何晓梅
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：安徽农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：安徽省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 对生玉米幼叶尿卟啉原脱羧酶的纯化及部分性质研究被引量：2
- 2006年
- 尿卟啉原Ⅲ脱羧酶是植物血红素和叶绿素合成的一个关键调控酶。对生玉米叶片中叶绿素含量较比互生玉米高。对生玉米幼苗经硫酸铵分级沉淀,DEAE Sepharose CL-6B、Sephacryl S-200、羟基磷灰石和B lueSepharose CL-6B层析,纯化了尿卟啉原脱羧酶。纯化倍数为1 060倍,得率约8%,比活约880 U/mg蛋白。纯化的UROD在SDS/PAGE显示一条带,亚基分子量约为40 kD,Sephacryl S-300测得全酶分子量约为55 kD。IEF-PAGE显示UROD为一条带,等电点约为6.0,酶的最适pH值约7.0,在55℃下保温12 m in,酶活力丧失90%,在100 mm ol/L的巯基乙醇下,UROD的酶活力提高7倍。体外5 mm ol/L的磷酸吡哆醛修饰显示UROD活力下降约30%。
- 范军何晓梅朱娟朱苏文程备久
- 关键词：对生玉米纯化酶性质
- 表达酿酒酵母ALAS的重组大肠杆菌胞外5-氨基乙酰丙酸的产量和纯化被引量：5
- 2007年
- 5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinate,ALA)由5-氨基乙酰丙酸合酶(5-aminolevulinate synthase,ALAS)催化产生。利用重组细菌在大肠杆菌合成ALA已有不少研究。重组真核生物ALAS在大肠杆菌合成ALA的研究没有报道。酿酒酵母ALAS在大肠杆菌重组表达,在摇瓶培养条件下,分析了胞外ALA的产量,重组菌的生长状况和细胞中ALAS的活性,利用两种国产树脂纯化ALA,毛细管电泳分析确定ALA纯度在LB培养基中,初始pH6.5,含有20mmol/L的酮戊酸、20mmol/L琥珀酸和20mmol/L的甘氨酸,37℃下诱导培养12h,胞外ALA的产量为162mg/L培养基。纯化的ALA纯度达到90%。
- 何晓梅周静程郢范军
- 关键词：酿酒酵母
- 重组工程菌合成5-氨基酮戊酸的限制因子的初步研究
- 5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid, ALA)在农业生产中具有广泛的应用,不仅可作为除草剂、杀虫剂,还可提高植物的抗盐、抗冷冻能力,这对于缓解生态环境恶化,提高农业生产水平具有重要的现实意义。此外...
- 何晓梅
- 关键词：5-氨基酮戊酸生物合成
- 文献传递
- 重组酿酒酵母5-氨基酮戊酸合酶在大肠杆菌的表达被引量：1
- 2006年
- 以酿酒酵母基因组为模板,采用PCR扩增出编码成熟5-氨基酮戊酸合酶(第一个氨基酸残基为Asn63)的基因hem1,将其克隆到pMAL-2x中构建重组表达载体,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),在0.5 mmol.L-1的IPTG诱导下,SDS-PAGE显示分子量约为49 kD的特异条带。重组菌在紫外灯下显示红色荧光,表明酶在大肠杆菌体内活性表达。体外反应表明,在浓度超过0.1 mmol.L-1的IPTG诱导下,酶活力下降,培养基的初始pH值约为6.5,5-氨基酮戊酸产量达最大,且主要分泌到胞外。
- 何晓梅周静范军朱苏文程备久
- 关键词：酿酒酵母
