方芳
- 作品数：21 被引量：138H指数：8
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：湖南省科技厅重点项目湖南省卫生厅科研基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脂肪基质干细胞移植治疗大鼠脑出血的实验研究
- 目的探讨脂肪基质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)移植对脑出血大鼠的疗效及机理。方法体外培养扩增的ADSCs于造模成功后24小时立体定移植入大鼠右侧脑室,移植后3、7、14、21、...
- 吴雷柴志勇方芳杨转移杨靓陈若琨方加胜
- 通窍止痛汤治疗偏头痛瘀血型临床研究被引量：1
- 2013年
- 目的:观察通窍止痛汤治疗偏头痛瘀血型的临床疗效。方法:将80例患者随机分为治疗组和对照组。治疗组采用通窍止痛汤治疗,对照组采用西比灵胶囊治疗。分别测定2组治疗前后头痛积分、中医证候评分、血液流变学指标、血浆β-内啡肽(β-EP)水平和抑郁量表(SDS)、焦虑量表(SAS)评分的变化。结果:治疗后2组头痛积分均有不同程度的下降,与治疗前比较,差异均有显著性意义(P<0.05);2组治疗后比较,差异有显著性意义(P<0.05)。治疗后2组中医证候评分均有不同程度的下降,与治疗前比较,差异均有显著性意义(P<0.05);2组治疗后比较,差异有显著性意义(P<0.05)。治疗组治疗后的高切、低切、血浆黏度和纤维蛋白原水平均有下降,与治疗前比较,差异均有显著性意义(P<0.05);对照组治疗前后的低切和血浆黏度水平有所下降(P<0.05),高切和纤维蛋白改变不明显(P>0.05)。治疗后2组高切、血浆黏度和纤维蛋白原水平比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。治疗组治疗后血浆β-EP有所下降,与治疗前比较,差异有显著性意义(P<0.05);对照组治疗前后无明显变化。2组治疗后血浆β-EP含量比较,差异有显著性意义(P<0.05)。治疗组治疗后SDS评分、SAS评分与治疗前比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。对照组SDS评分、SAS评分与治疗前比较,差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:通窍止痛汤为治疗偏头痛瘀血型的有效方剂。
- 谭静方芳
- 关键词：偏头痛瘀血型血液流变学
- 自体脂肪干细胞移植脑冻伤大鼠脑内的作用被引量：12
- 2008年
- 目的：脂肪干细胞来源于成脂细胞,取材容易,已经成为干细胞研究一个新的方向。观察脂肪干细胞移植脑冻伤大鼠的脑组织局部组织学变化以及神经行为学变化。方法：实验于2006-01/2007-08在中南大学湘雅医院神经病学实验室完成。①实验材料：SD大鼠,雌雄不限,体质量300g左右,由中南大学湘雅医学院动物学部提供。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：体外培养并传代SD大鼠脂肪干细胞,并用BrdU标记。制作大鼠的脑冷冻伤模型,实验组在冷冻伤动物脑内移植脂肪干细胞,对照组在冷冻伤动物脑内移植培养基,假手术组仅行颅骨开窗,每组15只。③实验评估：分别在移植细胞后1,3,5,7,14,30d对实验动物进行NSS神经行为学评分,并制作脑组织切片,行免疫荧光染色检测BrdU阳性细胞。采用Tunel染色检测凋亡细胞,脑组织RT-PCR检测血管内皮生长因子、脑源性神经营养因子等因子mRNA表达。结果：①与对照组相比,实验组大鼠在3-14dNSS神经行为学评分降低（P〈0.05）。②免疫荧光检测显示,Brdu标记的脂肪干细胞在大鼠脑组织内存活并且迁移。③Tunel法检测显示,3d后实验组凋亡细胞数目明显少于其他组。④RT-PCR检测显示,与其他两组比较,移植脂肪干细胞的大鼠脑组织中血管内皮生长因子、脑源性神经营养因子表达更高。结论：脂肪干细胞可以在中枢神经系统中存活,并分化为神经元样细胞,它可以引起血管内皮生长因子、脑源性神经营养因子等因子的高表达从而减少细胞凋亡,加速神经功能修复过程并达到保护脑组织的目的。
- 周向阳邓永文方芳王飞陈若琨宋涛方加胜
- 关键词：脂肪干细胞脑冷冻伤神经行为学
- 急性冠状动脉综合征患者血清钙卫蛋白水平及其与冠状动脉病变范围的关系被引量：9
- 2014年
