安徽医科大学基础医学院免疫学教研室 作品数:30 被引量:95 H指数:6 相关作者: 程艳伟 闫海 陈思 孙志晓 更多>> 相关机构: 淮北职业技术学院医学系 蚌埠医学院医学检验系 蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 安徽省高校省级自然科学研究项目 安徽省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
辛伐他汀对oxLDL诱导的巨噬细胞活性氧及IL-1β分泌的影响 被引量:2 2014年 目的探讨辛伐他汀对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)诱导的巨噬细胞内活性氧(ROS)的水平及IL-1β分泌的影响。方法将oxLDL 0、50、100、200 mg·L-1作用于巨噬细胞J774A.1后,采用油红O染色观察脂滴在巨噬细胞内的聚集情况;用辛伐他汀0.5、1.0μmol·L-1作用于oxLDL处理的巨噬细胞,流式细胞仪检测辛伐他汀作用前后细胞内ROS的水平;Western blot检测pro-caspase-1、cleaved caspase-1和成熟IL-1β的表达情况。结果油红O染色结果表明,oxLDL可导致巨噬细胞内明显的脂质聚集,并于100 mg·L-1作用剂量达到摄取脂质的饱和状态;流式细胞仪结果表明,oxLDL可以诱导脂质聚集巨噬细胞内ROS的水平增加,辛伐他汀作用后,ROS水平由(167±0.47)%下降到(139±0.97)%,并呈明显的剂量依赖;Western blot结果表明,辛伐他汀可抑制oxLDL诱导的caspase-1活化及IL-1β的分泌,辛伐他汀处理组与oxLDL实验组相比,cleaved caspase-1及成熟IL-1β的表达呈下降趋势,灰度值差异有统计学意义(P<0.05)。结论在oxLDL诱导的巨噬细胞脂质聚集模型中,辛伐他汀可以抑制巨噬细胞内ROS的产生及caspase-1的活化,并减少IL-1β的分泌。 靳梦醒 闫海 程艳伟 桂丽 胡春松 张林杰 黄保军关键词:辛伐他汀 巨噬细胞 活性氧 IL-1Β OX-LDL SHIP2通过上调Bim表达增强胃癌细胞BGC-823对紫杉醇的敏感性 被引量:2 2014年 目的探讨SHIP2(SH2 domain containing inositol 5-phosphatase 2)基因转染人胃癌细胞BGC-823后对紫杉醇敏感性的影响。方法流式细胞仪PI单染法检测细胞凋亡率。应用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测各组细胞蛋白表达情况。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)分析mRNA的变化水平。将pCMV6-SHIP2质粒在脂质体介导下转染人胃癌BGC-823细胞,同时以转染空载体和未转染细胞作为对照组。将GV112-Puromycin空载体和GV112-Puromycin-Bim(Bcl-2 interacting mediator of cell death)慢病毒颗粒分别感染BGC-823细胞,建立稳定细胞株,再将pCMV6-SHIP2质粒分别转染空载体和稳定干扰Bim表达细胞株。结果与SGC-7901细胞相比,BGC-823细胞对紫杉醇诱导的凋亡相对不敏感,0.3μmol·L-1紫杉醇诱导BGC-823 48 h后细胞凋亡率仅为(25.6±1.6)%,在紫杉醇作用不同时间点Bim蛋白和mRNA表达均无明显变化;与对照组相比,转染SHIP2基因能明显增加Bim的表达,紫杉醇作用48 h后,细胞凋亡率上升到(50.8±0.9)%;GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的BGC-823细胞,Bim的表达明显被抑制,在GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的稳定BGC-823细胞中转入pCMV6-SHIP2,紫杉醇作用48 h后,凋亡率为(27.6±1.6)%。结论转染外源性SHIP2基因能有效提高BGC-823细胞内Bim的表达,诱导BGC-823细胞凋亡,明显增加BGC-823细胞对紫杉醇的敏感性。 葛燕梅 叶艳 张林杰关键词:胃癌 BIM 紫杉醇 AKT CD19、CD56在急性髓系白血病RUNX1-RUNX1T1^+突变患者中的表达及其临床意义 被引量:8 2018年 目的:探讨急性非M3髓细胞性白血病(AML non-M3)患者骨髓RUNX1-RUNX1T1表达水平的临床意义,了解表达淋系抗原CD19、CD56的RUNX1-RUNX1T1^+的AML的生物学特征及其对初次诱导缓解率和预后的影响。