宁涛
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- NeuroDF1-斑马鱼胚胎体轴发育的一个新转录因子
- 一个受精卵如何发育成为一个生物个体，是发育生物学的中心问题;而脊椎动物形态发生的分子机理则是当前发育生物学最重要的问题之一，要全面，深入了解形态发生的分子机理，克隆新的发育基因并全面深入研究其作用规律和机理，以及相关的信...
- 宁涛
- 关键词：斑马鱼原位杂交胚胎发育神经胚转录因子发育生物学
- 文献传递
- 染色体外同源重组结合细胞质注射途径研制转基因小鼠
- 2004年
- 以绵羊 β 乳球蛋白基因 (β Lactoglobulin ,β LG)为转基因表达框架 ,将人G CSF(HumanGranulocyteColonyStimulatingFactor,hG CSF)基因与报告基因 增强型绿色荧光蛋白 (EnhancedGreenFluorescenctProtein ,EGFP)基因作为双表达单元拼接到 β LG基因的第一外显子处 ,并在G CSF基因两侧引入同源重组位点loxP、lox2 2 72 ,将打靶基因表达构件 β LG hG CSF IRES EGFP(总长 9 3kb)分为两段进行构建 ,片段Ⅰ (长 5 9kb)与片段Ⅱ (长 5 6kb)两段重叠部分为 2 2kb。向小鼠受精卵细胞质共注射构件片段Ⅰ、Ⅱ和NLS(核定位信号 ) 3个基因片段。对仔鼠进行整合与表达的检测。PCR Southern杂交检测结果表明 ,片段Ⅰ的整合率为 6 2 3% (86 /138) ,片段Ⅱ的整合率为 5 4 3% (75 /138) ,片段Ⅰ、Ⅱ共整合 (包括两片段分别整合和染色体外同源重组两种情况 )的小鼠为 6 2只 ,整合率为 4 4 9% (6 2 /138) ,其中在双阳性转基因小鼠中发生染色体外同源重组的几率为 80 6 % (5 0 /6 2 )。RT PCR Southern检测了 10只发生染色体外同源重组的转基因雌性小鼠 ,hG CSF基因的表达率为 90 % (9/10 ) ,EGFP基因的表达率为 10 0 % (10 /10 ) ,通过对其乳汁紫外吸收光谱的检测 ,EGFP基因的表达率为 5 0 % (5 /10 )。
- 耿艳艳端家忠李勇宁涛张靖溥
- 关键词：转基因小鼠Β-乳球蛋白基因EGFP