- 目的:了解急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者血清钙卫蛋白(S100 calcium-binding protein A8/A9 complex,S100A8/A9)水平及其与冠状动脉病变范围的关系。方法:收集2010年9月至2011年1月在中南大学湘雅医院心内科住院的冠心病(coronary heart disease,CHD)患者126例,其中又分为不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)组(UAP组,n=51),急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)组(AMI组,n=50)、稳定型心绞痛(stable angina pectoris,SAP)组(SAP组,n=25);选择同期在中南大学湘雅医院体检中心健康体检者25例作为健康对照组(NC组)。将ACS患者(UAP组+AMI组)按冠状动脉病变的范围又分为单支、双支和三支病变组。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组入院时空腹血清S100A8/A9水平,以及ACS患者(UAP组+AMI组)在入院规范治疗1周后的血清S100A8/A9水平,比较不同冠状动脉病变支数组的血清S100A8/A9水平,出院后3个月对ACS患者进行电话随访,了解患者的近期预后。结果:1)UAP组、AMI组的血清S100A8/A9水平明显高于SAP组、NC组(均P<0.05);SAP组血清S100A8/A9水平亦高于NC组(P<0.05);而UAP组与AMI组的血清S100A8/A9水平差异无统计学意义(P>0.05)。2)ACS患者经过1周规范治疗后,复查的血清S100A8/A9水平较入院时显著降低(P<0.01);但复查的血清S100A8/A9水平仍高于NC组的正常水平(P<0.01)。3)三支病变组的S100A8/A9水平明显高于单支病变组和双支病变组(均P<0.05)。4)血清S100A8/A9与ACS患者的近期预后无关(r=0.012,P>0.05)。结论:ACS患者血清S100A8/A9水平显著升高;ACS患者随冠脉病变支数的增加,血清S100A8/A9水平增高。
- 方晗谢楠秦莉峰夏珂方芳杨天伦
- 关键词：急性冠状动脉综合征炎症因子
- 脑肿瘤干细胞与神经上皮肿瘤病理级别的相关性被引量：18
- 2006年
- 目的:探讨脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cells,BTSCs)的分离、培养及鉴定的方法,研究BTSCs比例与人脑神经上皮肿瘤病理级别之间的相关性。方法:将人神经上皮肿瘤细胞接种于含生长因子的无血清培养基中,使其中的脑肿瘤干细胞增殖和传代,利用细胞免疫荧光及免疫组化法检测干细胞的特异性标记物Nestin和CD133的表达;采用免疫组化(SABC法)研究46例脑肿瘤及5例正常脑组织CD133的表达,并与肿瘤病理分级进行相关性分析。结果:可以从人神经上皮肿瘤病例中分离培养出BTSCs;BTSCs可以在体外增殖并传代,并且表达干细胞的特异性标记物Nestin和CD133;CD133在正常的脑组织中未见表达,在各级神经上皮肿瘤中均有表达,各级别肿瘤中的阳性细胞比例差异有显著性(P<0.01),CD133阳性细胞比例与肿瘤的恶性程度呈正相关(P<0.01)。结论:各种病理类型神经上皮肿瘤组织中均存在干细胞特征的细胞,CD133的表达与肿瘤级别呈正相关。
- 邓永文方加胜李茗初陈风华周向阳伍军周仁辉方芳陈成卢明曾飞跃
- 关键词：神经上皮肿瘤脑肿瘤干细胞CD133NESTIN病理级别
- 胶质瘤中肿瘤干细胞的分离、培养及鉴定被引量：22
- 2005年
- 目的在胶质瘤中分离,培养及鉴定脑肿瘤干细胞,观察脑肿瘤干细胞的生长特性,建立脑肿瘤干细胞分离、培养及鉴定的方法,为脑肿瘤干细胞的进一步研究打下基础。方法术中取胶质瘤细胞,接种于含生长因子的无血清培养基中培养,使其中的脑肿瘤干细胞增殖,并进行有限稀释实验确定肿瘤比例及增值能力;利用细胞免疫荧光及组织免疫组化法检测脑肿瘤干细胞在细胞培养或组织切片中CD133和Nestin的表达。结果在胶质瘤中,只有大约1%的细胞能在无血清培养基中存活并悬浮生长,并增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球,传代后脑肿瘤干细胞仍保持很强的自我更新和增殖能力;体外培养中脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物Nestin和CD133,在肿瘤组织切片中表达CD133阳性细胞。结论胶质瘤组织中存在极少数的脑肿瘤干细胞(大约为1%),并能在体外将其分离,培养;神经干细胞可能是脑肿瘤干细胞的起源细胞。
