丁静
- 作品数：10 被引量：46H指数：5
- 供职机构：广州医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 微信平台在医学检验专业教学中的应用探讨被引量：20
- 2016年
- 本文结合微信应用医学检验专业的教学实践,从理论教学、实验教学、PBL教学、课后辅导几个方面分析了微信移动教学的可行性、优越性及目前教学实践中存在的问题,并提出了相应的解决方案,旨在利用微信平台为信息化教学开辟新的途径,并为医学院校教学改革提供实践参考。
- 丁静邓聪邓小燕吴晓蔓
- 关键词：信息化
- 人抗菌肽LL-37对小鼠皮肤烫伤MRSA感染活性作用研究被引量：2
- 2019年
- 目的评价人抗菌肽LL-37对小鼠皮肤烫伤耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染模型的治疗作用。方法建立小鼠皮肤烫伤MRSA感染模型。随机分为三组:LL-37组、生理盐水组、庆大霉素组,观察不同组小鼠的大体状况;选取3、5、9、14 d测定小鼠烫伤感染处的皮肤菌负荷,观察创面愈合情况以及组织学变化,评价人抗菌肽LL-37的抗菌活性作用。结果给予LL-37治疗后,LL-37组第3天和第5天创面皮肤菌负荷数[(6.89±0.17)和(5.57±0.32)Lg(CFU/g tissue)]均明显低于生理盐水组[(8.27±0.31)和(7.86±0.39)Lg(CFU/g tissue)],差异有统计学意义(P<0.05)。第9天,LL-37组菌负荷大幅度降低[(3.66±0.14)Lg(CFU/g tissue)],比生理盐水组[(6.91±0.26)Lg(CFU/g tissue)]低3.3 Lg(CFU/g tissue),差异有统计学意义(P<0.05)。相比生理盐水组,LL-37组创面面积缩小显著,愈合率统计结果与庆大霉素组差异无统计学意义(P>0.05)。组织病理学结果显示LL-37组创面愈合良好。结论抗菌肽LL-37能够抑制烫伤创面MRSA的定植与增长,控制感染的发展,对小鼠皮肤烫伤MRSA感染具有良好的治疗作用。
- 丁静沈娟金小宝朱家勇
- 关键词：烫伤耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
- 人源抗菌肽LL-37的原核表达及活性鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的:实现大肠杆菌高效可溶表达人源抗菌肽LL-37。方法:LL-37基因克隆至原核载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。运用相关生物信息学软件分析重组蛋白Trx-LL-37的理化性质、亲/疏水性、蛋白质二级结构及其可溶表达概率。实验还考察了不同诱导温度对重组蛋白可溶表达比例的影响。结果:生物信息学分析显示,Trx-LL-37分子量21.5kD,理论等电点6.3,物理性质稳定,二级结构简单,具有可溶表达倾向。重组蛋白最佳诱导温度为17℃,与37℃相比,可溶表达比例由37.2%提高至50.2%,并且总表达量也提高了5%左右。抑菌结果显示纯化产物对多种常见细菌的生长具有抑制作用。结论:可采用融合方式通过原核系统高效可溶表达LL-37,为LL-37的功能研究打下基础。
- 丁静沈娟朱家勇金小宝卢雪梅梅寒芳李小波
- 关键词：生物信息学分析原核表达抑菌活性
- 烧烫伤创面感染的小鼠模型构建被引量：5
- 2013年
