朱载华
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 三氧化二砷对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4+T细胞IFN-γ表达及其mRNA的影响被引量：4
- 2009年
- 目的:观察三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4+T细胞分泌IFN-γ及其mRNA的影响。方法:免疫磁珠分别分选18～20周MRL/lpr狼疮小鼠和C57BL/6J正常对照小鼠脾脏CD4+T细胞,采用流式细胞术鉴定细胞纯度。PHA-p(20μg/mL)和IL-2(1000IU/mL)常规刺激48h后进行如下实验:(1)不同浓度ATO(0.5、1.0和2.0μmol/L)作用24h;(2)1μmol/LATO作用不同时间(12、24和48h);(3)不同药物处理组:①PBS组:空白对照;②ATO组:1μmol/LATO;③5-氮杂胞苷(5-AzaC)组:1μmol/L5-AzaC;④ATO+5-AzaC组:1μmol/LATO+1μmol/L5-AzaC。酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清液IFN-γ的表达量;实时荧光定量PCR法检测不同药物处理组中IFN-γmRNA的表达情况。结果:①1.0μmol/LATO作用24h对细胞存活率无明显影响。②1mmol/lATO作用24h能抑制MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞IFN-γ的转录和翻译水平。③经5-AazC处理后MRL/lpr和C57BL/6J小鼠脾脏CD4+T细胞IFN-γ的转录和翻译水平升高,1mmol/LATO作用24h能抑制其异常活化状态。④MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞IFN-γ的分泌和表达水平均较C57BL/6J小鼠明显升高。结论:1mmol/LATO作用24h能在一定程度上有效抑制活化状态下MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞IFN-g的异常分泌,下调其mRNA表达水平而不影响其存活率。
- 陈培荣朱载华邹正平朱小春
- 关键词：三氧化二砷5-氮杂胞苷Γ-干扰素
- 三氧化二砷对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4^+T细胞IFN-γ基因启动子甲基化的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:观察三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4+T细胞IFN-γ基因启动子甲基化的影响。方法:免疫磁珠法分选16～18周MRL/lpr狼疮小鼠和C57BL/6J正常对照小鼠脾脏CD4+T细胞,PHA-p(20μg/mL)和IL-2(1 000 IU/mL)刺激48 h后分为以下不同药物处理组:①PBS组:空白对照;②ATO组:1μmol/L ATO作用24 h;③ATO+5-氮杂胞苷(5-AzaC)组:1μmol/L 5-AzaC作用72 h后1μmol/L ATO作用24 h。CD4+T细胞经过以上处理后抽提基因组DNA,亚硫酸氢盐修饰,PCR扩增IFN-γ基因启动子,产物凝胶回收,克隆入pMD-19T载体,转化入E.coli DH5α,筛选阳性克隆测序,测序结果采用生物信息学软件进行分析。结果:①MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞IFN-γ基因启动子呈低甲基化水平。②1μmol/LATO作用24 h后MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平明显增高。③1μmol/L ATO作用24 h能使经过5-AzaC干预后的MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞IFN-γ基因启动子甲基化水平明显增高。结论:1μmol/L ATO作用24 h能在一定程度上有效逆转活化状态下MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞IFN-γ基因启动子低甲基化。
- 朱载华孙莉陈丹张乾坤嘉婷邹正平朱小春
- 关键词：三氧化二砷Γ-干扰素甲基化
- 砒霜对狼疮鼠T细胞甲基化的影响
- 孙莉周艳朱小春王晓冰夏晓茹王红朱载华陈朝生嘉婷
- 浙江省中医药科技计划项目《砒霜对狼疮鼠T细胞甲基化的影响》(项目编号：2006Y014)研究了砒霜对MRL/1pr狼疮鼠基因组甲基化水平及DNA甲基转移酶1mRNA水平的影响，来探讨砒霜是否能逆转狼疮鼠的低甲基化状态，明...
- 关键词：
- 关键词：系统性红斑狼疮治疗中药治疗砒霜
- 三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠脾脏淋巴细胞组蛋白乙酰化的影响被引量：2
- 2010年
- 观察三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对MRL/lpr狼疮鼠脾脏淋巴细胞组蛋白H3乙酰化水平的影响以及对组蛋白乙酰基转移酶(histone acetyltransferases,HATs)和组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)活性的影响。将20周龄MRL/lpr狼疮鼠和正常C57BL/6J小鼠无菌条件下取出脾脏,配制成脾脏淋巴细胞悬液。体外经PHA-P(20μg/ml)和IL-2(1000 U/ml)常规刺激48 h后,随机分为3组:ATO组;曲古抑菌素(Trichostatin A,TSA)组;RPMI 1640组。继续培养24 h。免疫印迹法测定乙酰化组蛋白H3的表达量;酶活性试剂盒分别测定HAT和HDAC活性。结果显示在MRL/lpr狼疮鼠中RPMI 1640组、ATO组、TSA组组蛋白H3乙酰化水平分别为0.46±0.06、O.87±0.02、1.6±0.13(n=3),且差异具有显著的统计学意义(P<0.01);ATO和TSA能明显降低HDAC活性(P<0.01);而对于HAT,三组间两两相比差异无统计学意义;ATO组和TSA组HDAC/HAT的比值明显低于RPMI 1640组。而在C57BL/6J小鼠中,ATO组和RPMI 1640组之间以上指标均无差异。研究结果表明AT0能明显抑制MRL/lpr狼疮鼠脾脏淋巴细胞的HDAC活性,下调HDAC/HAT的比值,提高组蛋白H3的乙酰化水平,而对正常小鼠并无明显影响。
- 嘉婷强孚勇张挺朱载华朱小春
- 关键词：三氧化二砷组蛋白乙酰化组蛋白去乙酰化酶
