时炳正
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：佳木斯大学附属口腔医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划黑龙江省研究生创新科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠骨髓间充质干细胞悬液短期保存的可行性及DNA酶Ⅰ预处理降低静脉注射风险性研究
- 目的：本研究为前期本实验室将异体同种骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs）悬液经山羊颈静脉注射致急性肺栓塞发生故设计探索性的实验，目的在于比较4℃恒温条件下短...
- 时炳正
- 关键词：口腔组织工程
- 4℃条件下保存不同时间点小鼠骨髓间充质干细胞的细胞活性和生物学特性研究被引量：2
- 2013年
- 目的:本研究旨在比较4℃条件下保存时间对小鼠骨髓间充质干细胞的细胞活性和生物学特性的影响,为安全有效短期保存BMSCs提供参考。方法:体外分离培养纯化小鼠骨髓间充质干细胞,使用磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline PBS)为小鼠骨髓间充质干细胞的短期储存液,直接将骨髓间充质干细胞置于4℃保存,分别在0、4、12、24、48h观察细胞形态、活细胞比例、细胞增殖和分化能力。结果:小鼠骨髓间充质干细胞于4℃条件下保存0、4、12h和24h镜下见细胞形态良好、活细胞比例仍接近80%,细胞增殖和分化能力与0h相比未见显著性差异;保存至48h镜下见死细胞和细胞碎片增多、活细胞比例仅接近20%,细胞增殖和分化能力与0h相比存在显著性差异(P<0.05)。结论:4℃条件下24h内保存小鼠骨髓间充质干细胞,是一种简洁有效可行的短期保存方法。随保存时间的延长细胞逐渐丧失细胞活性和生物学特性。
- 时炳正徐志媛杜晓岩范龙坤陈勇廖立金岩赵世俊
- 同种异体BMMSCs对去势山羊体内BMMSCs生物学行为影响的研究
- 2013年
- 目的：观察去势山羊接受静脉注射同源异体骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells，BMMSCs）后，其体内BMMSCs增殖及分化功能的改变。方法：取3—6岁关中雌性山羊15只，随机分为双侧卵巢切除组（OVX）、双侧卵巢切除24h后静脉注射同源异体BMMSCs组（OVX＋injection）和假手术对照（sham）组（n=5），并进行相应处理。1年后分离各组山羊的BMMSCs，MTT法检测其增殖能力；成骨、成脂诱导培养后，采用茜素红染色和油红O染色观察其多向分化能力。结果：去势1年后，OVX组与Sham组相比，BMMSCs的增殖能力和成骨分化能力均明显下降，而成脂分化能力明显增强（P〈0．05）；OVX＋injection组BMMSCs的增殖和成骨分化能力均较OVX组明显提高，而成脂分化能力明显下降（P〈0．05）。结论：静脉注射同种异体BMMSCS可逆转去势后BMMSCs的功能异常。
- 杜建宇廖立时炳正王艳丽张立超安玉林金岩李德超
- 关键词：卵巢切除山羊细胞移植
- miR-26a对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化能力的调控作用被引量：10
- 2012年
- 目的利用小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨分化模型,探讨miR-26a在成骨分化中的表达趋势及调控作用。方法提取雌性C57/BL6J小鼠双侧下肢股骨骨髓分离培养BMSCs,诱导分化为成骨细胞,通过实时定量PCR检测miR-26a在BMSCs及其诱导分化细胞中的表达。使用miR-26a的促进物miR-RiboTMmicroRNA-26a mimics通过siPORTTMNeoFXTMagent转染试剂瞬时转染BMSCs并加入成骨诱导剂培养,同时设立转染microRNA-26a mimics NC的对照组。培养7 d、14 d后,进行细胞形态、碱性磷酸酶(ALP)染色、钙盐结节(茜素红染色)等项目的检测。另外制造绝经后骨质疏松小鼠模型(OVX组)与假手术动物模型(sham组),RT-PCR检测OVX组中miR-26a的表达。结果 miR-26a的表达在BMSCs向成骨分化过程中上升约25倍,成骨基因的表达也随着诱导时间的延长逐渐升高。转染miR-26a mimics后的BMSCs在培养7d后逐渐由梭形变为多角形,与阴性对照组类似;ALP染色显示阴性对照组培养7 d后为阳性,而实验组在培养7 d时呈强阳性;茜素红染色显示实验组培养14d后出现数量较多的钙盐沉积结节,而阴性对照组则较少。miR-26a mimics组成骨基因的表达均高于对照组。RT-PCR检测结果显示OVX组中miR-26a的表达低于sham组4倍。结论 miR-26a mimics的转染可以促进BMSCs的成骨分化潜能,在骨质疏松的环境中miR-26a表达下降,间接证实了miR-26a对小鼠BMSCs成骨潜能的促进作用。
- 范龙坤华泽权金岩时炳正
- 关键词：成骨分化骨髓间充质干细胞
- DNA酶Ⅰ抑制细胞聚集降低骨髓间充质干细胞静脉注射发生急性肺栓塞的风险被引量：1
- 2013年
- 目的:探索DNA酶Ⅰ处理后骨髓间充质干细胞降低急性肺栓塞的发生。方法:体外培养小鼠骨髓间充质干细胞。C57小鼠分PBS注射组、10U/mL DNaseⅠ-PBS注射组、正常BMSCs注射组、DNaseⅠ处理后BMSCs注射组。PBS注射组与正常BMSCs注射组尾静脉注射PBS或临界致死剂量的BMSCs,脏器组织学检测,PBS注射组对照,观察急性死亡率;比较正常BMSCs与DNaseⅠ处理后BMSCs体外增殖、分化能力和悬液中细胞聚集状态;DNaseⅠ处理后BMSCs注射组注射DNaseⅠ处理后3×106个BMSCs 5ml/kg观察急性死亡率。结果:PBS注射组相比正常BMSCs注射组急性死亡率为60%、心肺异常、肺血管内异染物质,急性肺栓塞;DNaseⅠ预处理不影响BMSCs体外增殖分化能力;DNaseⅠ处理BMSCs较正常BMSCs聚集成团细胞比例显著下降。DNaseⅠ处理后BMSCs注射组的急性死亡率为23.3%,与正常BMSCs注射组比较差异显著。结论:DNaseⅠ预处理不影响BM-SCs的生物学特性并能抑制单细胞聚集降低静脉注射BMSCs所导致的急性肺栓塞。
- 时炳正徐志媛杜晓岩杜建宇范龙坤毕焕京廖立金岩
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞鉴定DNASE
