延边大学农学院动物遗传育种与繁殖实验室
- 作品数：24 被引量：58H指数：5
- 相关作者：张宝修胡德宝庄利利张日欣孙焕林更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技厅重点项目振兴东北老工业基地项目更多>>
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- 不同来源的牛皮肤成纤维细胞原代培养效果对核移殖胚发育的影响被引量：1
- 2009年
- 培养延边黄牛不同部位(耳部和腹部)和不同品种(黑白花、利木赞、延边黄牛)耳部的皮肤成纤维细胞,观察原代培养效果并用其核移植,探讨原代培养效果与囊胚发育率的关系。以组织块贴壁率、组织块发育率、组织块的细胞贴壁率作为原代培养效果的衡量标准;传3～5代后进行核移植,分别统计囊胚发育率。结果表明:延边黄牛腹部皮肤的生长效果明显好于耳部皮肤,并且囊胚发育率高于耳部皮肤。利木赞牛皮肤生长效果明显好于延边黄牛和黑白花,延边黄牛与黑白花差异不显著。与之对应,利木赞囊胚发育率显著高于延边黄牛与黑白花,延边黄牛与黑白花差异不显著。
- 孙焕林方南洙胡艳明林涛刘佳丽孔金超李钟淑
- 关键词：原代培养成纤维细胞核移植
- 小鼠体细胞核移植显微操作问题的探讨
- 2006年
- 本文阐述了体细胞核移植显微操作工具的制备及注意的问题和显微操作程序;同时,对体细胞核移植操作中值得注意的几个细节问题进行分析和探讨。
- 李井春方南洙
- 关键词：小鼠体细胞核显微操作
- 亚硒酸钠对延边奶山羊乳腺上皮细胞过氧化氢所致氧化损伤的保护作用被引量：2
- 2014年
- 研究了亚硒酸钠对过氧化氢导致的延边奶山羊乳腺上皮细胞氧化损伤的保护作用。将延边奶山羊乳腺上皮细胞分为3组:正常组(对照组1)、过氧化氢损伤组(对照组2)、亚硒酸钠保护组。MTT方法检测细胞活力,Hoechst33342/PI双染、Giemsa染色法检测细胞凋亡情况,DHE染色法检测细胞内ROS含量。结果表明,与对照组2相比,浓度为0.25、0.5、1.0μg/mL的亚硒酸钠保护组的延边奶山羊乳腺上皮细胞活力上升,细胞凋亡数目减少,活性氧含量减少。其中以0.5μg/mL亚硒酸钠处理组效果最显著。说明0.5μg/mL的亚硒酸钠可以减少过氧化氢所致的延边奶山羊乳腺上皮细胞的氧化损伤,提高细胞活力,抑制细胞凋亡,减少细胞内ROS含量。表明亚硒酸钠对延边奶山羊乳腺上皮细胞过氧化氢所致氧化损伤具有保护作用。
- 孙婧陶刘佳丽张宝修茹李波李钟淑方南洙
- 关键词：亚硒酸钠乳腺上皮细胞凋亡
- 葡萄糖在小鼠胚胎2-细胞晚期诱导活性氧增多抑制胚胎体外发育被引量：1
- 2009年
- 目的:测定葡萄糖培养早期胚胎体外发育各阶段的活性氧(ROS)水平,探讨葡萄糖对小鼠早期胚胎体外发育产生阻滞作用的机制。方法:通过在改良的CZB(m-CZB)培养液中添加不同浓度(分别为0、5、10、15、20、25、30mmol/L)的葡萄糖培养小鼠早期胚胎,根据其体外发育的不同阶段,用分子探针氢化乙啶(hydroethidine,HE)和紫外分光光度法分别检测小鼠胚胎内、外ROS含量。结果:葡萄糖浓度达到15mmol/L时囊胚发育率开始出现明显下降(P<0.05),相同浓度培养的小鼠胚胎在2-细胞晚期阶段胚胎内部超氧阴离子(O2·-)和培养液中过氧化氢(H2O2)含量均明显升高(P<0.05),而发育其他阶段胚胎内部的O2·-与对照组(0mmol/L葡萄糖组)比较均无统计学差异(P>0.05)。结论:高浓度葡萄糖可能在2-细胞晚期阶段诱导ROS增多,致使小鼠早期胚胎体外发育受阻。
- 张雷李钟淑方南洙
- 关键词：葡萄糖胚胎发育活性氧
- 活性氧对鼠早期胚胎抗氧化酶基因表达的影响被引量：6
- 2017年
- 通过检测鼠早期胚胎内过氧化物酶体数量及过氧化物酶体中抗氧化酶基因表达水平,以探讨活性氧对鼠胚胎2-细胞期过氧化物酶体数量的变化及过氧化物酶体中抗氧化酶基因表达量的影响。结果表明:Mn-SOD、GPX-1和GPX-4目的基因在鼠胚胎4-细胞期表达量最高;CAT和GPX-2目的基因在卵母细胞表达量最高;Cu/Zn-SOD目的基因在2-细胞期表达量最高;GPX-3目的基因在卵母细胞、1-细胞、2-细胞和4-细胞期间表达无明显差异。H2O2处理组中PMP-20、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和GPX-3基因表达量较高,GPX-2基因表达量较低,而GPX-4基因在体外培养组中表达量最高,GPX-1基因表达量无显著变化,CAT基因没有表达。由此可知,不同抗氧化酶基因表达量在鼠早期胚胎发育的不同时期有所不同,Mn-SOD、GPX-1和GPX-4基因表达量随着胚胎的发育不断增高,而过氧化物酶体数量同时也随之增加。
- 井洋洋方南洙张宝修胡德宝赵丽娟李钟淑
- 关键词：活性氧胚胎抗氧化酶过氧化物酶体
- 成熟液中添加巯基物质对延边黄牛体细胞克隆效率的影响
- 随着体细胞克隆技术的不断发展,卵母细胞的体外成熟已成为胚胎工程领域的一项基础性实验。卵母细胞的体外成熟(IVM)不仅是胚胎体外生产的关键一环,还可以为体细胞核移植提供受体卵母细胞。卵母细胞的成熟是一个复杂的动态过程,有许...
