员新旭
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划“十五”国家科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 绵羊精原干细胞移植受体内源性生殖细胞的消除研究被引量：5
- 2009年
- 试验拟建立绵羊精原干细胞移植受体内源性生殖细胞的消除技术。将8只5月龄小尾寒羊公羊随机分为4组,各组第2次处理后3周,公羊睾丸活体采样,石蜡切片、HE染色验证处理效果。结果表明,白消安处理公羊可以完全消除内源性精原干细胞和其他生殖细胞。LHRH、LH疫苗处理的公羊,只能使部分精子发生丧失和生殖细胞消除。白消安是精原干细胞移植受体绵羊内源性生殖细胞最有效的消除技术。
- 窦红伟赵兴绪马月辉冯书堂员新旭曹文广
- 关键词：绵羊精原干细胞生殖细胞白消安
- 利用四倍体胚胎补偿法克隆ES猪技术被引量：1
- 2008年
- 员新旭刘岚冯书堂
- 关键词：四倍体克隆基因打靶器官移植
- 四倍体补偿法克隆EG小鼠技术及相关机制的研究
- 人类基因组工作框架图的完成,标志着人类迈进了功能基因组研究的新时代。基因敲除技术是揭示基因功能和建立动物模型的最有效的方法。传统基因敲除获得某一突变基因的纯合体动物首先要利用打靶胚胎干细胞（ES）获得嵌合体动物;随后用嵌...
- 员新旭
- 关键词：四倍体胚胎印迹基因原始生殖细胞
- 小鼠四倍体早期胚胎基因组甲基化模式被引量：1
- 2009年
- 利用小鼠抗5-甲基胞嘧啶(5MeC)单克隆抗体检测了体外培养小鼠四倍体早期胚胎的基因组甲基化模式。结果表明:利用电融合方法制备的小鼠四倍体胚胎在体外培养体系中经历细胞质融合、细胞核融合及细胞继续分裂发育直到囊胚期的过程,在细胞质融合的时候胚胎卵裂球同体内体外培养二倍体胚胎一样,呈现高度甲基化状态;在细胞核开始融合的时候,甲基化水平急速下降,在细胞核完全融合的时候甲基化水平达到最低点;随着胚胎继续分裂,胚胎甲基化水平逐渐增加,在桑葚胚期甲基化水平最高;但是囊胚期四倍体胚胎内细胞团同滋养层细胞甲基化荧光信号没有差别,这与体内体外培养二倍体囊胚内细胞团细胞甲基化荧光强度高于滋养层细胞甲基化荧光强度不同。因此,小鼠体外培养四倍体胚胎的甲基化模式是不正常的,这可能是四倍体小鼠难以发育到妊娠足月的原因之一。这是对小鼠四倍体早期胚胎基因组甲基化模式的首次报道。
- 员新旭冯书堂潘登科窦红伟牟玉莲李奎
- 关键词：小鼠四倍体胚胎甲基化
- 五指山猪3个近交家系内微卫星等位基因的遗传变化被引量：10
- 2009年
- 【目的】探索五指山猪近交3个不同家系F14-F18等位基因的遗传学规律,为大型动物近交系培育提供依据。【方法】利用14对微卫星DNA引物,以五指山小型猪(Wuzhishan Miniature pig,WZSP)F13-F18世代的3个近交家系为研究对象,通过估算基因杂合度(H)、多态信息含量(PIC)和等位基因数(N)等参数,检测近交3个家系微卫星等位基因的纯合度,以及随近交代数的推进每个星座上等位基因的变化规律。【结果】WZSP近交系Ⅰ系F14-F16的14个微卫星座平均每个位点等位基因数为2个、平均杂合度为0.40、多态信息含量为0.26;Ⅱ系F15-F18的平均等位基因数为1.92,平均杂合度分别为0.32,多态信息含量为0.25;Ⅲ系F14-F17的平均等位基因数为2.17,平均杂合度为0.44,平均多态信息含量为0.32。