江汉大学生命科学学院生物技术系
- 作品数：18 被引量：48H指数：4
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- 小鼠H-2D^b-BSP融合基因的构建与表达
- 2010年
- 目的:构建小鼠H-2Db-BSP融合基因,并诱导其在大肠杆菌中表达.方法:采用RT-PCR方法从C57BL/6小鼠淋巴细胞中扩增出H-2Db链的胞外段基因,经双酶切置换已构建的HLA-A*0201-BSP重组体中的HLA-A*0201胞外段序列,使H-2Db与BirA酶底物肽(BSP)序列融合,构建H-2Db-BSP融合基因表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,筛选重组子,并经IPTG诱导融合蛋白表达.结果:构建的H-2Db-BSP融合基因插入正确且序列与GenBank一致;经1mmol/L浓度的IPTG诱导后4h蛋白表达达到高峰,且融合蛋白以包涵体形式存在.结论:成功构建H-2Db-BSP融合基因,并诱导其在大肠杆菌得以表达,为进一步构建H-2Db四聚体,研究T细胞应答提供了物质基础.
- 李佳楠董元火
- 关键词：克隆
- 新品种紫辣椒和紫豇豆果皮花色苷含量测定被引量：4
- 2020年
- 辣椒和豇豆是人们餐桌中常见的两种蔬菜,从湖北省豆类(蔬菜)植物工程技术研究中心分别收集了3种紫辣椒和10种紫豇豆,采用有机溶剂提取法进行果皮花色苷的提取,利用pH示差法对其花色苷的含量进行了测定。结果显示紫色蔬菜富含花色苷,在紫辣椒中,果皮花色苷含量最高的是江大紫辣椒2号,为25.9363 mg/100g,花色苷含量的平均值为19.0115 mg/100g,花色苷含量超过平均值的有紫辣椒11-2-1、江大紫辣椒2号;紫豇豆中果皮花色苷含量最高的是JD0567,为131.2036 mg/100g,花色苷含量的平均值为87.355 mg/100g,其中JD0138、JD0821、JD0567、JD0140的花色苷含量均超过平均值。本研究结果为今后选育出高花色苷含量的优良品种提供实验依据,为紫色辣椒和紫色豇豆中花色苷这一功能性成分的开发利用提供科学依据,有助于推广种植紫色蔬菜。
- 谢倩阳晓婷杨薇李佳楠
- 关键词：花色苷PH示差法
- 李时珍故里的水蕨群落结构基本特征被引量：3
- 2009年
- 研究了李时珍故里的濒危水生植物水蕨种群和群落的基本特征。种群面积为2—3m^2，植株数为5～8株，为小种群。与水蕨相伴生的物种主要有9科12属12种。过度养殖和耕作是导致水蕨濒危的重要原因。
- 董元火
- 关键词：水蕨濒危群落特征
- 理科大学生毕业论文的质量对科学素质培养的启示与实践
- 2012年
- 本文从理科大学生毕业论文凸显的问题,探讨了培养大学生科学素质的途径。科研训练是提高大学生科学素质的重要途径之一,诚信的科学态度是培养的核心。自主性学习和探究是提高科学素质的动力源泉。对学生科学素质的培养应该成为学校的终级目标。通过建立和健全管理机制,使培养学生科学素质制度化。通过建立激励机制,充分调动学生提升自身的科学素质的积极性和主动性。
- 董元火周世力李佳楠
- 关键词：自主性
- 菜豆毒性分析及毒性预测模型建立被引量：11
- 2015年
- 【目的】从细胞水平分析不同品种菜豆对小鼠细胞的毒性,建立菜豆毒性预测模型,为菜豆低毒品种选育提供依据。【方法】选取已测定抗营养因子含量的27个品种的菜豆,通过匀浆、离心、超滤浓缩制备菜豆浸提液。分离小鼠脾脏淋巴细胞,利用MTS法分析菜豆浸提液对小鼠淋巴细胞存活率的影响。结合27个菜豆品种的抗营养因子含量,以小鼠细胞生长影响率为依变量,抗营养因子含量为自变量,SPSS软件强行进入4个变量,得到多元回归方程,并经逐步回归分析,最终得到一元回归方程,从而建立菜豆毒性预测模型。以小鼠进行急性毒性试验,验证菜豆毒性预测模型的可行性:选择高、中、低3个毒性等级共6个菜豆品种,采用经口灌胃的方式处理小鼠,以灌胃菜豆浸提液的小鼠为试验组,灌胃生理盐水的小鼠为阴性对照组,灌胃菜豆植物凝集素标准品的小鼠为阳性对照组,观察各组小鼠死亡情况,统计一周内小鼠死亡率,解剖观察各组小鼠脏器改变,并取各组小鼠肝脏、脾脏、肾脏、胃、小肠等器官组织制备病理切片,经HE染色后于倒置显微镜下进行病理分析。【结果】MTS检测结果显示,27个菜豆品种的浸提液对小鼠淋巴细胞生长均有不同程度影响,影响率最低为13.77%,最高为85.23%,且不同菜豆品种浸提液对小鼠淋巴细胞影响率差异显著;此外,菜豆植物凝集素的含量是菜豆浸提液对小鼠淋巴细胞生长的主要影响因素。结合抗营养因子含量测定结果,得到多元回归方程Y=-20.88+4.902X1+0.258X2-3.506X3+18.298X4,经逐步回归分析,最终得到一元回归方程Y=30.837+4.5X1,建立了菜豆毒性预测模型。小鼠急性毒性试验结果表明,菜豆浸提液对小鼠一周内致死率与其对小鼠淋巴细胞生长影响率呈正相关,高温灭活后的致死试验表明菜豆鲜荚的主要致死成分为蛋白类物质。灌胃后的试验组小鼠在生理行
