吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室 作品数:74 被引量:80 H指数:5 相关作者: 钱晶 陈晓峰 刘楠楠 丁伟 更多>> 相关机构: 长春中医药大学临床医学院 吉林农业大学动物科学技术学院 吉林农业科技学院动物科技学院预防兽医学吉林省重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 吉林省科技发展计划基金 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
不同来源β-葡聚糖对旋毛虫感染C57BL/6J小鼠的影响 2022年 将48只雌性C57BL/6J小鼠随机分为4组:燕麦β-葡聚糖(oatβ-glucan,OBG)处理组、香菇多糖(lentinan,LNT)处理组、感染组和空白对照组,每组各12只。OBG处理组和LNT处理组分别连续14 d口服OBG和LNT后,经灌胃感染旋毛虫,再连续7 d口服OBG和LNT,感染组灌服等量旋毛虫,空白对照组不做任何处理。检测感染后第7天OBG处理组、LNT处理组和感染组小鼠成虫荷虫量及第35天肌幼虫荷虫量。取各组感染后第7天小鼠小肠组织,qPCR法检测肠道黏蛋白2(Muc2)基因表达量,免疫组化法检测Muc2蛋白表达量。结果显示,与感染组相比,OBG处理组和LNT处理组成虫及肌幼虫荷虫量极显著降低(P<0.001);OBG处理组和LNT处理组与感染组和空白对照组相比,Muc2基因表达量都极显著升高(P<0.001),但OBG处理组和LNT处理组之间并无显著性差异(P>0.05);免疫组化结果显示,与感染组和空白对照组相比,OBG处理组和LNT处理组Muc2蛋白表达量升高,但OBG处理组和LNT处理组之间并无显著性差异。结果表明,小鼠口服OBG和LNT均能显著增加MUC2蛋白表达水平,OBG和LNT对旋毛虫感染起到一定保护作用。 董子健 金雪敏 庞建达 唐斌 马晓晓 刘明远 杨丽 刘晓雷关键词:燕麦Β-葡聚糖 旋毛虫 MUC2 重组猪链球菌2型溶血素的表达及其溶血活性和致炎作用 2022年 PCR扩增溶血素(suilysin,SLY)基因,克隆后测序,利用原核表达载体pET-28a及表达宿主菌E.coli BL21(DE3)构建SLY原核表达系统,采用SDS-PAGE检测蛋白表达情况,借助Ni-NTA亲和层析法纯化蛋白,获得具有序列保守且可溶性的SLY蛋白。显微镜形态学观察显示,质量浓度为0.4 mg/L的SLY在37℃条件下作用2 h可使贴壁hCMEC/D3(人脑微血管内皮细胞)全部死亡。通过分光光度法测定SLY对人红细胞的溶血活性,结果显示1μg SLY可使2.25×10^(10)个人红细胞完全溶解。Real-time RT-PCR结果显示,SLY处理所致破碎的红细胞上清可使hCMEC/D3细胞炎性因子IL-6和IL-8转录水平分别升高80倍和100倍以上,且该作用效果显著高于超声破碎红细胞的方式。结果表明,SLY具有显著的细胞毒性,其导致红细胞溶血可能是猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)引起机体炎症反应的原动力。 王俊捷 王洋 柳增善关键词:猪链球菌2型 SLY IL-8 布鲁菌二联BCSP31-L7/L12-IL-2嵌合病毒样颗粒疫苗候选株的构建与鉴定 被引量:1 2023年 布鲁菌病的传统疫苗存在接种后干扰血清学诊断及可能出现毒力返强等缺点,严重干扰疫病监测,影响疫病净化。因此,本研究基于新城疫病毒样颗粒(ND virus like particles,ND VLPs)载体平台,利用昆虫杆状病毒表达系统和GPI锚定策略,以免疫增强因子IL-2、高保守性的保护性抗原蛋白L7/L12(来源猪种S2株)和羊种BCSP31蛋白(来源羊种M5株)为靶点,构建绿色、安全的布鲁菌二联嵌合型病毒样颗粒新型疫苗候选株(BCSP31-L7/L12-IL-2 cVLPs)。