刘峰涛
- 作品数：30 被引量：33H指数：4
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- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 环介导等温扩增法快速检测手足口病病原体被引量：5
- 2014年
- 目的:建立逆转录(RT)-环介导等温扩增方法(LAMP),以快速检测手足口病最重要的两种病原体:肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)。方法:收集手足口病患儿咽拭子标本93份,针对EV71和CA16病毒的VP1基因特异性序列8个区域各设计6条LAMP引物,分别于63℃(EV71)、65℃(CA16A)扩增1 h,日光下观察结果,与实时荧光定量PCR比较检测特异性和敏感性。结果:EV71、CA16的LAMP最低检测限均为500拷贝/管,与对照病毒无交叉反应。93份标本中,RT-PCR方法检测显示EV71阳性44例,CA16阳性36例;RT-LAMP方法检测显示EV71阳性46例,CA16阳性36例,两种方法间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:应用RT-LAMP检测手足口病病原体EV71、CA16快速、灵敏、经济、特异性高,适合在基层医疗机构推广应用。
- 戴颖刘峰涛何书汪奇伟
- 关键词：肠道病毒71型柯萨奇病毒A组16型手足口病
- 死亡受体5激动性多价抗体及其在制备抗肿瘤药物中的应用
- 本发明提供了一种抗人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的受体DR5（deathreceptor5）胞外区的抗体。死亡受体5激动性多价抗体，针对死亡受体5的单链抗体通过寡聚化的结构域，形成多价抗体，其氨基酸序列如SEQIDNO....
- 马远方刘峰涛张军季泽俊刘广超李淑莲
- 利用噬菌体表面展示技术克隆抗人DR5抗体可变区基因
- 2011年
- 目的:利用噬菌体表面展示技术制备抗人DR5单链抗体。方法:从抗DR5杂交瘤细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增VH和VL基因,并利用重叠扩增PCR将VH和VL拼接为scFv基因。将scFv与PAK100载体通过相同的酶切位点连接后,转化大肠杆菌XL1-Blue,经VSCM13辅助噬菌体拯救,构建成鼠抗人DR5单链抗体库。以DR5作为固相筛选分子,对噬菌体展示肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"生物筛选,从第3轮洗脱物中随机挑选10个单克隆噬菌体扩增后进行ELISA鉴定,对所筛选克隆进行DNA序列测定和通过phage-ELISA验证噬菌体单链抗体的结合特异性。结果:经过3轮筛选后,对随机选取的10个噬菌体克隆进行鉴定,其中4个具有和DR5结合的特异性。结论:利用噬菌体表面展示技术筛选单链抗体,结果更加可信。
- 刘瑞敏王明丽季泽俊刘峰涛白慧玲马远方
- 关键词：噬菌体展示技术单链抗体死亡受体5
- 自体表皮移植联合光疗治疗白癜风临床观察被引量：6
- 2016年
- 目的观察自体表皮移植术(AET)联合308nm准分子光(MEL)或311nm窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗局限性稳定期白癜风的临床疗效和安全性。方法将入选的150例白癜风患者随机分为3组,每组50例。全部患者行AET治疗,治疗1组术后2周时联合308nm MEL照射治疗,治疗2组术后2周时联合311nm NB-UVB照射治疗,均2次/周,均治疗30次。对照组术后未进行光疗。结果治疗1组和治疗2组患者有效率(95.08%和88.10%)均优于对照组患者的有效率(78.36%),差异有统计学意义(P<0.05);治疗1组和治疗2组患者有效率差异亦有统计学意义(P<0.05),且其对于躯干和四肢部皮损的疗效优于对照组(P<0.05)。两个治疗组不良反应发生率显著高于对照组的不良反应发生率,但是两个治疗组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AET联合308nm MEL或311nm NB-UVB治疗局限性稳定期白癜风的疗效优于单纯AET,且联合308nm MEL的疗效与311nm NB-UVB相当,但该两种联合治疗方法的不良反应高于对照组。
- 赵军磊刘峰涛付旭晖轩俊丽王哲新
- 关键词：自体表皮移植白癜风
- 研究生免疫学课程教学的体会与思考被引量：1
- 2011年
- 课程教学阶段是整个研究生培养过程中的基础性环节,是培养研究生掌握坚实的基础理论和系统的专业技术知识的主要手段,它直接影响着研究生的研究能力及创造能力的培养和提高。笔者在研究生的免疫学课程教学过程中,强化研讨式教学、双语教学等方法,对研究生的创新能力的培养,研究生质量的提高起到促进作用。
- 刘峰涛都景芳
- 关键词：免疫学研讨式教学双语教学
- TRAIL-R2的表达与肿瘤诊断、治疗及预后相关性研究
- 马远方白慧玲张军李淑莲刘广超杜耀武都景芳刘英杰刘峰涛陈居杲
- 一、所属领域：医药高新技术。二、主要内容： 1.通过基因工程技术制备TRAIL-R2(又称死亡受体5，简称DR5)的胞外段蛋白，即可溶性DR5；2.通过单克隆抗体技术制备了抗TRAIL-R2的单抗：两种特异识别TRAIL...
