周厚德
- 作品数：23 被引量：103H指数：6
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 纯化鼻咽组织全基因组表达谱在筛选鼻咽癌相关靶基因中的应用被引量：6
- 2005年
- 目的:通过全基因组寡核苷酸基因芯片构建鼻咽部纯化组织基因表达谱,筛选鼻咽癌相关靶基因。 方法:采用RNA保护技术保护组织标本,显微切割纯化分离鼻咽癌组织标本中的癌细胞、鼻咽部非癌组织标本中 的黏膜上皮细胞,提取每一例纯化组织标本RNA,线性扩增获得足量aRNA,标记探针后与HG U133.Plus2.0杂 交,构建每一例鼻咽部纯化组织标本基因表达谱,通过组间信息比对筛选鼻咽癌相关靶基因。结果:鼻咽癌组与非 鼻咽癌组基因表达谱比对,筛选出了与鼻咽癌发病相关的候选靶基因。通过鼻咽癌标本中颈部转移组和非颈部转 移组表达谱比对,找出了与鼻咽癌颈部淋巴结转移相关的候选靶基因。结论:利用全基因组基因芯片构建基因表 达谱,可准确、高效地筛选出鼻咽癌相关的候选靶基因。
- 刘仲奇田勇泉黄河周厚德张秋红周鸣彭聪李小玲李桂源
- 关键词：鼻咽癌显微切割基因芯片靶基因
- 晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病患者的骨组织形态学观察(两例报告)被引量：4
- 2006年
- 对晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病(SEDT-PA)患者行骨密度测量,股骨头行Goldner's Masson三色法染色,用显微CT行骨小梁三维重建、骨组织形态计量。结果SEDT-PA患者骨量、骨形成参数下降。
- 袁凌青蒋业斌罗湘杭周厚德谢辉彭依群魏启幼蒋谊伍贤平廖二元
- 关键词：骨形态计量学
- 抗坏血酸抑制核因子κB受体活化子配体诱导RAW264.7细胞的分化和功能被引量：5
- 2004年
- 目的研究抗坏血酸对核因子κB受体活化子配体(RANKL)诱导体外培养的破骨前体细胞RAW2647形成成熟多核破骨细胞的影响,探讨抗坏血酸在破骨前体细胞分化中的作用及机制。方法利用不同浓度的抗坏血酸与RANKL单独或共同处理RAW2647细胞,MTT法测定细胞增殖,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察TRAP阳性多核细胞,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)测定破骨细胞表型基因和功能基因的表达,Western印迹方法检测碳酐酶Ⅱ基因蛋白表达,破骨细胞的骨吸收功能用骨吸收陷窝面积计数法分析。结果抗坏血酸和RANKL都抑制RAW2647细胞的增殖(P<005),但它们之间无协同作用。抗坏血酸本身不能诱导RAW2647细胞形成破骨细胞,但可抑制RANKL诱导的TRAP阳性多核破骨细胞形成(P<005)。抗坏血酸下调RANKL诱导的碳酐酶Ⅱ和RANK基因mRNA表达及碳酐酶Ⅱ基因蛋白表达,抑制骨吸收功能(P<005)。结论抗坏血酸能直接抑制RANKL诱导的破骨细胞形成和功能。
- 肖新华周厚德袁凌青谢辉廖二元
- 关键词：RAW264.7RANKL核因子KB抗坏血酸受体活化功能基因
- 人乳转铁蛋白及其检测试剂盒在鼻咽癌诊断中的应用
- 本发明公开了人乳转铁蛋白LTF及其ELISA检测试剂盒在鼻咽癌诊断中的应用。本发明通过研究证实人乳转铁蛋白LTF基因在鼻咽癌组织中特异表达下调，从而提出乳转铁蛋白LTF用于鼻咽癌诊断、筛查和患病风险预测的用途。并制备出抗...
