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鸡β-防御素-13成熟肽的原核表达与抑菌活性分析被引量：4: 2014年; 为表达鸡β-防御素-13(Gal-13)成熟肽并分析其抑菌活性,本研究采用RT-PCR技术从广西黄鸡肝脏中扩增Gal-13全长基因,亚克隆其成熟肽基因并构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果显示,Gal-13全长为312 bp,编码60个氨基酸,经Blast比对后显示其与广西黄鸡Gal-13序列同源性高达100%。SDS-PAGE和western blot分析表明重组蛋白在大肠杆菌中得到大量表达,其分子量约为31 ku。抑菌试验检测结果显示,纯化后的重组蛋白对大肠杆菌BL21(DE3)和金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用。; 许国洋包小玉范磊刘明刚张冬梅周尧熊涛潘康成; 关键词：原核表达抑菌试验

鸡β-防御素-13(Gal-13)成熟肽序列的克隆及表达: 2016年; 本研究旨在克隆鸡成熟肽c DNA序列并构建原核和真核表达载体,研究其在大肠杆菌和毕赤酵母中诱导后融合蛋白的表达情况。利用PCR技术从pDM19-T-Gal-13质粒中扩增得到成熟肽c DNA序列,将其亚克隆到p GEX-4T-1和p PICZαA质粒中,构建重组原核表达质粒pGEX-4T-1-Gal-13和真核表达载体pPICZαA-Gal-13,转化大肠杆菌BL21(DE3)和毕赤酵母X-33,挑取阳性转化子用进行鉴定和诱导表达,(Tricine)SDS-PAGE检测产物的表达情况,以及真核诱导表达上清液对鸡白痢沙门氏菌和金黄色葡萄球菌。结果显示,成功克隆得到的成熟肽序列长为128bp,包含ATG片段和酶切位点与保护碱共20bp,共编码36个氨基酸;构建获得重组原核表达质粒pGEX-4T-1-Gal-13和真核表达载体pPICZα-A-Gal-13,并将重组质粒转化到大肠杆菌BL21和酵母X-33,进行诱导表达产物经电泳分析后结果显示,Gal-13融合蛋白在大肠杆菌和酵母中得到大量表达,原核表达分子量是31ku并以包涵体的形式存在,真核表达的分子量5.9 ku并分泌到发酵液中;抑菌试验表明,发现真核表达的发酵无菌上清对鸡白痢沙门氏菌和金黄色葡萄球菌具有抑菌活性。; 周尧许国洋潘康成王承旭张钧利; 关键词：成熟肽克隆; 全文增补中

pEGF基因工程乳酸乳球菌的发酵优化及对小鼠和家兔部分微生态学效应研究: 本试验的主要内容包括了猪表皮生长因子(porcine epidermal growth factor，pEGF)基因工程乳酸菌发酵条件的优化、pEGF基因工程乳酸菌分泌pEGF最佳时间段的检测、pEGF基因工程乳酸菌对胚...; 周尧; 关键词：猪表皮生长因子乳酸乳球菌发酵优化微生态效应家兔

一种pEGF基因工程乳酸乳球菌的发酵优化培养基: 本发明对一种pEGF基因工程乳酸乳球菌基础发酵培养基进行优化，优化内容包括了培养基成分优化、发酵时间优化以及接种量优化。优化后的培养基成分为：每1L培养基含低蛋白乳清粉6.5g，葡萄糖5g，蛋白胨15g，牛肉膏1g，酵母...; 潘康成周尧贾贤奇; 文献传递

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周尧