刘建利
- 作品数：71 被引量：190H指数：8
- 供职机构：深圳出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生理学轻工技术与工程更多>>
- 一对鹅源性成分PCR检测用引物
- 本发明涉及动物物种和动物源性成分鉴定技术领域，具体涉及一种用于检测鹅源性成分的检测方法，尤其涉及一对用于检测鹅细胞线粒体核苷酸序列的引物。本发明旨在鉴定饲料、食品等产品中是否含有鹅源性成分。通过设计特异性扩增引物，利用P...
- 宗卉汪燕玲曹琛福陶虹刘建利吕建强花群义卢体康秦智锋
- 文献传递
- 驴或驴源性成分实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针
- 驴或驴源性成分实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针。技术领域：本发明涉及动物物种和动物源性成分鉴定技术领域，具体涉及一种驴或驴源性成分的检测方法；尤其涉及一种驴或驴源性成分的实时荧光PCR检测方法。本发明旨在鉴别如阿...
- 曹琛福宗卉张彩虹陶虹花群义秦智锋吕建强杨俊兴阮周曦刘建利
- 实时荧光定量PCR检测畜禽肉制品中鸭源性成分被引量：13
- 2016年
- 根据鸭mtDNA COX基因上的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR用于检测畜禽肉制品中的鸭源性成分。结果表明,建立的方法特异性强,与鹅、鸡、羊、牛等15种动物DNA无非特异性扩增;灵敏度高,可检测1.0pg/μL鸭源DNA的存在;重复性好,同DNA浓度所测得Ct值的变异系数均小于3%;应用该法对模拟混合样品进行检测,结果与预期相符,且常见肉类DNA的存在并不影响该法对鸭源性成分检测的灵敏度。说明本试验建立的鸭源性成分实时荧光定量PCR法特异、敏感、稳定,可快速准确检测畜禽肉制品中含有的鸭源性成分。
- 林彦星张彩虹阮周曦刘建利宗卉廖立珊孙洁杨俊兴吕建强花群义曹琛福
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 非洲猪瘟病毒p72蛋白的真核表达及反应原性鉴定被引量：2
- 2015年
- 将p72基因克隆到载体pFast Bac/NT-TOPO上,转化大肠埃希菌DH5α。将获得的重组载体pFastBac/NT-TOPO-p72,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒质粒bacmid-p72。通过脂质体介导,将bacmid-p72转染sf9细胞,获得重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染正常生长的sf9细胞,72h后收集细胞,超声破碎后取上清进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,重组蛋白大小约78ku,且重组蛋白可以与非洲猪瘟标准阳性血清反应。说明表达的重组蛋白为可溶性的,并具有良好的反应原性。
- 梁云浩曹琛福叶奕优花群义张彩虹曾少灵陶虹廖立珊刘建利唐勇吕建强
- 关键词：非洲猪瘟病毒脂质体介导重组杆状病毒
- 水泡性口炎病毒N蛋白的原核表达和鉴定被引量：1
- 2016年
- 根据GenBank已公布的水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)N基因序列,设计上、下游引物,以VSV-NJ核酸为模板进行RT-PCR扩增,扩增产物克隆至pET52 3C/LIC载体中,成功构建了pET52-VSV N表达载体。将pET52-VSV N重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达,经SDS-PAGE电泳分析,可见VSV N蛋白成功得到了表达,融合蛋白的分子量约为50KD,Western blot分析表明所表达的重组蛋白可与VSV阳性羊血清发生特异性反应,表达的VSV N蛋白可以作为建立VSV抗体检测方法的抗原。
- 刘建利孙洁陈兵张彩虹吕建强花群义杨俊兴
- 关键词：水泡性口炎病毒N蛋白原核表达
- 非洲猪瘟病毒p30蛋白真核表达载体的构建及表达被引量：2
- 2016年
- 本文设计特异性引物扩增全长p30基因,得到585bp的目的片段,克隆至杆状病毒Bac-To-Bac表达载体pFastBac/NT-TOPO中,转化大肠杆菌DH10Bac进行同源重组,成功构建了含有p30基因的真核表达载体。转染Sf9细胞,回收得到重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,表达产物20kDa,与预期大小一致,能与AFSV阳性血清产生特异性反应。
- 廖立珊孙洁刘建利花群义唐金明林彦星阮周曦张彩虹陶虹吕建强杨俊兴秦智锋林庆燕曾少灵
- 关键词：ASFV杆状病毒表达
- 鹿流行性出血病病毒抗体快速检测试纸条及其制备方法
- 本发明公开了一种鹿流行性出血病病毒(EHDV)抗体快速检测试纸条及其制备方法。其主要应用截短的EHDV VP7表达抗原作为检测线试剂。利用抗原表位分析软件对EHDV VP7进行分析，选取含有主要抗原表位的片段，对其对应的...
- 杨俊兴孙洁连慧香陈兵花群义吕建强曹琛福张彩虹卢体康胡运发秦智锋刘建利
- 文献传递
- 基于VP73表达抗原和单抗的非洲猪瘟c-ELISA试剂盒研制
- 曾少灵卢体康花群义杨俊兴吕建强秦智锋廖立珊阮周曦张彩虹曹琛福唐金明孙洁林庆燕刘建利陶虹陈泽华陈书琨宗卉
- VP73蛋白是非洲猪瘟病毒的主要抗原性结构蛋白,基因结构稳定保守,即使是不同毒株其DNA序列或氨基酸序列的相似性都很高,可超过96%以上.VP73蛋白在自然感染中可诱导产生抗体,也是最早产生的抗体种类之一,且抗原性稳定,...
- 关键词：
- 关键词：猪瘟病毒免疫学检测试剂盒
- 基于单克隆抗体的牛病毒性腹泻病毒抗原检测ELISA方法的建立
- 杨俊兴花群义曹琛福陶虹曾少灵卢体康唐金明张彩虹吕建强阮周曦孙洁刘建利陈兵叶奕优秦智锋胡运发李健波艾军祝贺
- 用单克隆抗体(2A6和5C9等比混合)作为第一抗体包被ELISA板,利用HRP标记的单克隆抗体(2F4)作为第二抗体,建立了BVDV双抗体夹心ELISA方法.首先,选用BVDV特异性单克隆抗体作为第一抗体,大大提高了EL...
- 关键词：
- 关键词：病毒性腹泻病毒抗原检测方法流行病学调查
- 马或马源性成分实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针
- 马或马源性成分实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针。技术领域：本发明涉及动物物种和动物源性成分鉴定技术领域，具体涉及一种马或马源性成分的检测方法；尤其涉及一种马或马源性成分的实时荧光PCR检测方法。本发明旨在鉴别饲料...
- 曹琛福宗卉刘建利张彩虹花群义陶虹秦智锋吕建强杨俊兴曾少灵阮周曦