- 李桂源熊炜曾朝阳周艳宏张文玲李小玲周厚德范松青肖岚周鸣沈守荣
- 文献传递
- 低氧性肺动脉高压大鼠肺内肾上腺髓质素及受体表达研究被引量：29
- 2002年
- 目的 探讨肾上腺髓质素 (ADM)及其受体 (ADMR)基因表达变化在低氧性肺动脉高压(HPH)中的作用与意义。方法 雄性Wistar大鼠 30只 ,分为对照组和低氧 (3、7、1 4、2 1天 )组 ,每组 6只 ,低氧组复制HPH大鼠模型。测定各组平均肺动脉压 (mPAP)、右心室肥大指数 (RVHI)、肺小动脉病理及其形态计量学 ,组织原位杂交及逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)测定各基因在肺内的表达。结果 (1 )低氧 7天起大鼠mPAP、管壁厚度与血管外径比值及管壁面积与血管面积比值分别为 (2 2 7±2 8)mmHg,(46± 4) %和 (55± 6) % ,与对照组 [(1 6 4± 1 4)mmHg、(35± 3) %、(42± 5) % ]比较差异有显著性 (P <0 0 1 ) ,低氧 1 4天起稳定于高水平 ;低氧 1 4天RVHI为 (2 6 5± 2 9) % ,与对照组[(2 2 9± 2 2 ) % ]比较差异也有显著性 (P <0 0 1 ) ;(2 )原位杂交发现 ,低氧后ADM及ADMRmRNA在肺动脉壁呈动态表达变化 ;在内皮细胞、低氧 3天ADM与ADMRmRNA分别为 6 %与 8% ,与对照组(2 3 %、2 7% )比较差异有显著性 (P <0 0 1 ) ,低氧 7天时分别恢复至 33 %、52 % ,低氧 1 4天、2 1天为高水平表达 ;而在外膜细胞 ,低氧 7天ADM与ADMRmRNA表达分别为 42 %与 46 % ,与对照组 (1 9%、2 1 % )比较差异也有显著性 (P <0 0 1 ) 。
- 徐平戴爱国周厚德
- 关键词：低氧性肺动脉高压受体基因表达
- 肾上腺髓质素及受体在慢性阻塞性肺疾病患者中的表达与作用研究被引量：11
- 2003年
- 目的 探讨肾上腺髓质素 (ADM)及其受体 (ADMR)在慢性阻塞性肺疾病 (COPD)的表达水平 ,并研究其在COPD中可能的作用与机制。方法 本组研究调查了两批患者 ,第一批患者均为肺叶切除患者 ,共 16例 ,分为COPD组 (Ⅰ组 ) 9例和对照组 (Ⅱ组 ) 7例 ,对这两组患者用形态计量学方法检测了肺血管形态 ,用组织原位杂交测定ADM与ADMRmRNA的表达 ;第二批患者均为未做切除术的COPD患者 2 2例 ,根据平均肺动脉压 (mPAP)的不同分为COPD不伴肺动脉高压组 (A组 )10例和COPD伴肺动脉高压组 (B组 ) 12例 ,用右心漂浮导管法检测A、B两组血流动力学、放射免疫法测定肺动脉血ADM水平 ,同时检测动脉血气。结果 (1)肺叶切除的患者 :①Ⅰ组肺小动脉管壁厚度与血管外径比值及管壁面积与血管面积比值显著高于Ⅱ组 (P <0 0 1) ,②原位杂交发现Ⅰ、Ⅱ组肺小动脉壁ADMmRNA与ADMRmRNA表达比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;(2 )未作切除术的患者 :A、B两组COPD患者肺动脉血ADM水平比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;并与mPAP、肺血管阻力(PVR)呈正相关 (r分别 =- 0 4 1、0 5 2 ,P均 <0 0 5 ) ,与动脉血氧分压 (PaO2 )呈负相关 (r =0 4 1,P <0 0 5 )。结论 ADM可能作为局部自分泌 /旁分泌因子在COPD的发展与肺动脉高压形成中发挥?
- 徐平戴爱国周厚德沈宏伟刘丽华宋卫东
- 关键词：肾上腺髓质素肾上腺髓质素受体慢性阻塞性肺疾病血流动力学
- 牛磺酸通过ERK1／2信号途径促进成骨细胞分化
- 2008年
- 牛磺酸（taurine）增强成骨样MG63细胞碱性磷酸酶活性，促进骨钙素的分泌和矿化结节的形成。细胞信号转导研究发现牛磺酸诱导成骨细胞细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）磷酸化，ERK1／2抑制剂PD98059可阻断牛磺酸对成骨细胞的促分化作用。提示牛磺酸通过ERK1／2信号转导途径促进成骨样MG63细胞的分化。
- 卢瑛袁凌青谢辉罗湘杭伍贤平周厚德廖二元
- 关键词：牛磺酸骨钙素成骨细胞丝裂原活化蛋白激酶
- 复合杂合性CCN6基因突变致晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病的关节软骨病理和分子病因研究被引量：15
- 2004年
- 目的 观察晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病 (SEDT PA)患者的X线及磁共振成像特点、关节软骨病理特点 ,筛查CCN6基因突变位点 ,探讨SEDT PA的发病机制。方法 应用放射学、磁共振成像方法分析汉族家系中两例SEDT PA患者骨骼及软骨等结构特点 ;应用HE和甲苯胺蓝染色法对关节软骨进行组织病理学特点观察 ;用电子显微镜观察关节软骨组织和细胞的超微结构 ;设计引物对CCN6基因外显子进行扩增和测序分析 ;应用突变CCN6蛋白质三维结构预测等方法研究SEDT PA的发病机制。结果 病理检查发现汉族家系中一例SEDT PA关节软骨细胞增生活跃伴成熟障碍 ,而基质胶原纤维大小和密度明显下降。突变筛查提示两患者在CCN6基因 8号外显子存在两种突变类型 ,其中的替换突变 (10 0 0T→C ,Ser334Pro)来自父方 ;而缺失突变(84 0delT)来自母方 ,导致其编码的氨基酸序列移码突变 ,在下游 31个氨基酸残基后提前出现终止密码子 ,导致蛋白质被截短 4 3个氨基酸残基。蛋白质三维结构预测结果显示 84 0delT截短突变蛋白质与野生型蛋白质相比 ,从信号肽至第一个结构域 (IGFBP)起始的 2 4个氨基酸残基区域由一个单一环变成两个小的交叉环 ,而且伴C末端明显缩短 ,而Ser334Pro蛋白质仅有C末端的延伸方向与野生型蛋白质相反 ,其余?
