湖南农业大学植物保护学院植物疾病控制与利用湖南省高校重点实验室
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- 马铃薯AP2/ERF转录因子的克隆及植物表达载体构建被引量：5
- 2020年
- AP2/ERF基因家族转录因子普遍存在于植物中,参与植物体内的各种生物学过程,包括植物的生长发育、生物和非生物胁迫响应等。前期转录组测序的结果发现马铃薯‘加湘1号’一个AP2/ERF家族基因(PGSC0003DMG400012154)在接种晚疫病菌(Phytophthora infestans)24 h后被显著激活。从接种P.infestans 24 h的‘加湘1号’的总RNA中通过RT-PCR获得了该基因CDS序列为885 bp,BLAST分析显示该基因编码一个295个氨基酸残基的蛋白,并且含有1个AP2/ERF结构域,是AP2/ERF转录因子家族中的ERF亚家族的一员。本研究将该基因与XcmⅠ酶切的表达载体pCXSN连接,转化大肠杆菌,通过测序挑选插入正确克隆酶切验证,并成功转化农杆菌。本研究结果为进一步研究该基因的功能提供了帮助。
- 王慧刘洪杨奕琦许思思熊兴耀周倩
- 关键词：马铃薯晚疫病基因克隆表达载体构建
- 不同试剂对萝卜种子消毒效果的影响
- 2024年
- 【目的】建立一种简单易行、消毒效果良好且不影响种子萌发的消毒方法。【方法】采用平板抑菌试验和种子萌发试验,比较了NaClO、CuSO4、NaOH、Na3PO4对萝卜种子的消毒效果及对种子萌发的影响。分别用1%NaClO、1%CuSO4、2%NaOH、10%Na3PO4加1%SDS对萝卜种子进行消毒,并计算抑菌率、发芽率和发芽势。并用84消毒液替代NaClO,洗洁精替代SDS分别对萝卜、番茄和甜瓜的种子进行消毒。【结果】1%NaClO加1%SDS的消毒效果好,且不影响种子萌发。NaClO和SDS在日常生活中较难购买,且固体的NaClO和SDS易吸潮变质不易保存,因此用84消毒液替代NaClO,洗洁精替代SDS对种子进行消毒。先按说明稀释84消毒液,加入1滴黄豆大小(约0.05mL)的洗洁精混匀,再将蔬菜种子浸泡10min后捞出,清水冲洗3次,同样可以达到理想的种子消毒效果。【结论】建立了一种简便易行、实用经济的蔬菜种子消毒方法,即使用常见市售84消毒液和洗洁精替代市面不常见的NaClO和SDS来进行种子消毒,既能有效杀灭种子表面的病原物又不影响种子萌发。
- 邓心怡秦玉芝周倩
- 关键词：种传病害种子消毒洗洁精
- 马铃薯晚疫病菌应答WRKY基因的结构功能预测与植物表达载体构建被引量：2
- 2019年
- WRKY是一类广泛参与高等植物各种抗逆调控活动的转录因子,可以通过激活下游相关信号转导途径调节自身的应激反应,进而增强植物抗逆性。本研究通过RNA-Seq从马铃薯(Solanum tuberosum)中筛选出一个晚疫病菌诱导WRKY转录因子基因StWRKY。采用RT-PCR技术获得该基因CDS全长,并对其进行序列分析及结构功能预测。根据StWRKY蛋白序列进行同源性搜索,得到与其蛋白序列相似度较高的其他物种的蛋白序列,使用MEGA7软件对St WRKY蛋白序列及其同源序列进行多序列比对分析并构建了系统进化树。利用在线工具ProtParam对StWRKY进行氨基酸理化性质分析;利用SMART在线工具进行蛋白序列分析;利用SWISS-MODEL在线工具和PredictProtein在线平台分别对StWRKY蛋白二级结构和三级结构进行分析。结果表明,StWRKY核苷酸序列CDS全长为957 bp,编码含318个氨基酸的蛋白质,预测蛋白分子量为36.17 k D,等电点为6.49。既不是分泌蛋白也不是膜蛋白,未发现跨膜区、信号肽和复合螺旋区。StWRKY三维空间结构主要由无规卷曲以及β-折叠组成。通过XcmⅠ酶切、连接将StWRKY装载到pCXSN载体上,构建了该基因的超表达载体pCXSN-StWRKY。StWRKY基因的克隆,为进一步从分子水平上验证其抗晚疫病的生物学功能以及揭示马铃薯生物胁迫抗逆机制奠定基础,并为马铃薯抗病育种提供新的基因资源。
- 卢昊杨奕琦秦玉芝熊兴耀周倩
- 关键词：WRKY转录因子基因克隆表达载体构建
- 湖南省道县水稻叶条斑病病原菌分离与鉴定
- 2024年
- 【目的】2023年6月在湖南省永州市道县仙子脚镇多个村的水稻上发现一种叶条斑病,发生面积超过30 hm^(2),为探究发病原因,开展相关研究。【方法】利用组织分离法对道县采集的水稻病叶进行病原菌分离,对分离到的病菌进行形态学观察,结合ITS、TEF1-α和TUB2基因序列联合建树,确定病原物,利用柯赫氏法则进行病原物验证。【结果】湖南省永州市道县仙子脚镇发生的水稻叶条斑病病原菌为稻黑孢(Nigrospora oryzae)。【结论】明确了湖南省道县水稻叶条斑病的病原菌,为今后防控工作的开展提供参考。
- 王潇琪任晓凤杨华何斌邓义昌周倩
- 湖南新田县茄果腐烂病的诊断及药剂筛选被引量：1
- 2014年
- 2012年8月湖南新田县蔬菜基地发生茄子果实腐烂病,损失严重。从感病茄果上分离到一种真菌,镜检表明为茄褐纹拟茎点霉,此菌rDNA-ITS序列亦与茄褐纹拟茎点霉高度同源。因当地反映百菌清、多菌灵、代森锰锌等药剂均无明显效果,故尝试了室内实验以筛选出有效防治该病的药剂。采用菌丝生长速率法,用11种杀菌剂做了室内毒力测定。咪鲜胺对茄褐纹病菌的抑制效果最好,EC50值为0.021 mg/L;其次是甲基硫菌灵和苯醚甲环唑,EC50值是0.252和0.434 mg/L;百菌清与醚菌酯的抑制效果最差,EC50值分别为44.400和54.470 mg/L。建议在病区选用咪鲜胺防治茄褐纹病。
- 王姝玮高必达朱宏建周倩商红红
- 关键词：茄子药剂筛选