- 邓永文方加胜李茗初陈风华刘劲芳伍军周向阳方芳卢明陈成周仁辉曾飞跃
- 关键词：肿瘤干细胞CD133NESTIN胶质瘤
- 神经干单细胞获得的一种方法被引量：2
- 2007年
- 目的寻找一种有效获得神经干细胞单细胞的方法。方法运用胰蛋白酶,EDTA和不同浓度酵素对人胚神经干细胞球进行消化,免疫细胞化学染色鉴定及其分化。结果运用一定浓度的酵素可以获得大量成活的单个神经干细胞。而运用胰蛋白酶,EDTA消化后成活细胞少。结论运用一定浓度的diapase消化神经干细胞球是可获得大量成活的神经干细胞单个细胞的方法。
- 曾飞跃周仁辉黄永凯罗湘颖方芳卢明陈成
- 关键词：酵素单细胞
- 神经上皮来源脑肿瘤中肿瘤干细胞的分离培养与鉴定被引量：16
- 2007年
- 目的建立人神经上皮来源脑肿瘤中肿瘤干细胞的体外分离、培养体系，观察其分化现象，鉴定其特异性标志物，为脑肿瘤干细胞的进一步研究打下基础。方法将26例脑肿瘤手术中取出的脑肿瘤细胞，以2×10^5／ml的密度接种于含生长因子的无血清培养基培养，使其中的脑肿瘤干细胞增殖，并进行单克隆形成实验及溴脱氧尿苷掺入实验；然后将增殖形成的脑肿瘤干细胞球接种于无生长因子的含血清培养基诱导分化；利用免疫荧光和免疫组化法检测脑肿瘤干细胞在细胞培养和组织切片中CD133和巢蛋白的表达。结果各类肿瘤标本中仅有少数肿瘤细胞能够在无血清培养基中存活并悬浮生长，并增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球，传代后脑肿瘤干细胞保持很强的自我更新和增殖能力；在含血清培养基中脑肿瘤干细胞贴壁分化；体外培养中脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物CD133和巢蛋白，在肿瘤组织切片中存在CD133阳性细胞，其阳性表达率为（21．0±6．2）％～（38．0±7．0）％。结论人神经上皮来源脑肿瘤组织中存在少量具有自我更新和增殖能力、表达CD133和巢蛋白的脑肿瘤干细胞，并能在体外将其分离、培养和诱导分化；脑肿瘤干细胞有可能成为脑肿瘤基础研究的新平台和临床治疗的重要靶细胞。
- 方加胜邓永文李茗初陈风华王延金卢明方芳伍军杨转移周向阳王飞陈诚
- 关键词：肿瘤干细胞
- 小鼠血管内皮细胞转化机制研究
- 2009年
- 目的运用转基因小鼠股动脉的损伤模型模拟临床的血管内膜损伤,通过谱系追踪分析血管损伤后血管重构、血管内皮细胞增生及分化病理机制。方法运用可诱导的内皮细胞特异性标记的转基因小鼠与带有报告基因YFP(黄色荧光蛋白)的小鼠杂交,繁殖出可在诱导剂Tamoxifen注射后,YFP在内皮细胞特异表达的转基因小鼠。并模拟临床静脉移植术,建立小鼠颈静脉-股动脉内膜移植模型,设立术后0h(未损伤)、3、7、14和35d5个时间点。于各时间点取组织进行免疫化学染色和计数观察。结果活体的静脉移植实验中,标记YFP的内皮细胞系细胞逐渐获得平滑肌细胞的特征,而失去内皮细胞的特征。在离体实验中,内皮细胞(EOMA细胞)在TGF-β1诱导4d后同样显示出平滑肌细胞的特性。结论在血管移植后移植血管发生了血管重构,增厚的新生内膜中的内皮细胞转化为平滑肌样细胞。
- 方芳谢秀梅
- 关键词：平滑肌细胞内皮细胞新生内膜血管损伤血管重构
- 星形胶质细胞诱导神经干细胞定向分化试验研究(英文)被引量：4
- 2005年
- 目的研究新生SD大鼠星形胶质细胞培养上清液对神经干细胞(neuralstemcells,NSCS)体外定向分化的影响,探讨神经干细胞分化条件。方法收集新生和成年SD大鼠星形胶质细胞培养的上清液,以1∶3比例同DMEM/F12培基混合,分别对胎鼠来源的神经干细胞进行诱导分化,倒置相差显微境下观察细胞的生长情况,并采用免疫荧光检测方法对分化细胞鉴定和计数。结果新生鼠星形胶质细胞培养上清液与DMEM/F12的混合培基诱导神经干细胞分化为神经元的比例明显提高。结论新生鼠星形神经胶质细胞能促使神经干细胞向神经元方向分化。
- 周向阳邓永文方芳伍军李茗初高峻玮柳浩然方加胜
- 关键词：神经干细胞NSCS诱导分化