- 李丽刘佳丽张宇李钟淑方南洙
- 关键词：延边黄牛体外成熟GSH克隆效率
- 文献传递
- 长期氧化应激导致葡萄糖对小鼠胚胎发育损伤的机制被引量：5
- 2006年
- 葡萄糖是胚胎发育过程中所必需的重要能源物质之一,但当它长期过剩时,能够对胚胎发育造成损伤,而这一损伤正是通过多种代谢途径产生的活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)所致。对此,就葡萄糖引起胚胎氧化应激的一些机制进行简要回顾,并且为采用抗氧化手段是否可以阻止高糖对胚胎造成损伤这一构想提供一个参考。
- 张雷方南洙李井春
- 关键词：葡萄糖活性氧
- 延边黄牛卵母细胞去核方法的研究被引量：5
- 2006年
- 用改进的Willaden去核法与McGrath-Solter去核方法对延边黄牛卵母细胞进行去核操作,比较其去核操作效率。结果表明,本实验改进的willaden去核法——挤压去核法,无论在去核操作时间(1．0 min／枚,P<0．05)上,还是在去核效率(94%,P<0．01)上都显著地高于McGrath-Solter去核法(1．4 min／枚、72%)。表明改进的Willaden去核方法是一种适用于延边黄牛卵母细胞操作的快速、简单、实用的去核方法。
- 李井春方南洙
- 关键词：延边黄牛卵母细胞去核核移植
- 褪黑素对小鼠卵母细胞氧化应激及孤雌发育的影响被引量：4
- 2013年
- 通过小鼠卵母细胞自发成熟体外培养模型研究了褪黑素(MT)对外源性H2O2刺激的小鼠卵母细胞体外成熟及其孤雌发育的影响。结果表明:(1)随着H2O2剂量依赖性的增加,卵母细胞PB1的排出率下降,当增加H2O2(>250μmol·L-1)时,显著下降(19.4%vs.92.0%,P<0.05);(2)培养液中添加MT(0.1、1.0、10.0ng·mL-1)后均能阻止H2O2的抑制作用,其中10.0ng·mL-1的MT作用效果显著(P<0.05);(3)取GV期卵母细胞经H2O2(500μmol·L-1)和MT(0.000、0.001、0.010、0.100ng·mL-1)联合培养后孵育在2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCF-DA)中,荧光显色表明,MT清除了由于H2O2引起的细胞内大量的活性氧(Reactive oxygen species,ROS),其中0.100ng·mL-1的MT效果最显著(P<0.05),极大程度的降低了氧化应激损伤,提高了成熟率;(4)统计卵母细胞孤雌激活后的发育情况,MT浓度为10-9～10-3 mol·L-1组培养的孤雌胚2-细胞发育情况无显著差异(88.2%、91.4%、91.8%、88.8%vs.88.1%,P>0.05),MT浓度为10-7～10-3 mol·L-1组的4～8-细胞率差异显著(58.8%、73.8%、43.6%vs.23.4%,P<0.05),MT浓度为10-9～10-5 mol·L-1均明显促进囊胚发育(24.6%、46.6%、49.2%vs.8.0%,P<0.05)。氧化应激对卵母细胞的成熟是不利的,MT保护了卵母细胞免受氧化应激的影响,MT浓度为10-5 mol·L-1为卵母细胞孤雌发育能力的最适浓度。由此可推出MT作为细胞内的自由基清除剂,可能是提高卵母细胞和胚胎质量的重要条件之一。
- 姜园园张宝修孙婧陶李钟淑方南洙
- 关键词：褪黑素卵母细胞H2O2孤雌发育
- β-巯基乙醇对延边黄牛卵母细胞体外成熟及发育的影响
- 2010年
- 在成熟培养液中添加不同浓度的β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol,β-ME),研究其对延边黄牛卵母细胞体外成熟及发育的影响。结果表明,将卵母细胞置于100μmol/L的β-巯基乙醇的成熟培养液中进行体外培养,其成熟率、卵裂率和囊胚发育率均好于对照和其他处理,说明β-巯基乙醇的最佳浓度适合进行延边黄牛体细胞克隆中卵母细胞的体外成熟培养。
- 李丽高璐张涛李钟淑方南洙
- 关键词：延边黄牛卵母细胞体外成熟
