宋娟娟
- 作品数：6 被引量：18H指数：3
- 供职机构：宁波大学生命科学与生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁波市自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 鲈鱼酰基辅酶A结合蛋白Acbp基因cDNA的克隆和诱导表达
- 2011年
- 酰基辅酶A结合蛋白(acyl-CoA-binding protein,ACBP)对长链脂酰基辅酶A(long-chainfatty acyl-CoA esters,LCACoA)有很高的亲和力,因而对LCACoA在细胞内的运输和利用过程起重要的作用。本文采用RACE技术从鲈鱼肝脏中克隆了Acbp基因的全长cDNA序列,该基因全长cDNA 679 bp,5'端和3'端的非翻译区分别为83 bp和326 bp,开放阅读框为270 bp。推测编码89个氨基酸,理论等电点为5.44,分子量为10.14 kDa。鲈鱼Acbp与青鳉鱼、银鳕鱼、大西洋鲑和人的同源性分别为87%、84%、78%和68%。用RT-PCR和实时定量PCR检测鲈鱼肌肉、心脏、眼、大脑、消化道、肾脏、脂肪组织、脾脏、鳃和肝脏等10种组织的Acbp基因的表达情况,结果表明,在肾脏和肝脏的表达量高,肌肉、眼睛和大脑中表达低。定量PCR检测表明鲈鱼肝脏Acbp的表达在饥饿时明显下降,胰岛素上调其表达,葡萄糖对其表达则没有影响。
- 钱云霞杨孙孝童丽娟宋娟娟钱伦
- 关键词：鲈鱼克隆
- 盐度和甜菜碱对鲈鱼BHMT mRNA表达的影响被引量：5
- 2011年
- 甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT,EC2.1.1.5)催化甜菜碱的甲基转移给高半胱氨酸(Hcy),而分别生成二甲基甘氨酸和蛋氨酸。利用RT-PCR和SMART RACE的方法从鲈鱼(Lateolabrax japonicus)肝脏中克隆了BHMT全长cDNA。该序列全长1461bp,5'端非翻译区72bp,3'端非翻译区183bp,开放阅读框1206bp,可编码一个由401个氨基酸组成的蛋白质,该蛋白质相对分子质量为44.32kD,等电点为7.21。氨基酸序列分析表明,BHMT具有较高的保守性,鲈鱼BHMT与人、小鼠等9个物种的同源性为77%～93%,其中与黄鲈(Percaflavescens)同源性最高,为93%。用RT-PCR分析BHMT基因在10个组织中的表达结果表明,只有在肝、肠和肾中有较高的表达。RT-PCR和定量PCR表明,鲈鱼从盐度25的海水转入盐度12的海水后,肝、肠和肾BHMT基因表达量有增加,而将鲈鱼从盐度为25的海水转入盐度为29的海水后,肝、肠和肾的BHMT基因表达则减少。腹腔注射甜菜碱可增加鲈鱼BHMT基因在肝、肠和肾三个组织中的相对表达量。这些结果表明,甜菜碱可诱导鲈鱼BHMT基因表达,而BHMT在适应鱼类环境渗透压变化中起重要作用。
- 钱云霞宋娟娟
- 关键词：鲈鱼克隆盐度
- 低盐度可诱导鲈鱼胞浆型PEPCK基因表达被引量：10
- 2010年
- 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸,是糖异生途径的第1个限速酶.本研究用SMARTRACE技术从鲈鱼肝脏中分离克隆了PEPCK基因的全长cDNA序列.该基因全长2215bp,包含1个123bp的5′非翻译区和217bp的3′非翻译区,开放阅读框为1875bp,编码1个由624个氨基酸组成的蛋白质,该蛋白理论分子量为69.1kD,等电点为5.87.氨基酸序列分析表明,与其它动物的胞浆型PEPCK相似性很高,与黑鲷为94.2%,与大西洋鲑为86.4%,与人为75.9%,而与该鱼线粒体型PEPCK氨基酸同源性只有70.6%.系统发育分析显示,该蛋白首先与其它动物的cPEPCK聚成一支,然后再与鱼类的mPEPCK成簇,认为该PEPCK属于胞浆型.同时用RT-PCR分析了PEPCK基因在10个组织中的表达,结果表明只有在肝脏、消化道和肾脏有较高的表达.将鲈鱼从盐度为25的海水转入盐度为12的海水48h后,肝脏和肾脏的PEPCK基因表达有增加.实验结果表明,本实验克隆的为鲈鱼胞浆型PEPCK,低盐度可诱导其表达.
- 钱云霞杨孙孝童丽娟宋娟娟钱伦
- 关键词：磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶鲈鱼克隆低盐度
- 大黄鱼CYP1A基因cDNA的克隆与表达分析被引量：1
- 2011年
- 由于外源化合物能诱导鱼类CYP1A(P4501A)的表达,因而它广泛被用作评价水环境污染生物标记物。利用RT-PCR结合RACE技术从大黄鱼(Larimichthys crocea)肝脏克隆了CYP1A基因全长cDNA序列。经分析,该cDNA的5'末端有175 bp的非翻译区,开放阅读框为1 566 bp,编码521个氨基酸和一个终止密码子,3'末端有857 bp的非翻译区,3'非翻译区有一个多聚腺苷酸信号及两个与mRNA的快速降解有关的AUUUA序列。推测大黄鱼CYP1A的氨基酸序列和欧洲鲈鱼的相似度最高达89.6%。用RT-PCR检测大黄鱼CYP1A的表达特征发现,在所检测的9个组织中均有表达,以肝脏、消化道、脾脏和肾脏的表达量较高。
- 宋娟娟钱伦钱云霞
- 关键词：大黄鱼克隆RACE
- 鲈鱼BHMT基因的cDNA克隆和组织表达
- BHMT(Betaine homocysteine methyltransferase)，即甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶，是一种Zn2+依赖的巯基甲基转移酶。本实验通过PCR和RACE技术克隆了鲈鱼(Lateolabrax...
- 宋娟娟
- 关键词：鲈鱼CDNA克隆
- 文献传递