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测200例初诊AML(non-M3)患者骨髓RUNX1-RUNX1T1表达水平,用流式细胞术检测AML的淋系抗原表达水平,分析初次诱导缓解率(CR1)和总生存率(OS)的关系;对照分析RUNX1-RUNX1T1^+患者中CD56^+和CD56^-以及CD19^+和CD19^-患者在CR1和OS的区别。结果:在RUNX1-RUNX1T1^+的AML患者中,初诊时CD56^+患者具有较低的CR1(P<0.05)。CD19^+患者CR1较CD19^-患者高(P<0.05)。CD56^+患者的OS率显著低于CD56^-患者(P<0.05)。CD19^+患者的OS与CD19^-患者的OS率无显著差异。结论:RUNX1-RUNX1T1^+的AML患者中骨髓CD56^+提示预后不良,CD19^+仅与CR1相关,与OS无关。 胡忠利 张凤 黄保军 潘少君关键词:急性髓细胞性白血病 CD19 CD56 总生存率 IL-2诱导外周血单个核细胞对肿瘤细胞的杀伤效应 被引量:3 2003年 目的 了解白细胞介素 2 (IL 2 )诱导外周血单个核细胞 (PBMC)对肿瘤细胞的杀伤效应 ,探讨其作用机制。方法 IL 2 ( 10 5IU/L)体外诱导PBMC 5d ,并与Raji细胞株共同培养 ,采用MTT法测定不同时间诱导后的PBMC对Raji细胞的杀伤效应 ;采用BAS ELISA法检测杀伤活性最大时的IFN γ、TNF α、sFasL的表达 ,采用流式细胞仪检测诱导后PBMC的FasL、穿孔素、颗粒酶B的表达。结果 IL 2 ( 10 5IU/L)体外诱导PBMC 5d时 ,都能明显增强对Raji细胞的杀伤活性 ,而且在培养的第 4天杀伤活性最高 (P <0 0 5 ) ,诱导PBMC 4d后 ,FasL、穿孔素、颗粒酶B的表达与B组相比 ,明显增加 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 IL 2 ( 10 5IU/L)体外诱导PBMC能明显增强对Raji细胞的杀伤活性 ,主要是通过诱导PBMC表达IFN γ、穿孔素。 杨明珍 夏瑞祥 黄建尧 曾庆曙 程昌斌 谭锦泉关键词:IL-2 外周血单个核细胞 肿瘤细胞 杀伤效应 免疫学 膝关节骨关节炎患者外周血NK细胞数量增加且表型异常 被引量:2 2019年 目的探讨自然杀伤(NK)细胞在膝关节骨关节炎(KOA)外周血中的分布及表型特征。方法采用流式细胞术检测并分析对比无KOA的健康人群与KOA患者外周血中不同表型的NK细胞分布及其表面功能受体人类白细胞抗原DR(HLA-DR)、自然胞毒受体3(NCR3/NKP30)的表达情况。结果NK细胞在KOA患者外周血比例明显上调,其中以CD16bright NK细胞升高为主。KOA的NK细胞表面HLA-DR分子表达上调,而NKP30表达明显降低。结论NK细胞在KOA患者外周血中的比例增加,CD16、HLA-DR表达上调、NKP30表达下调。 彭志伟 徐斌 王高远 徐洪港 张瀚元 朱云 徐龙关键词:膝关节 自然杀伤细胞 流式细胞术 茶黄素对人骨髓基质干细胞的成骨诱导作用 被引量:4 2010年 目的探讨茶黄素对体外培养人骨髓基质干细胞(BMSCs)的成骨诱导作用及其能力。方法将第二代人BMSCs分为茶黄素组、对照组,茶黄素组加入浓度为10 mmol/L茶黄素,对照组不干预。对比观察两组干预后细胞形态,钙结节、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原及骨钙素(OCN)免疫组化染色结果,并检测各组4、8、12、16 d各时点ALP、OCN活性。结果茶黄素组钙结节、ALP、Ⅰ型胶原及OCN免疫组化染色均呈阳性,对照组均为阴性;茶黄素组各时点ALP、OCN活性均高于对照组(P均<0.05)。结论茶黄素可促进人BMSCs向成骨细胞分化。 尚希福 路玉峰 张文志 张梅 贺瑞 姚刚 胡飞 曾建学关键词:人骨髓基质干细胞 茶黄素 骨钙素 链脲佐菌素诱导小鼠B细胞可抑制MIN-6细胞分泌胰岛素并促进胰岛素自身抗体的产生 被引量:1 2015年 目的探讨链脲佐菌素(STZ)诱导小鼠后B淋巴细胞对自身免疫性糖尿病发展的作用。方法以低剂量STZ诱导ICR小鼠,建立小鼠自身免疫性糖尿病模型,采用放射免疫法和ELISA分别检测胰岛素和胰岛素自身抗体,判断模型的诱导情况;以CD19磁珠分选STZ诱导的小鼠以及正常小鼠外周血B淋巴细胞,通过流式细胞术检测磁珠分选情况;以PBS处理的MIN-6细胞为空白对照组(A组),以正常小鼠B细胞和MIN-6细胞共培养为B组,以经20μg/m L脂多糖(LPS)预处理的正常小鼠B细胞和MIN-6细胞共培养为C组,以STZ诱导小鼠后的B细胞与MIN-6细胞共培养为D组,通过SYBRGreen染料实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、放射免疫法分别检测处理后的胰岛素mRNA及其蛋白表达情况,并通过ELISA检测胰岛素自身抗体水平以及转化生长因子β(TGF-β)水平。