张月
- 作品数：8 被引量：19H指数：3
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学政治法律更多>>
- 河北省不同地区奶牛乳房炎主要病原菌的分离鉴定和耐药性研究
- 奶牛乳房炎是奶牛养殖业中最常见的一种疾病，同时也是制约乳业发展的重要因素。本研究利用DHI数据监测和LMT法相结合方法对河北省7个地区的420份乳样诊断奶牛乳房炎的发病情况。结果，DHI数据监测显示从420份样品中检测出...
- 张月
- 关键词：奶牛乳房炎病原菌耐药基因
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病毒HB-bd毒株E2基因的克隆表达及免疫原性分析被引量：3
- 2015年
- 为了研究牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的免疫原性,试验采用PCR技术扩增牛病毒性腹泻病毒HB-bd毒株去除跨膜区的E2基因,将获得的s E2基因克隆到p ET20b载体构建重组质粒p ET20bs E2,并转化大肠杆菌BL-21(DE3)感受态细胞及诱导表达,应用SDS-PAGE、Western-blot和Dot-ELISA对表达产物进行分析,取纯化的表达产物加等量佐剂免疫家兔,观察免疫效果。结果表明:s E2基因得到了高效表达,表达的重组蛋白分子质量约为37.0 ku,表达产物能诱导免疫家兔产生高效价抗BVDV抗体。说明表达产物s E2蛋白具有良好的免疫原性。
- 吉星煜张晶张月常丽云左玉柱秦建华赵月兰
- 关键词：E2基因免疫原性
- 堆型艾美耳球虫ADF基因的原核表达与免疫原性
- 2015年
- 参考Gen Bank中收录的E.acervulina ADF基因序列设计1对特异性引物,以河北保定株堆型艾美耳球虫子孢子DNA为模板,用聚合酶链式反应(PCR)法扩增ADF基因。将扩增的ADF基因克隆至p MD18-T载体,转化感受态细胞DH5α,蓝白斑法筛选出阳性重组子,提取阳性质粒进行PCR、酶切鉴定及对序列确证。将扩增产物与原核表达载体p ET32a(+)连接,构建重组质粒p ET32a-ADF,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定。用E.acervulina重组质粒p ET32a-ADF免疫雏鸡,观察其对雏鸡细胞免疫和体液免疫功能的影响。结果显示,ADF基因扩增产物为729 bp,与预期结果相符。序列分析结果表明,该株的ADF基因序列与参考序列同源性达99.6%。表达出的ADF重组蛋白相对分子质量大小约为46 000。与健康对照组相比,重组质粒组淋巴细胞的增殖能力明显增强(P<0.05),外周血中Ig G及IL-2含量均显著升高(P<0.01),表明p ET32a-ADF质粒DNA能有效提高雏鸡的细胞免疫和体液免疫水平。
- 张晶刘义伟张月吉星煜赵月兰包永占秦建华
- 关键词：堆型艾美耳球虫原核表达免疫原性
- 利用重组外膜蛋白OMP31检测牛布氏杆菌血清抗体OMP31-ELISA方法的建立被引量：1
- 2014年
- 为了研究牛布氏杆菌血清抗体快速诊断方法,试验采用PCR技术从河北省某牛场流产污物中扩增得到牛布氏杆菌外膜蛋白OMP31基因,将该基因插入原核表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌DE3进行诱导表达,再将表达产物重组外膜蛋白OMP31纯化后作为抗原,建立检测牛布氏杆菌血清抗体的OMP31-ELISA,并对最适反应条件进行确定,然后对从河北省部分牛场采集的150份腹泻奶牛血样进行血清抗体检测。结果表明:牛布氏杆菌OMP31蛋白成功表达,表达产物能与牛布氏杆菌免疫兔血清反应;建立的OMP31-ELISA最佳工作条件为外膜蛋白OMP31抗原的最适包被浓度2.0μg/mL,酶标抗体的工作浓度1∶400,血清稀释度1∶160,以3%明胶-PBS封闭30 min。检测的150份临床血清样本中,特异性、敏感性和符合率分别为90.91%(50/55)、95.79%(91/95)、94.00%(141/150)。说明本方法特异性强、敏感性高,快速,使用方便。
- 张月吉星煜张晶马天宜左玉柱冯雪领赵月兰秦建华
- 关键词：抗体间接ELISA血清学诊断
- 犊牛疾病防治被引量：1
- 2014年
- 奶牛养殖过程中,犊牛培育十分重要,由于犊牛自身抵抗力较低,对众多病原易感性较高,加之部分养殖场饲养管理条件相对落后,特别是在生产中饲养管理不当,往往会造成犊牛患多种疾病.笔者根据多年的实践经验,对犊牛腹泻、肺炎和犊牛脐带炎的防治经验总结如下：
1 犊牛腹泻
犊牛腹泻是由细菌、病毒等感染或管理不当等引起的一类疾病,包括饮食性腹泻、感染性腹泻等,是犊牛最常见的疾病之一;本病一年四季均可发生,尤其以夏末秋初多发.三周龄以内的犊牛多发,其中两周龄以内犊牛感染性腹泻的死亡率最高,部分养殖场可达50％.本病对奶业的发展威胁很大.
- 曹文博张月张梦茜秦建华
- 关键词：犊牛培育疾病防治饲养管理条件感染性腹泻犊牛腹泻养殖过程
- 犊牛地克珠利中毒的诊治
- 2014年
- 衡水地区某奶牛养殖基地部分犊牛出现腹泻,疑似球虫病,对全群25头犊牛用抗球虫药物地克珠利灌服,用药后病牛病情加重,并有12头犊牛死亡。通过病史调查、临床症状、病理剖检及实验室检验确诊为地克珠利药物中毒。通过综合治疗,病情得到控制。
- 张晶张月马天宜吉星煜赵月兰王建永秦建华
- 关键词：犊牛地克珠利中毒诊治
- 牛病毒性腹泻病毒E0基因重组表达质粒pMG36e-E0的构建与免疫原性分析被引量：3
- 2014年
- 利用SacⅠ、HindⅢ限制性内切酶分别对pMG36e与pMD19-T-E0进行双酶切,将目的基因E0整合入穿梭表达载体pMG36e,构建牛病毒性腹泻病毒E0基因重组表达质粒pMG36e-E0。提取重组质粒pMG36e-E0,进行双酶切鉴定及PCR鉴定。将阳性重组质粒pMG36e-E0转化到大肠杆菌DH5α中进行表达,对表达产物进行SDSPAGE和Western-blotting鉴定。用表达的E0蛋白二次免疫家兔,间接ELISA法检测其血清抗体水平。结果,重组质粒经双酶切得到大小分别约为3 600、691bp的2个片段,PCR扩增出691bp的片段,双酶切与PCR鉴定结果表明目的基因E0正确插入到载体pMG36e中。SDS-PAGE电泳结果表明E0基因在大肠杆菌获得了表达,表达产物相对分子质量大小约为27 000。Western-blotting分析结果证明表达产物能被BVDV阳性血清所识别。ELISA检测结果证明表达的E0融合蛋白能刺激动物产生抗体,具有天然蛋白的免疫原性。
- 蒋禄峰赵月兰李苏楠吉星煜张晶张月王建永包永占秦建华
- 关键词：免疫原性
