冯娜
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会基础研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 青葙SRAP体系的建立和优化被引量：7
- 2008年
- 目的探讨影响青葙SRAP(sequence-related amplified polymorphism)扩增的各种因素,建立并优化青葙SRAP反应体系,为分子水平鉴定青葙子及其伪品,探讨青葙不同种质间的亲缘关系奠定基础。方法用CTAB法提取青葙DAN,设计Taq酶浓度(0.02、0.04、0.06U/μL)、dNTP浓度(0.10、0.20、0.30mmol/L)、Primer浓度(0.15、0.30、0.45μmol/L)3水平3因素试验和Mg2+浓度(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0mmol/L)8水平单因素试验。在25μL体系中加入模板DNA20ng,对体系进行优化,用琼脂糖进行检测。结果建立了适合青葙的SRAP体系,在25μL体系中,DNA为20ng,Taq酶浓度为0.04U/μL,dNTP浓度为0.30mmol/L,Primer浓度为0.30μmol/L,Mg2+浓度为2.5mmol/L,优化后的体系目标条带增多,且比较稳定,重现性好,得到了较好的扩增效果。结论本研究建立的反应体系适合青葙SRAP的研究。为从分子水平鉴定青葙子正品与伪品以及鉴定青葙不同种质资源奠定了基础。
- 郭庆华郭美丽薛芊冯娜张汉明
- 关键词：青葙SRAP
- 红花cDNA-AFLP反应体系的优化研究被引量：6
- 2008年
- 目的为构建红花的遗传连锁图谱和功能基因的研究,探讨影响红花cDNA扩增片段长度多态性(cDNA amplified fragment length polymorphism,cDNA-AFLP)的各种因素,建立并优化红花cDNA-AFLP反应体系。方法以红花新鲜花瓣为材料,针对其内含物特殊性对Trizol法加以改进提取RNA,采用无RNase H活性的鼠源反转录酶(M-MLV RTase)结合置换合成法反转录双链cDNA;两步法酶切与连接,优化酶切时间;连接产物和预扩产物分别设置不同稀释倍数扩增并对选扩反应体系略微调整后,用6%的聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳分离,银染检测。结果改进Trizol法得到的红花总RNA样品较为完整,纯度较高,可直接用于双链的合成;经无RNase H活性反转录酶结合置换合成法得到高质量的cDNA模板。建立优化后的红花cDNA-AFLP体系为:250ng cDNA 37℃6 h经限制性内切酶MseI和EcoRI完全酶切,16℃连接12 h;连接产物最佳稀释倍数为10倍;预扩产物稀释为150倍;PAGE电泳得到清晰、稳定、分辨率较高的多态性条带。结论本研究建立的反应体系适用于红花功能基因的cDNA-AFLP研究。
- 冯娜郭美丽张汉明
- 关键词：红花CDNA-AFLP
- 一种含羟基红花黄色素A的红花的筛选方法
- 本发明涉及生物科学技术领域，红花的主要活性成分羟基红花黄色素A含量的高低，直接影响红花品质。本发明以含羟基红花黄色素A和不含羟基红花黄色素A的红花纯系亲本及其杂交产生的F<Sub>1</Sub>代，F<Sub>2</Su...
- 郭美丽冯娜唐洁
- 文献传递
- 一种含羟基红花黄色素A的红花的筛选方法
- 本发明涉及生物科学技术领域，红花的主要活性成分羟基红花黄色素A含量的高低，直接影响红花品质。本发明以含羟基红花黄色素A和不含羟基红花黄色素A的红花纯系亲本及其杂交产生的F<Sub>1</Sub>代，F<Sub>2</Su...
- 郭美丽冯娜唐洁
- 文献传递
- 基于cDNA-AFLP技术的与红花品质相关基因的筛选及克隆
- 红花(Carthmus tinctorius L.)为菊科植物红花的干燥管状花,具有扩张冠状动脉、抗凝、降血压、抗炎镇痛等多种药理作用,临床应用广泛。其中黄酮类查尔酮成分-羟基红花黄色素A(HSYA)是红花的主要活性成分...
- 冯娜
- 关键词：红花药理作用CDNA-AFLP技术基因筛选
- 文献传递