结果与A组相比,STZ诱导组小鼠体质量减少、血糖升高、血清中胰岛素含量降低、胰岛素自身抗体升高;通过免疫磁珠分选,以流式细胞仪检测的结果显示,CD19+B细胞所占比例达到98%;与A组及B相比,C组和D组中MIN-6细胞胰岛素mRNA水平以及共培养上清中胰岛素水平均降低,并且胰岛素自身抗体和TGF-β的表达均增加。结论 STZ诱导的自身免疫性糖尿病小鼠模型的B淋巴细胞可能通过增加胰岛素自身抗体的产生来抑制胰岛MIN-6细胞产生胰岛素。 秦嫚 徐琴 汪平 唐倩 孙静茹 魏薇 黄保军关键词:链脲佐菌素 B淋巴细胞 胰岛素 胰岛素自身抗体 过表达OPTN和TAU-P301-L基因腺相关病毒构建与鉴定 被引量:1 2020年 目的获得能够过表达OPTN和TAU-P301-L基因的重组腺相关病毒,检测其在体外对293T细胞的感染,并且为阿尔茨海默氏病(AD)研究提供新思路。方法从含有目的基因的大肠杆菌中提取包涵目的基因的质粒,利用PCR扩增获得目的基因,目的基因OPTN构建到pAAV-IRES-ZsGreen1载体,目的基因TAU-P301L-V5构建到pAAV-CMV-mkate-IRES载体。鉴定质粒阳性克隆并测序。重组质粒pAAV-IRES-ZsGreen1-AAV9-OPTN和pAAV-CMV-mkate-IRES-AAV9-TAU-P301L-V5分别与包装质粒pAAV-RC9、辅助质粒pHelper通过Lipofiter^(TM)2000共转染293T细胞,获得AAV9病毒。利用相同方法,不使用目的基因构建对应绿色和红色AAV9对照病毒。qPCR法测定重组腺相关病毒载体滴度,病毒载体感染293T细胞进行病毒有效性及安全性鉴定,Western blotting和RT-PCR进行蛋白表达的鉴定,MTT检测OPTN蛋白与TAU-P301-L蛋白对293T细胞活力的影响。结果测序结果显示成功构建pAAV-IRES-ZsGreen1-AAV9-OPTN和pAAV-CMV-mkate-IRES-AAV9-TAU-P301L-V5腺相关病毒载体,qPCR测得病毒滴度为1.0×10^(12) vg/ml,病毒载体感染293T细胞转染效率为33.6%和20.5%, Western blot和RT-PCR显示蛋白过量表达。MTT结果显示OPTN组挽救了TAU-P301-L组的细胞凋亡。结论成功构建过表达OPTN和TAU-P301-L基因的腺相关病毒。OPTN蛋白可以减弱TAU-P301-L蛋白的细胞毒性。 陈曦 王鹏 徐恰 刘会 郭若文 刘芸 许尹 秦宜德关键词:OPTN 腺相关病毒 青年教师提高医学免疫学教学能力的探讨 2015年 医学免疫学内容繁杂抽象,理论性强,而且随着细胞生物学和遗传学等学科的快速发展,医学免疫学知识更新日新月异。这些特点使得医学免疫学难学、难记,对教师的教学能力提出了很高的要求。刚刚从事医学免疫学教学的年轻老师要在教学基本功练习、教学方法技巧、实验课与理论课之间关系处理等方面做充足的准备,文章将从以上几个方面结合自身实践浅谈年轻教师提高医学免疫学教学能力的方法和途径。 胡汪来 李群关键词:医学免疫学 青年教师 教学能力 教学基本功 检测颅脑损伤合并肺部感染患者呼吸道病原体IgM抗体谱的临床价值 被引量:6 2017年 目的分析颅脑损伤并发肺部感染住院患者的11种呼吸道病原体Ig M抗体联合检测结果,为临床及时制定治疗方案和合理使用抗菌药物提供依据。方法应用间接免疫荧光法检测2014年12月至2015年12月安徽中医药大学第一附属医院神经外科151例颅脑损伤合并肺部感染患者血清中11种呼吸道病原体Ig M抗体谱,分析11种病原体感染分布情况及其在性别、年龄和季节方面流行病学特征,并对其中38例进行动态检测。结果 151例患者中有82例(54.30%)至少检出1种呼吸道病原体Ig M抗体,其中男性60例(55.56%),女性22例(51.16%),男女阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05);82例中34例感染1种,34例感染2种,14例感染3种及以上呼吸道病原体。感染阳性率前5位的呼吸道病原体依次是流感病毒B型、流感病毒A型、嗜肺军团菌、柯萨奇病毒A型、肺炎支原体,不受性别、年龄和季节的影响。动态检测的38例患者中,21例检测到病原体Ig M抗体,经过治疗后抗体滴度逐渐降低。结论对病原体Ig M抗体谱进行动态检测,有助于进一步明确诊断和疗效观察。 朱俊 陈影 邢昕 王久香 沙泉关键词:颅脑损伤 IG