安徽工程大学生物与化学工程学院微生物发酵安徽省工程技术研究中心
- 作品数：32 被引量：107H指数：6
- 相关作者：高理所江荣珍李恒奎王栋刘杉林更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金安徽省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程医药卫生更多>>
- 银杏叶总黄酮浸提条件优化及其自由基清除活性研究被引量：1
- 2012年
- 目的:以银杏叶为原料,研究纤维素酶-乙醇协同提取总黄酮的浸提条件,并对粗提物的自由基清除活性进行测定。方法:通过单因素实验和响应面分析法确定最佳提取工艺参数。结果:纤维素酶用量100 U/mL,醋酸-醋酸钠缓冲液pH 4.8,酶解温度50℃,酶解时间2 h,该工艺参数下总黄酮得率为1.53%。1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH.)自由基清除实验表明,在总黄酮浓度为0.05 mg/mL,37℃保温15 min条件下,对0.04 mg/mLDPPH.自由基的清除率可达85.7%。结论:纤维素酶不破坏银杏叶总黄酮有效成分,可以用于银杏叶总黄酮的提取。
- 陈阿娜刘标汤斌
- 关键词：纤维素酶响应面法
- 基因组改组选育磷脂酶A1生产菌
- 2013年
- 以蜡样芽胞杆菌W22为出发菌株,通过紫外诱变和等离子体诱变得到若干株酶活力提高的突变株。以紫外诱变突变菌株W22-a、W22-g和等离子诱变菌株W22-5为基因组改组的亲本,考察了原生质体的制备、灭活条件。原生质体的最佳制备条件是:溶菌酶浓度0.5mg/ml,酶解时间90min,反应温度25℃,预处理甘氨酸浓度为20mg/ml。选择紫外灭活160秒、热灭活16分钟的剂量来完成亲本原生质体的灭活。从众多融合子中筛得一株突变株WR2-2,发酵酶活为17.78U/ml,相对于出发菌株W22(9.22U/ml)提高酶活达92.8%。
- 王洲薛正莲马琦亚苏燕南赵世光
- 关键词：磷脂酶A1紫外诱变基因组改组
- 两阶段转速控制对粪肠乳酸球菌合成γ-氨基丁酸的影响被引量：1
- 2019年
- 为进一步提高粪肠乳酸球菌合成γ-氨基丁酸(GABA)的产量,在250mL摇瓶水平上考察了转速(0和100r/min)对菌体生长和产物合成的影响。通过分析不同转速下发酵曲线和动力学参数,提出两阶段转速调控策略,并对影响此调控策略的发酵条件(阶段时间、装液量及转速)进行正交优化。72h、0r/min产量最高,稳定期、100r/min生物量最高。优化后发酵条件为装液量100mL,在发酵前期(0~12h)控制转速150r/min,发酵后期(12~72h)控制转速0r/min;在此基础上,GABA产量达到(6.713±0.135)g/L,比优化前(0和100r/min)分别提高了12.2%与60.1%。两阶段转速控制策略可以有效提高粪肠乳酸球菌合成GABA的能力,对GABA工业化生产具有重要的参考价值和指导意义。
- 张敏薛正莲余飞刘艳王洲
- 关键词：Γ-氨基丁酸发酵动力学
- 纸层析-酶标仪法测定发酵液中γ-氨基丁酸被引量：7
- 2019年
- 建立纸层析-酶标仪法对微孔板发酵液中γ-氨基丁酸产量进行测定。对影响纸层析-酶标仪法测定结果的重要因素进行优化,并建立相应的分光光度法。优化后层析液中显色剂-茚三酮的浓度为8g/L,展开剂-正丁醇、冰醋酸与水3者体积比为2∶1∶1;洗脱液中乙醇的体积分数为75%,乙醇与质量浓度为6g/LCuSO4·5H2O的体积比为39∶1;γ-氨基丁酸质量浓度在1~7g/L之间,吸光度与样品浓度线性关系良好(R2=0.9990),平均回收率为98.2485%,重复性RSD为2.6255%。纸层析-酶标仪法能快速、准确地测定微孔板发酵液中γ-氨基丁酸产量,为后续高通量选育γ-氨基丁酸高产菌株奠定了基础。
- 张敏薛正莲余飞刘艳王洲
- 关键词：Γ-氨基丁酸纸层析酶标仪
- 1株植物乳杆菌的抑菌作用及其生物学特性的研究被引量：5
- 2014年
- 植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)是乳酸杆菌中的一种,常存在于发酵的蔬菜和果汁中。植物乳杆菌作为人体肠道的益生菌群,具有维持肠道菌群平衡、提高机体免疫力和促进营养物质吸收等多种作用。研究从市售腌渍蔬菜中分离筛选获得一株植物乳杆菌,以9种菌作为指示菌,采用牛津杯琼脂扩散法检测筛选菌株的抑菌谱大小。结果表明,该菌株能较强的抑制大肠杆菌、柠檬色葡萄球菌、藤黄微球菌和枯草芽孢杆菌等指示菌。此外,研究了菌株对温度的稳定性,p H值的耐受性及其酶的敏感性等生物学特性,结果显示该株植物乳杆菌菌株具有良好的热稳定性,酸碱稳定性,并且对3种蛋白酶具有很好的敏感性。这为今后深入研究与开发植物乳杆菌奠定了基础。
