四川大学华西基础医学与法医学院时间生物学卫生部重点实验室
- 作品数：8 被引量：5H指数：1
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- 衰老的研究发展
- 研究始于13世纪的衰老学说,随着生理病理、细胞分子等学科的发展,从二十世纪至今在学说衰老学说获得了多层面的发展.熵定律阐释了生命体在熵增的必然作用下,从有序向无序的渐变.由于衰老使得人容易患老年性疾病,而H.Botkin...
- 郭妍伶王正荣
- 关键词：衰老代谢基因突变生物钟
- LAMR1与PER1蛋白作用位点的筛选被引量：1
- 2013年
- 目的:筛选出与PER1蛋白相互作用的LAMR1的核心位点。方法:采用盒式定点突变法,对重组目的质粒pGADT7-Rec/Lamr1201-295的插入片段Lamr1201-295羧基末端的205-216氨基酸序列RDPEEIEKEEQA进行定点突变,并以hPER1蛋白的bHLH-PAS结构域为诱饵蛋白,通过酵母双杂交系统确定这4种不同的突变LAMR1201-295片段与hPER1的相互作用。结果:营养缺陷培养基筛选显示4种转化菌在二缺SD/-Leu/-Trp、三缺SD/-His/-Leu/-Trp和四缺SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp固体培养基上都可以生长;β-半乳糖苷酶印膜法检测结果显示4种转化菌均可显色。结论:突变片段LAMR1-RDP,LAMR1-EEI,LAMR1-EKE和LAMR1-EQA都能够与hPER1的bHLH-PAS结构域在酵母中发生相互作用。提示LAMR1的205-216Aa可能不是其与hPER1相互作用的核心氨基酸序列。
- 常莉李文辉汪宇辉刘延友江舟肖静郭慧玲王正荣
- 关键词：PER1相互作用酵母双杂交定点突变
- 非编码RNA调控精子发生的研究进展被引量：1
- 2017年
- 随着基因组学研究的发展,发现生物体基因组内存在大量不编码蛋白质的基因。这些基因的转录产物称为非编码RNA(Noncoding RNA,ncRNA)。以前认为ncRNA是基因组中无用的序列,但是研究表明ncRNA在很多生命活动中起到很重要的作用。按照转录产物的序列长短ncRNA分为短链非编码RNA(Small ncRNA)和长链非编码RNA(LncRNA)。精子发生包括精原细胞增殖,精母细胞减数分裂以及精子成熟等一系列受到精确调控的生理发育过程。精子发生需要相关基因的适时表达,并受到转录和转录后水平的调控。但是精子发生过程的调控机制目前还未完全研究清楚。最新研究发现在精子发生过程ncRNA起到很重要的作用,即使在成熟精子细胞中也有ncRNA的表达。表明ncRNA参与调控精子发生的过程,并且这些父源ncRNA可能在接下来的受精和胚胎发育中起到重要的调节作用。结合最新研究进展,本文综述了ncRNA在精子发生过程所起的作用,以期为精子发生过程中ncRNA的进一步研究提供参考。
- 李世平成姝婷王正荣
- 关键词：NCRNA精子发生MIRNAPIRNA
- 吗啡成瘾小鼠对正常小鼠学习记忆力能力的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:用BALB/C小鼠建立动物模型,观察吗啡成瘾戒断小鼠对其周围的正常小鼠学习记忆能力的影响。方法:将吗啡成瘾戒断小鼠与正常小鼠同笼饲养,然后用Morris水迷宫实验测定正常小鼠的学习记忆能力,应用RT-PCR的方法检测正常小鼠海马中PKCa、GABA分子表达的变化。结果:水迷宫实验证明,与生理盐水组相比,实验组小鼠的学习记忆能力明显降低(P<0.05),海马中PKCa和DABA的表达都明显升高(P<0.05)。
- 李云霞勾旬谢一舟汪宇辉刘延友王正荣
- 关键词：吗啡成瘾戒断水迷宫实验GABA
- SERPINA3K原核表达系统的构建及其表达被引量：1
- 2013年