- 目的探讨一种简单、稳定的烧烫伤创面感染的小鼠模型构建方法,以便进行相关烧烫伤创面修复研究。方法取30只BALB/c小鼠,采用自制木质烫伤板,沸水浴法烫取直径8 mm的圆形创面,烫伤时间分别为5 s、10 s、15 s。伤后48 h,取创面组织进行HE染色观察,筛选最佳创面烫伤时间。另取72只小鼠制成深Ⅱ度烫伤创面,采用擦刮法分别接种20μL菌浓度为1×106、l×107、1×108CFU/mL金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC 25923的菌液。接种细菌后72 h,取创面组织HE染色观察创面炎症反应情况,并测定3、7、14 d的皮肤菌负荷,筛选最佳的细菌接种浓度。最后,按最佳条件建模后,观察创面的完全愈合时间以及创面愈中、愈后的组织学变化,以确定此创面感染模型是否建立成功。结果组织学结果表明,10 s为深Ⅱ度创面的理想致伤时间,最佳接种菌浓度为l×108CFU/mL,此时期,14 d内菌负荷均高于l×105CFU/g。该模型的创面愈合时间(21±0.95 d)较正常创面愈合时间(15.92±0.34 d)明显延长(P<0.01),炎性反应明显,愈后不佳。结论烧烫伤创面感染的小鼠模型构建成功,可作为感染创面防治研究的实验动物模型。
- 沈娟金小宝丁静朱家勇
- 关键词：烧烫伤金黄色葡萄球菌BALB
- LL-37-haFGF融合蛋白的结构预测与生物信息学分析被引量：2
- 2012年
- 目的:为开发一种多功能蛋白分子,该文采用生物信息学方法对LL-37-haFGF融合蛋白进行结构预测与分析。方法:重叠PCR技术克隆LL-37-haFGF基因,运用生物信息学软件分析LL-37-haFGF编码蛋白序列和结构。结果:LL-37-haFGF融合基因编码215个氨基酸,分子量为23.8 kDa,理论等电点为8.86,利于基因工程表达,结构分析表明其结构有利于多功能活性的保持。结论:融合基因的生物信息学分析与结构预测为研究其活性和作用机制奠定了基础。
- 沈娟丁静金小宝卢雪梅朱家勇
- 关键词：LL-37融合基因克隆生物信息学分析
- Survivin-2B增强甲氨蝶呤抑制BEL-7402
- 2013年
- 目的:研究高表达Survivin-2B对化疗药物甲氨蝶呤抑制肝肿瘤细胞株BEL-7402作用的影响。方法:构建真核表达重组质粒Survivin-2B/pcDNA3.1(-),利用增强型绿色荧光蛋白pEGFP-C1真核质粒测定脂质体转染条件及效率,采用该条件瞬时转染Survivin-2B/pcDNA3.1(-)、Survivin/pcDNA3.1(-)以及pcDNA3.1(-)阴性对照质粒至肝肿瘤细胞株Bel-7402,MTT法检测100mg/ml甲氨蝶呤作用时,各组细胞抑制情况的差异。结果:成功构建Survivin-2B/pcDNA3.1(-)重组质粒,脂质体转染48 h转染效率为62%,甲氨蝶呤对高表达Survivin-2B的Bel-7402细胞抑制率最高。结论:Survivin-2B与甲氨蝶呤同时作用可以提高对Bel-7402细胞的抑制率,为肿瘤治疗提供了新思路。
- 沈娟丁静黄演婷招巧莲杨政
- 关键词：剪接体SURVIVINBEL-7402
- 人源抗菌肽LL-37在创伤修复中的研究进展被引量：5
- 2011年
- 随着全球经济的快速发展,社会冲突、交通事故以及自然灾害的发生越来越频繁,创伤发病率增高,给个人和社会都造成巨大的负担.世界卫生组织调查统计,全球每年因创伤致死者约500万余人,占全部死亡原因的10%.机体的创伤愈合是一个由多种细胞及分子参与的复杂的生理过程,包括炎症期,增殖期,以及组织重塑期[1].LL-37作为关键的信号分子之一,与各类细胞及各种因子相互作用,协调达到平衡状态,有助于创伤修复.研究发现,人源抗菌肽LL-37能抗菌、调节炎症反应[2-4]、促进新生血管发生[5]及上皮再生[6]等,在创伤修复过程中发挥重要作用.本文就LL-37在创伤修复中的研究进展作一总结.