- 洪伟薛正莲
- 关键词：植物乳杆菌指示菌抑菌性生物学特性
- 粪肠球菌HX-3-6产γ-氨基丁酸发酵条件的优化被引量：4
- 2013年
- 目的优化粪肠球菌HX-3-6产γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acid,GABA)的发酵条件,提高GABA的产量。方法通过单因素试验和正交试验对产GABA的粪肠球菌HX-3-6发酵条件进行优化,采用Plackett-Burman(PB)试验设计法筛选产GABA的培养基主要影响因素,应用Box-Behnken设计及响应面分析对影响发酵产GABA的主要培养基因素进行优化;用最终优化的配方进行3次验证试验。结果最佳发酵条件为底物浓度30 g/L,起始pH 5.5,发酵时间72 h,温度35℃;PB法筛选出了培养基中有显著效应的4个因素为MnSO4﹒H2O、NaCl、柠檬酸三胺和葡萄糖,经Box-Behnken设计及响应面分析,确定该4个主要影响因素的最佳浓度分别为0.100 785、0.224 459、0.215 355及12.335 95 g/L。3次验证GABA的产量平均可达16.027 g/L,比优化前(11.006 g/L)提高了45.62%。结论优化的粪肠球菌HX-3-6发酵条件和培养基可显著提高GABA产量,为其工业化生产奠定了基础。
- 钱森和黄祖耀薛正莲赵世光
- 关键词：粪肠球菌Γ-氨基丁酸发酵
- 粘质沙雷氏菌PL-06磷脂酶A1基因大肠杆菌优化表达被引量：4
- 2013年
- 以粘质沙雷氏菌PL-06基因组为模板扩增得到磷脂酶A1基因plaA和含有辅助蛋白的磷脂酶A1基因plaB。plaA和plaB基因与pET-28a(+)连接后转入大肠杆菌BL21(DE3)表达,得到基因工程菌AP28和BP28。AP28最佳的诱导表达条件为诱导初始OD600值0.5,IPTG浓度为0.2mmol/L,诱导温度为37℃,诱导时间为4h,优化后磷脂酶A1蛋白表达水平从32%上升至46%,包涵体复性的磷脂酶A1酶活从10.8U/ml上升到12U/ml,相对于BP28工程菌,目的蛋白的表达对宿主细胞毒性小,而且得到的蛋白容易纯化。因此通过优化磷脂酶A1基因plaA的诱导条件,使磷脂酶A1以大量的包涵体形式表达,从而得到较高活性的磷脂酶A1并避免其对宿主细胞的毒性是可行的,而且可以得到大量纯化的磷脂酶A1蛋白,方便下一步的研究。
- 苏燕南薛正莲陈涛马琦亚
- 关键词：粘质沙雷氏菌磷脂酶A1包涵体复性
- 应用型生物技术专业人才培养模式的改革与实践被引量：4
- 2015年
- 目前,生物技术教育存在人才培养目标宽泛、社会服务定位模糊等不足,造成了该专业毕业生缺乏与企业需求相匹配的实践应用能力[1-2].基于应用型人才的培养目标,进行了生物技术专业人才培养模式的改革与实践.1深入分析专业特点,凝练人才培养特色1.1深入分析专业特点安徽工程大学的理科生物技术专业是全校专业中的“小众”专业,缺乏较强的“政策背景”支持.此外,该专业人才培养目标及服务面向定位清晰度不高,与其他高校同类专业的同质化比较严重.再者,我国高校中开设的生物类本科专业还包括生物科学、生物工程,与生物技术均为同类近似专业,三者的人才培养目标及模式很难清晰化区分,
- 赵世光薛正莲杨超英孔芳钱森和柴瑞娟聂光军
- 关键词：生物技术生物类生物科学社会服务课程教学体系
- 粪肠球菌HX-3细胞转化合成γ-氨基丁酸条件的优化被引量：2
- 2012年
- 本文采用粪肠球菌HX-3菌体细胞转化法制备γ-氨基丁酸(GABA),并对影响细胞转化反应的一系列条件进行了正交优化。结果表明,在优化后的转化条件下,即:发酵2d的菌体细胞、温度42℃、缓冲液pH 4.8、PLP浓度0.05mmol/L、谷氨酸钠35g/L,进行转化反应,体系中GABA浓度可达9.14g/L。
- 黄祖耀薛正莲陈涛
- 关键词：粪肠球菌Γ-氨基丁酸细胞转化正交
- ARTP辐照对磷脂酶A1重组质粒的诱变效应
- 利用常压室温等离子体诱变技术(ARTP)处理磷脂酶A1 重组质粒pET28a-plaB,经琼脂糖凝胶电泳检测发现随着处理时间的延长,质粒超螺旋结构逐渐转变为开环及线性结构.对处理后的质粒转化到BL21 宿主菌中,在特定选...
- 杨建伟朱昊杨蒙王洲薛正莲
- 关键词：诱变磷脂酶A1质粒
