包海洋
- 作品数：11 被引量：27H指数：3
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响
- 研究结核分支杆菌Rv2031c 基因对小鼠巨噬细胞对RAW264.7 细胞凋亡的影响.根据GenBank数据库中结核分支杆菌Rv2031c 的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv 株灭活的菌液上清液为模版,扩...
- 史梦婷孟露萍包海洋付强史慧君张辉任艳乔军陈创夫
- 结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响被引量：4
- 2015年
- 研究结核分支杆菌Rv2031c基因对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡的影响。根据GenBank数据库中结核分支杆菌Rv2031c的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv株灭活的菌液上清液为模版,扩增Rv2031c基因;克隆至慢病毒表达载体plex-EGFP中,经酶切和测序鉴定后,获得plex-Rv2031c-EGFP重组慢病毒载体;将重组慢病毒质粒分别与辅助质粒共转染至293T细胞中,转染48h后收集慢病毒,并侵染RAW264.7细胞;侵染48h时收集细胞,用流式细胞术检测各试验组巨噬细胞的凋亡率;提取细胞总RNA并反转录成cDNA,PCR检测Rv2031c基因在细胞中的表达情况;同时,使用细胞裂解液提取细胞总蛋白,Western blot检测Rv2031c蛋白表达水平。结果表明,成功构建了Rv2031c的慢病毒表达载体plex-Rv2031c-EGFP;构建了过表达Rv2031c的慢病毒Rv2031c-lv;感染Rv2031c-lv的RAW264.7细胞的凋亡率为41.8%,而对照组EGFP-lv感染的RAW264.7细胞其凋亡率为30.0%;PCR结果表明Rv2031c在Rv2031c-lv侵染的RAW264.7细胞中高表达;Western blot结果显示Rv2031c蛋白在Rv2031c-lv侵染的RAW264.7细胞中高表达。该研究成功构建了结核分支杆菌Rv2031c的慢病毒表达载体并验证了其对RAW264.7细胞凋亡的影响,为结核分支杆菌在机体内潜伏期感染的药物研究奠定了基础。
- 史梦婷孟露萍包海洋付强史慧君王慧勤张辉任艳乔军陈创夫
- 关键词：慢病毒RAW264.7细胞细胞凋亡
- 新疆北疆地区结核分枝杆菌基因分型及耐药性分析
- 目的 对新疆北疆地区结核分枝杆菌临床株进行基因分型和耐药性检测,研究不同基因型在该地区的流行及耐药性. 方法 收集北疆地区114株结核分枝杆菌临床株,采用间隔区寡核苷酸(Spoligotyping)和多位点可变串联重复序...
- 刘忠华包海洋陈创夫
- 关键词：基因型
- miR-193a在MDBK细胞中诱导细胞凋亡的研究
- 研究目的:本试验旨在研究mi R-193a在致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(cp BVDV)感染MDBK细胞过程中诱导细胞凋亡的分子机制。材料方法:试验利用TargetS can和Microcosm Targets等生物信...
- 史梦婷付强孟露萍史慧君包海洋张辉任艳陈创夫
- 文献传递
- miR-193a在MDBK细胞中诱导细胞凋亡的研究
- 研究目的：本试验旨在研究miR-193a 在致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(cp BVDV)感染MDBK细胞过程中诱导细胞凋亡的分子机制.材料方法：试验利用TargetScan 和Microcosm Targets 等生物...