- 彭依群廖二元顾慧敏魏启幼周厚德李剑谢辉翟木绪谭利华罗湘杭伍贤平胡平安倪江东苏欣蒋谊戴如春郭丽娟袁凌青王敏王平芳刘石平杨雅王成隋国良方团育
- 关键词：关节软骨晚发型分子病因脊柱骨骺发育不良杂合性
- WISP3突变型C20/A4软骨细胞Ⅱ型胶原的动力学及定位研究被引量：1
- 2010年
- 目的动态观察Wnt诱导分泌蛋白3(Wnt2 inducible secreted protein 3,WISP3)突变体软骨细胞C20/A4的Ⅱ型胶原合成和分泌特点,观察其在细胞内的超微定位和超微结构变化。方法用脉冲追踪法,在14C标记的脯氨酸干预WISP3突变体软骨细胞C20/A4后的不同时间点(30,60,120,180,240,300min)收集细胞上清和细胞内蛋白,用液体闪烁系统检测胶原含量,用ELISA检测Ⅱ型胶原的量。用透视电镜观察突变型细胞的超微结构变化,用胶体金免疫电镜观察Ⅱ型胶原在突变型细胞内的超微定位。结果 (1)SW1353细胞及C20/A4细胞株在14C标记的脯氨酸干预后180min,分泌到细胞培养上清的胶原及细胞内合成的胶原同时达到高峰;(2)与SW1353细胞及C20/A4细胞株比较,14C标记的脯氨酸干预后,WISP3突变型C20/A4细胞内的Ⅱ型胶原合成高峰提前到120min,而WISP3过表达的C20/A4细胞胶原合成没有明显峰值,胶原分泌高峰均提前到120min,胶原合成和分泌不同步。(3)透视电镜发现WISP3突变型C20/A4细胞有线粒体的肿胀、粗面内质网扩张,核膜皱缩。Ⅱ型胶原主要定位于内质网和细胞膜,排列稀疏,分布不均匀。结论 WISP3突变型C20/A4细胞的胶原合成高峰提前,胶原合成和分泌的规律和节律改变可能是SEDT-PA患者发病的机制之一。WISP3突变型C20/A4细胞超微结构的改变和Ⅱ型胶原的分布改变可能是SEDT-PA发病的病理基础。
- 杨雅王敏周厚德谢晖廖二元
- 关键词：软骨细胞
- 多基因遗传性肿瘤不同阶段转录组学调控规律及其分子机制被引量：7
- 2011年
- "多基因遗传性肿瘤不同阶段的转录组学调控规律及其分子机制研究"的国家重大研究计划项目研究团队以肿瘤基因组研究成果为基础,以肿瘤转录组学为主要研究方向,重点对鼻咽癌、乳腺癌、结直肠癌和脑胶质瘤4种多基因遗传性肿瘤的转录组信息及变化规律、抑瘤/易感基因的筛选鉴定、表观遗传学及miRNA调控的作用机制、转录调控相关的特定基因簇/蛋白质群的转录组和蛋白质组的比较和关联4个方面开展深入的研究。分别发现SPLUNC1,LTF,BRD7,NOR1,BRCA1/2,PALB2,AF1Q,SOX17,NGX6,SOX7和LRRC4等基因在肿瘤始动和侵袭阶段发挥的关键转录调控作用。相继阐明了以miR-141为中心的"SPLUNC1-miR-141-靶基因"的鼻咽癌基因信号调控网络;以人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)为靶点的"miR-193b-uPA"的乳腺癌基因交互调控通路;以LRRC4为节点的"miR-381-LRRC4-MEK/ERK/AKT"的胶质瘤基因调控通路以及受结肠癌转移相关基因NGX6调控的miRNA及其靶基因群网络。结果表明多基因遗传性肿瘤发生、发展过程中所涉及的关键信号转导通路中的关键分子的变化将导致信号转导通路和基因调控网络的严重障碍,说明多基因肿瘤在发病学上可能是一类"基因信号转导与基因调控网络障碍性疾病"。这些结果和理论为揭示多基因遗传性肿瘤不同阶段发病过程的转录组学规律及其分子机制提供了实验和理论依据。
- 李夏雨沈守荣武明花李小玲熊炜卢建红周鸣马健向娟娟曾朝阳向波周艳宏肖岚周厚德范松青李桂源
- 关键词：多基因转录组学表观遗传学MIRNA转录调控