【结论】随近交代数的推进,每个星座上等位基因数越来越少,基因的纯合度越来越高,但WZSP近交系微卫星等位基因的纯合度有一定的限度,与近交鼠有所不同;在近交系3个家系各个世代中有少数几个基因座,如Sw874和Sw936等一直处于高度杂合状态,这可能与WZSP近交家系的种质特异性有关,推测与这些基因座处于同一连锁群的某些功能基因在维持极高近交水平下WZSP的基本生存能力中起着关键作用。3个近交群体间的分化系数在0.07以上,已各自成为独立家系;3个家系的近交程度不完全一致,基因的纯合度亦不同,Ⅱ系最高、14个微卫星座中7个纯合,其次为Ⅰ系和Ⅲ系。
- 李凯冯书堂牟玉莲杨述林韩建林刘岚员新旭郭勇
- 关键词：五指山小型猪微卫星杂合度
- 小鼠四倍体囊胚凋亡及凋亡基因的表达
- 2010年
- 为了更全面的对四倍体胚胎的发育能力进行评估,本研究利用原位末端标记(TUNEL)法检测了电融合生产的小鼠四倍体囊胚细胞凋亡情况,同时用实时定量PCR方法检测了促凋亡基因Bax和抑凋亡基因Bcl-2在四倍体囊胚中的表达。结果显示:四倍体与体外二倍体胚胎发育到囊胚的比率没有显著差别(P>0.05);四倍体囊胚无论是内细胞团细胞数、滋养层细胞数还是内细胞团/总细胞数比率都显著低于体内与体外二倍体囊胚(P<0.05);四倍体囊胚细胞凋亡指数显著高于体内与体外二倍体囊胚细胞凋亡指数(P<0.05);促凋亡基因Bax在四倍体囊胚中的表达显著高于体内与体外二倍体囊胚中的表达(P<0.05),而抑凋亡基因Bcl-2在四倍体囊胚中的表达同体内与体外二倍体囊胚中的表达没有显著差异(P>0.05)。因此,四倍体囊胚质量比体内与体外二倍体囊胚质量都差,这可能是四倍体胚胎不能发育到足月的原因之一。
- 员新旭冯书堂牟玉莲李奎
- 关键词：四倍体囊胚细胞凋亡
- 五指山小型猪近交系微卫星等位基因遗传规律的研究被引量：10
- 2009年
- 利用14对微卫星DNA引物,以五指山小型猪（Wuzhishan Miniature pig,WZSP）F13~F18世代的3个近交家系为研究对象,通过估算基因杂合度（H）、多态信息含量（PIC）和等位基因数（N）等参数,对其遗传变异规律进行探讨,寻找其遗传稳定性的理论依据。结果表明：在14个微卫星基因座上共检测到38个等位基因,总群体的平均H为0.42、平均PIC为0.37、平均N为2.71个;3个家系的平均H分别为0.41、0.45和0.42,平均N分别为2.36、2.29和2.50;F13~F18世代的平均H分别为0.31、0.42、0.36、0.41、0.37和0.20,平均N分别为2.21、2.57、2.43、2.57、2.36和1.64;Sw71、Sw510和Sw2409 3个基因座在WZSP 3个近交家系的13世代时已经完全纯合,而Sw205、Sw874和Sw936等基因座在这3个近交家系的6个世代中仍未能纯合。研究结论：初步揭示了WZSP近交家系中14个微卫星基因座上等位基因的变化规律;最重要的发现是有少数几个基因座,如Sw874和Sw936等一直处于出乎预料的高度杂合状态,这可能与WZSP近交家系的种质特异性有关,推测与这些基因座处于同一连锁群的某些功能基因在维持极高近交水平下WZSP的基本生存能力中起着关键作用。
- 李凯牟玉莲韩建林杨述林刘岚员新旭郭勇冯书堂
- 关键词：五指山小型猪微卫星杂合度生存力