- 关键词：
- 关键词：免疫细胞化学方法试剂盒肿瘤诊断
- 人TRAIL胞外区原核可溶性表达及活性鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的获得具有生物活性的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)胞外段蛋白。方法根据大肠杆菌密码子偏爱性要求,设计合成编码TRAIL胞外段的DNA序列,构建成pET30a-TRAIL胞内融合表达质粒,重组质粒转化表达宿主E.coli BL21。在不同温度、不同浓度的IPTG条件下诱导表达TRAIL,SDS-PAGE分析表达产物,MTT法检测产物活性。结果构建的工程菌株表达29KD的可溶性TRAIL融合蛋白,能诱导Jurkat细胞凋亡。结论成功表达了人TRAIL胞外段蛋白,为进一步研究提供基础。
- 鲍应环程相树刘峰涛
- 关键词：原核表达JURKAT细胞
- 医学免疫学教学中引入PBL教学法的探讨被引量：11
- 2010年
- 根据医学免疫学的教学现状,将PBL教学法引入免疫学教学实践,探讨PBL教学法在免疫学教学中的应用效果,并由此提出PBL教学法在医学教育中应用的问题及对策。
- 柴立辉刘瑞敏刘峰涛白慧玲马远方
- 关键词：医学免疫学教学方法PBL教学
- 改进教学模式 培养创新人才
- 2009年
- 改进教学模式,对于创新人才的培养具有重要意义。笔者通过对现有教学模式的分析,提出几点改进建议,包括充分理解和认识创新教育的本质,多采用课堂讨论为主的教学方式,在专业课中融入科技史教育等。
- 刘峰涛耿旭
- 关键词：教学模式课堂讨论科技史
- mDRA-6诱导Jurkat细胞凋亡的外源性机制
- 2009年
- 目的:探讨抗人死亡受体5(DR5)单克隆功能抗体(mDRA-6)对人白血病Jurkat细胞诱导凋亡的外源性机制。方法:用显微镜观察mDRA-6作用后的Jurkat细胞形态学变化,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量分析技术对Jurkat细胞的凋亡进行定量分析;利用免疫印迹技术检测凋亡细胞的Caspase 10、Caspase 9、Caspase8、Caspase 7、Caspase 3等凋亡相关蛋白的表达及活化情况。结果:mDRA-6在5 mg/L浓度作用Jurkat细胞30min时就出现典型的细胞凋亡形态改变,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测显示,Jurkat细胞在30 min、60min1、20 min的凋亡率分别为30.20%、69.03%、79.55%。免疫印迹技术检测显示Caspase 9、Caspase 8、Caspase7、Caspase 3均呈现活化片断的表达,而Caspase 10无变化。结论:mDRA-6可通过细胞膜表面死亡受体信号传导途径诱导Jurkat细胞的凋亡,本研究为mDRA-6的人源化改造及后续的实验研究打下了基础。
- 杜耀武刘峰涛陈居杲赵昆朋马远方
- 关键词：死亡受体5单克隆抗体JURKAT细胞细胞凋亡