- 丁静沈娟朱家勇金小宝
- 关键词：创伤修复人源世界卫生组织新生血管发生信号分子自然灾害
- 非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子促小鼠烫伤愈合的研究被引量：6
- 2013年
- 目的:研究非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子(non-mitogenic human acidic fibroblastgrowth factor,nmhaFGF)在促小鼠深II度烫伤创面愈合中的作用。方法:采用大肠杆菌系统表达纯化制备nmhaFGF,细胞增殖法检测nmhaFGF生物活性,构建Balb/C小鼠深II度烫伤创面模型,分为实验组(20μg nmhaFGF/cm2创面,用PBS释稀)和空白对照组(外涂PBS),观察烫伤后1,3,7,9,14 d创面面积变化,并统计创面完全愈合所需要的时间;伤后7d,21d,取各组的伤口及周边皮肤HE及免疫组化染色(PCNA,胶原蛋白),观察创面病理组织学改变,胶原排列情况。结果:获得纯度为95.1%的nmhaFGF,有丝分裂活性较haFGF大大降低,外用nmhaFGF可促小鼠烫伤愈合,将愈合时间由17.2 d缩短至15.8 d(P<0.01);伤后7 d,nmhaFGF组创面肉芽组织生长较好,PCNA表达与空白对照组相比显著增加;21 d创面再上皮化较快,胶原蛋白排列较为整齐。结论:局部用nmhaFGF能促进小鼠深II度烫伤创面愈合,明显缩短愈合时间。
- 沈娟金小宝丁静朱家勇
- 关键词：大肠杆菌烫伤愈合BALBC小鼠
- 抗菌肽LL-37对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜的抑制作用被引量：6
- 2016年
- 目的研究人抗菌肽LL-37对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)生物膜的相关作用,为MRSA的预防治疗以及新药物开发应用提供新策略。方法运用微量肉汤稀释法测定LL-37对临床MRSA菌株的最小抑菌浓度;建立96孔板及6孔板生物膜体外模型;通过结晶紫定量法以及激光共聚焦荧光染色法检测LL-37对MRSA生物膜形成的影响。结果微量肉汤稀释法测得LL-37对临床MRSA菌株的MIC为12.5μmol/L。不同浓度LL-37作用后,结晶紫定量法结果表明1/20 MIC亚抑菌浓度的LL-37即可抑制生物膜形成(P<0.01),且抑制率随用药浓度增加也随之提高,在1/4 MIC条件下生物膜形成抑制率可达到63%。与生理盐水对照组相比,激光共聚焦扫描显微镜下可见,用药组生物膜排列稀疏,厚度变薄,组成菌量明显减少。结论低浓度的LL-37能够抑制MRSA生物膜的形成,并且对成熟生物膜结构也具有一定的破坏作用。
- 丁静王玉芝沈娟朱家勇金小宝
- 关键词：生物膜耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
- 融合蛋白LL-37-haFGF的复性及纯化条件研究被引量：1
- 2013年
- 首次设计开发一种促愈合,抗细菌感染的多肽分子——人源抗菌肽LL-37修饰haFGF的融合蛋白,旨在探讨此新型融合蛋白LL-37-haFGF的复性及纯化条件。利用重组大肠杆菌表达LL-37-haFGF并鉴定,初步考察8种复性添加小分子对其包涵体复性的作用,经分析表明,添加0.3 mol/L精氨酸可以大大提高LL-37-haFGF的复性效率。经镍亲和色谱及CM阳离子色谱纯化获得纯品。本研究获得了5.9 mg纯度为95.43%的LL-37-haFGF目的蛋白,为研究其功能奠定了基础,也为类似的双功能多肽的制备提供了参考依据。
- 沈娟金小宝丁静朱家勇
- 关键词：LL-37重组融合蛋白