- 目的:通过构建丝氨酸蛋白酶抑制因子SERPINA3K的原核表达载体,并将其转化到Rosetta-gami2感受态细胞中,表达重组SERPINA3K,从而为对其功能的深入研究奠定了基础。方法:以小鼠MS-1细胞cDNA为模板通过PCR的方法扩增Serpina3k基因的表达全片段,再将其插入到原核表达载体pET-41a中,酶切并测序鉴定重组体。将构建好的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta-gami2感受态细胞,表达产物用Western blot鉴定。结果:原核表达载体pET-41a-Serpina3k成功构建,可在大肠杆菌Rosetta-gami2中高效表达,得到重组蛋白SERPINA3K,经Western blot鉴定正确。结论:成功构建SERPINA3K原核表达载体且获得表达,为研究SERPINA3K生物学活性及产品开发提供了实验基础。
- 郭妍伶成姝婷李世平后望杨淑红江舟汪宇辉肖静郭慧玲刘延友王正荣
- 关键词：原核表达系统
- 抑制MS-1细胞Clock基因表达引起DNA甲基化水平降低
- 2017年
- 目的探讨Clock基因对MS-1细胞甲基化水平的影响及Clock基因参与调控细胞增殖的机制。方法采用siRNA干扰MS-1细胞Clock基因表达,检测细胞DNA甲基化水平变化,以及甲基化结合蛋白MECP2,影响细胞生长和增殖的Wnt/β-Catenin信号通路β-Catenin基因的表达情况。结果与对照组相比,抑制Clock基因表达后,MS-1细胞甲基化水平显著降低,且Mecp2和β-Catenin基因的表达均明显减少。抑制Clock基因组(CK)和阴性对照组(NC)甲基化DNA占总DNA比率分别为:(1.067±0.034)%和(1.983±0.154)%。Real-time PCR结果表明,CK组β-Catenin基因相对表达量为1.00000±0.09547,NC组为1.62584±0.17167;CK组Mecp2为0.98824±0.12243,NC组为1.80979±0.18520。Western blot结果显示,CK组β-CATENIN/β-TUBLLIN的相对IOD值为1.093368±0.214433,NC组为3.305374±0.260016;CK组MECP2/β-TUBLLIN的相对IOD值为0.289546±0.104738,NC组为0.649544±0.140909。结论 Clock基因能够影响细胞甲基化水平,并且可能通过调控甲基化结合蛋白MECP2表达和Wnt/β-Catenin信号通路影响细胞增殖。
- 李世平成姝婷王正荣刘延友汪宇辉江舟
- 关键词：DNA甲基化CLOCK基因MECP2WNT/Β-CATENIN信号通路
- Rack1对慢性吗啡成瘾小鼠海马BDNF表达和动物行为偏爱的影响
- 2010年
- 目的:通过干扰C激酶受体1蛋白(Rack1)的表达,探讨Rack1对慢性吗啡成瘾小鼠海马的作用。方法:建立慢性吗啡成瘾小鼠模型,并分析条件性位置偏爱(CPP)效应。应用RT-PCR检测慢性吗啡成瘾小鼠海马中Rack1和脑源性神经营养因子(BDNF)的mRNA表达水平以及免疫组化观察海马中BDNF蛋白的表达情况。结果:与生理盐水组相比,慢性吗啡成瘾组小鼠海马中Rack1和BDNF mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05),且吗啡诱导的CPP效应上升(P<0.05),与慢性吗啡成瘾组相比,Rack1干扰质粒组小鼠海马中Rack1和BDNF mRNA和蛋白表达水平均明显下降(P<0.05),吗啡诱导的CPP效应下调(P<0.05)。结论:在慢性吗啡成瘾小鼠海马中,Rack1是一个关键因子。
- 苏岚万莉红谢一舟汪宇辉刘延友王正荣
- 关键词：海马RACK1BDNF
- 低营养培养环境对NIH3T3细胞中节律基因的表达和节律诱导的影响
- 营养物质对于生物体健康的重要作用已被广泛的研究，并被证实其与近日节律有着密切的关系。为了研究营养缺乏的培养条件对体外培养的细胞的影响，我们使用稀释后的培养液对NIH3T3细胞连续培养5天，并每天检测这些细胞中Bmall和...
- 成姝婷王正荣
- 关键词：营养缺乏CLOCK基因
