5p-ASO转染不影响K562细胞凋亡(P>0.05);miR-17-5p-ASO组K562细胞G2期细胞比例为(10.8±0.8)%,显著低于Ctrl-NSO组和Ctrl组的(34.6±0.4)%和(33.9±1.3)%(P<0.05)。结论:MiR-17-5p反义寡核苷酸可以通过调控细胞周期抑制K562细胞的增殖,有望成为白血病治疗的新手段。; 马卓娅李欣汤华刘民; 关键词：反义寡核苷酸白血病 K562细胞细胞周期

刘民

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