李勇
- 作品数:3 被引量:0H指数:0
- 供职机构:中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 小鼠新母源基因Fbxw14的克隆与功能研究
- 胚胎早期发育的分子机理是发育生物学研究的核心问题。小鼠在哺乳动物发育生物学研究中具有其他实验哺乳动物无可比拟的优点:小鼠遗传和生理特点与其它哺乳动物相似,体积小,饲养管理方便、易于控制,生产繁殖快,抗感染力强,仔鼠大而世...
- 李勇
- 关键词:胚胎发育基因克隆卵母细胞发育生物学哺乳动物
- 文献传递
- 染色体外同源重组结合细胞质注射途径研制转基因小鼠
- 2004年
- 以绵羊 β 乳球蛋白基因 (β Lactoglobulin ,β LG)为转基因表达框架 ,将人G CSF(HumanGranulocyteColonyStimulatingFactor,hG CSF)基因与报告基因 增强型绿色荧光蛋白 (EnhancedGreenFluorescenctProtein ,EGFP)基因作为双表达单元拼接到 β LG基因的第一外显子处 ,并在G CSF基因两侧引入同源重组位点loxP、lox2 2 72 ,将打靶基因表达构件 β LG hG CSF IRES EGFP(总长 9 3kb)分为两段进行构建 ,片段Ⅰ (长 5 9kb)与片段Ⅱ (长 5 6kb)两段重叠部分为 2 2kb。向小鼠受精卵细胞质共注射构件片段Ⅰ、Ⅱ和NLS(核定位信号 ) 3个基因片段。对仔鼠进行整合与表达的检测。PCR Southern杂交检测结果表明 ,片段Ⅰ的整合率为 6 2 3% (86 /138) ,片段Ⅱ的整合率为 5 4 3% (75 /138) ,片段Ⅰ、Ⅱ共整合 (包括两片段分别整合和染色体外同源重组两种情况 )的小鼠为 6 2只 ,整合率为 4 4 9% (6 2 /138) ,其中在双阳性转基因小鼠中发生染色体外同源重组的几率为 80 6 % (5 0 /6 2 )。RT PCR Southern检测了 10只发生染色体外同源重组的转基因雌性小鼠 ,hG CSF基因的表达率为 90 % (9/10 ) ,EGFP基因的表达率为 10 0 % (10 /10 ) ,通过对其乳汁紫外吸收光谱的检测 ,EGFP基因的表达率为 5 0 % (5 /10 )。
- 耿艳艳端家忠李勇宁涛张靖溥
- 关键词:转基因小鼠Β-乳球蛋白基因EGFP
- Cwc15家族同源基因mED1在小鼠早期胚胎发育中的表达模式(英文)
- 2010年
- RNA选择性剪接机制涉及基因表达模式的多样性、胚胎发育的调控和疾病的发展与转归.Cwf15/Cwc15蛋白家族与RNA剪接体的功能相关,其基因序列在很多物种之间是十分保守的.然而,在哺乳类,Cwf15/Cwc15基因的表达模式和生物学功能研究至今未见实验性研究报道.本文首次报道了Cwc15家族同源基因mED1在小鼠早期胚胎发育过程中的表达规律.RT-PCR结果表明,mED1基因的转录水平从小鼠桑葚胚到器官形成期呈逐渐上升趋势;整体原位杂交结果显示mED1基因主要在小鼠6.5-dpc胚胎的ICM、8.5-dpc胚胎的神经褶衍生物和10.5-dpc的头部、鳃弓和体节中表达.说明mED1基因参与了小鼠胚胎的早期发育.此外,GFP-融合蛋白的亚细胞定位实验表明,mED1蛋白具有核定位的功能(剪接体蛋白的必要特性),验证了其核定位序列(NLS)的预测.本文是关于Cwc15家族基因的首次实验研究报道.
- 端家忠张靖溥朱少侠李勇
- 关键词:基因表达模式小鼠胚胎发育NLS