- 李佳楠杨薇彭娜陈禅友
- 关键词：菜豆抗营养因子毒性评价
- 重组人神经生长因子昆虫表达载体的构建及表达被引量：2
- 2010年
- 目的:构建重组人神经生长因子(rh-NGF)杆状病毒表达载体,转染昆虫细胞从而获得目的蛋白的大量表达.方法:从人胎盘组织中提取细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增-NGF基因片段,经BamHI、HindⅢ双酶切后插入杆状病毒表达载体pFastBacTMDual的多克隆位点处,构建出重组载体pFastBacTM-Dual+[rh-NGF].对构建的载体进行PCR和酶切鉴定并测序.采用脂质体转染方法将表达载体转入昆虫细胞系Sf9中,通过双抗夹心ELISA对rh-NGF的表达进行检测.结果:构建的rh-NGF基因插入正确且序列与GenBank一致.ELISA检测结果显示病毒感染的Sf9细胞可表达rh-NGF.结论:成功构建出杆状病毒表达载体pFastBacTMDual+[rh-NGF],并在昆虫细胞系Sf9中得到表达,为大量制备重组人神经生长因子奠定了基础.
- 李佳楠韩诗周世力
- 关键词：杆状病毒载体
- 几种常见品种葡萄籽及葡萄皮中原花青素含量测定被引量：6
- 2017年
- 采集市场上几种常见的有籽葡萄及无籽葡萄品种样本,采用有机溶剂提取法进行原花青素的提取,利用铁盐催化比色法测定葡萄籽及葡萄皮中原花青素的含量。结果显示在有籽葡萄中,黑加仑葡萄籽及葡萄皮原花青素含量是所有葡萄中最高的,分别为葡萄籽中232.1mg/g,葡萄皮中125.5mg/g;在无籽葡萄中,葡萄皮原花青素含量最高的品种为黑提,为51.9mg/g。本研究结果为原花青素食品和保健品的开发提供了实验依据,同时也对帮助人们选择食用高水平原花青素含量的葡萄具有指导意义。
- 谢倩汪婷李佳楠
- 关键词：原花青素葡萄籽葡萄皮
- 菜豆植物凝集素活性的测定方法研究
- 2015年
- 探索分光光度法测定菜豆(Phaseolus vulgaris)植物凝集素活性的最佳测定条件,分析了56个菜豆品种的植物凝集素活性。结果表明,红细胞悬液浓度2×108个/m L,凝血10 min后测定OD416 nm,为菜豆植物凝集素的最佳测定条件。在该条件下,分析了56个菜豆品种中的植物凝集素活性浓度,旨在为分析菜豆植物凝集素的毒效提供参考。
- 李佳楠杨薇袁莎陈禅友
- 关键词：植物凝集素分光光度法
- 病毒肽/HLA-A2复合物与抗转铁蛋白受体单链抗体融合蛋白的构建、表达及鉴定
- 2010年
- 目的制备抗转铁蛋白受体单链抗体与病毒肽/HLA-A2的融合蛋白。方法利用重组DNA技术将HLA-A2基因和转铁蛋白受体单链抗体(TfRscFv)基因,用柔性的linker(Gly-4-Ser)3连接并克隆到原核表达载体pET28a(+)上,转化大肠埃希菌BL21(λDE3)菌株,获取重组子,经IPTG诱导表达目的蛋白。将纯化的目的蛋白和β2微球蛋白(β2m)与HLA-A2限制性的乙肝病毒(HBV)核心抗原肽HBcAg18-27在体外进行稀释复性,形成HBcAg18-27/HLA-A2/TfRscFv融合蛋白。利用ELISA和微球结合试验检测融合蛋白的空间构象。结果构建的融合蛋白基因具有正确的序列,经IPTG诱导后以包涵体形式表达的蛋白分子量正确,体外稀释复性后的融合蛋白具有正确的HLA-A2空间构象。结论成功构建了HBcAg18-27/HLA-A2/TfRscFv融合蛋白,为进一步将该融合蛋白通过其单链抗体加载到肿瘤细胞表面从而诱导乙肝病毒肽特异性细胞毒性T淋巴细胞杀伤肿瘤细胞奠定了物质基础。
- 李佳楠孙伟吴雄
- 关键词：HLA-A2转铁蛋白受体单链抗体
- 粗梗水蕨种群特征和群落的物种多样性调查
- 2012年
- 研究了湖北省蕲春县的濒危水生植物粗梗水蕨种群和群落的基本特征。结果表明种群面积为40～50 m2,植株数为1 000～1 500株,频度和盖度分别为100%、40%,为小种群,与粗梗水蕨相伴生的物种主要有6科7属7种,反映了小种群及人类活动可能是加剧该种群濒危的主要原因,为采取有效措施对其加以更好地保护提供了理论基础。
- 董元火
- 关键词：种群特征物种多样性