- 史梦婷付强孟露萍史慧君包海洋张辉任艳陈创夫
- miR-193a在MDBK细胞中诱导细胞凋亡的研究被引量：1
- 2014年
- 本试验旨在研究miR-193a在致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(cp BVDV)感染MDBK细胞过程中诱导细胞凋亡的分子机制。试验利用TargetScan和Microcosm Targets等生物信息学在线软件预测凋亡相关的miR-193a靶基因Bax,并利用双荧光素酶报告基因系统验证miR-193a的靶基因;用过表达miR-193a的慢病毒pre-miR-193a-lv和抑制miR-193a表达的慢病毒pre-miR-193a-inhibitor-lv分别侵染MDBK细胞,48h后收集细胞,然后用实时荧光定量PCR、Western blotting和流式细胞仪检测凋亡通路中Bax的表达水平及MDBK细胞凋亡率。结果预测并验证了miR-193a的靶基因为Bax;双荧光素酶报告基因分析结果显示miR-193a能直接结合到Bax 3′UTR区域中的miRNA反应位点,并极显著下调Bax的表达水平(P<0.01);流式细胞仪检测凋亡率结果显示,感染pre-miR-193a-lv慢病毒的MDBK细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。结果表明miR-193a能直接靶向凋亡通路中Bax基因,从而促进凋亡的发生。
- 史梦婷付强孟露萍史慧君包海洋张辉任艳陈创夫
- 关键词：BAX凋亡
- 一种用于结核杆菌利福平耐药快速检测的引物及其试剂盒
- 本发明公开了一种用于结核杆菌利福平耐药快速检测引物及其试剂盒，所述引物包括如下引物的至少一组：第一组：rpoBForwarD：CGCCGCGATCAAGGAGTTC？rpoBReverse：GCCCGGCACGCTCAT...
- 陈创夫曹旭东杨敏袁俐于潞杨彩虹张辉包海洋吴长新
- 文献传递
- 北疆地区结核分枝杆菌基因分型及耐药性分析被引量：6
- 2016年
- 目的对北疆地区结核分枝杆菌临床分离株进行基因分型和耐药性检测，研究不同基因型在该地区的流行及耐药性。方法收集北疆地区114株结核分枝杆菌临床分离株，采用间隔区寡核苷酸和多位点可变串联重复序列（VNTR）技术进行基因分型，应用NTsys2．10e软件对结果进行聚类分析，比例法检测临床分离株的耐药性。结果114株临床分离株，间隔区寡核苷酸分型结果和RD105缺失检测法结果共同显示北京基因型占62．28％（71／114）、非北京基因型占37．72％（43／114）。分2大簇（A和B）：A簇有34株，北京基因型占11．77％（4／34），非北京基因型占88．23％（30／34）；B簇有80株，北京基因型占83．75％（67／80），非北京基因型占16．25％（13／80）。耐药显示：总耐药率为40．35％（46／114），耐多药（MDR）率为19．30％（22／114）；北京基因型耐药率为42．25％（30／71），非北京基因型的耐药率为37．21％（16／43），差异无统计学意义（χ^2=0．28，P=0．60）。其中，北京基因型MDR耐药菌株占22．54％（16／71）结论北疆地区北京基因型和非北京基因型的耐药率没有差异，但MDR菌株流行主要是由北京基因型引起的。
- 包海洋曹旭东秦莲花杨华吴长新刘忠华陈创夫
- 关键词：基因型
- 结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响
- 研究结核分支杆菌Rv2031c基因对小鼠巨噬细胞对RAW264.7细胞凋亡的影响。根据Gen Bank数据库中结核分支杆菌Rv2031c的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv株灭活的菌液上清液为模版,扩增Rv...
- 史梦婷孟露萍包海洋付强史慧君张辉任艳乔军陈创夫
- 文献传递
- 结核分枝杆菌Rv2626c蛋白对RAW264.7细胞凋亡的影响被引量：3
- 2016年
- 试验旨在研究结核分枝杆菌Rv2626c蛋白对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡的影响。根据GenBank数据库中结核分枝杆菌Rv2626c基因序列设计引物,并以结核分枝杆菌国际标准株H37Rv cDNA为模板,PCR扩增Rv2626c基因并克隆至慢病毒表达载体pLEX-EGFP中,包装慢病毒并感染RAW264.7细胞,使用Western blotting和流式细胞仪技术检测Rv2626c蛋白表达水平和RAW264.7细胞凋亡率变化。结果显示,成功构建慢病毒表达载体pLEX-EGFP-Rv2626c;成功包装慢病毒并感染RAW264.7细胞;Rv2626c蛋白在RAW264.7细胞中高水平表达显著促进了细胞凋亡。本试验结果表明,在RAW264.7细胞中过表达结核分枝杆菌Rv2626c蛋白能显著性增加其凋亡水平。
- 孟露萍史梦婷包海洋付强史慧君王慧勤乔军张辉陈创夫
- 关键词：结核分枝杆菌RAW264.7细胞凋亡