PCR及免疫荧光结果表明成功构建了表达IL-2和L7/L12蛋白的重组杆状病毒,Western blot结果显示该cVLPs各组分蛋白正确表达,透射电镜观察可见表面展示纤突结构、大小约为100 nm的粒子,表明布鲁菌二联嵌合型病毒样颗粒BCSP31-L7/L12-IL-2 cVLPs构建成功。 邹映雪 黄天鸿 冯嘉轩 丁佳欣 陈铭桦 陈凯楠 郭春红 张頔 丁壮关键词:布鲁菌 犬瘟热病毒跨物种传播的研究进展 被引量:1 2023年 犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)是具有高度传染性的病原。最初被描述为感染家犬的病原,现已被认为是一种可感染多种食肉动物的病毒,可导致被感染宿主发病,甚至大量死亡,并且容易在易感宿主之间跨种属传播。已有的研究表明,CDV暴发对野生生物种群的影响越来越大,并已经威胁到某些濒危野生物种的生存。另有研究表明,CDV甚至有成为人畜共患病原的可能。本研究拟对CDV在易感宿主范围扩大、自身基因突变和进入新宿主动态途径等方面展开综述,旨在为研究CDV跨物种传播的研究提供参考。 张乐 于小航 苏宁 赵丽丽 关振宏 段铭关键词:犬瘟热病毒 宿主 人畜共患 传染性法氏囊病毒VP2蛋白嵌合新城疫病毒样颗粒的构建和鉴定 2022年 将传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus, IBDV)强毒株的保护性蛋白VP2替换新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)蛋白胞外域部分,利用杆状病毒表达系统,构建了含有IBDV候选抗原表位VP2蛋白的重组杆状病毒rBV-VP2,并通过间接免疫荧光试验鉴定杆状病毒蛋白表达正确。rBV-VP2与NDV-HN、NDV-F、NDV-M组装成病毒样颗粒(cVLPs),形成含有IBDV候选抗原表位的IBD-ND二联病毒样颗粒(IBD-ND cVLPs),利用Western blot鉴定cVLPs各组分蛋白,证明IBD-ND cVLPs各组分组装正确。IBD-ND cVLPs的构建可为我国养禽业提供一种绿色、安全且可一针多防的IBD-ND二联病毒样颗粒疫苗候选株。 邵亚男 冯嘉轩 李金斗 郭春红 丁佳欣 陈铭桦 丁伟 单春晖 张頔 丁壮关键词:新城疫病毒 传染性法氏囊病毒 VP2蛋白 病毒样颗粒 羊传染性脓疱病毒ORF120蛋白以剂量依赖性方式抑制宿主细胞非POU结构域八聚体结合蛋白(NONO)的表达 2023年 羊传染性脓疱病毒(ORFV)是重要的人兽共患病病原,能够通过劫持宿主蛋白等多种策略逃避机体的抗病毒免疫反应,导致重复感染的发生。非POU结构域八聚体结合蛋白(NONO)是一种多功能核蛋白,参与mRNA剪切、DNA损伤修复、肿瘤发生以及炎症反应等多种生物学过程。本研究首先利用酵母双杂交、免疫共沉淀(Co-IP)等技术证实ORF120蛋白与宿主蛋白NONO存在相互作用。借助于激光共聚焦显微镜观察病毒ORF120蛋白和宿主NONO蛋白的定位分布,发现ORF120蛋白与NONO蛋白在细胞核内存在共定位,进一步证实ORF120蛋白和NONO蛋白存在互作。此外,利用Western blot方法证实ORF120蛋白和NONO蛋白之间存在相互抑制作用,且呈剂量依赖性。上述结果表明,ORF120蛋白与宿主NONO蛋白存在剂量依赖性的相互抑制作用,该结果将为更好地理解ORFV免疫逃逸分子机制及开发新的抗病毒手段提供重要依据。 于昭辉 周艳龙 吕丽君 刘兴源 徐梦实 方梓煜 李卓梅 关继羽 高丰 赵魁关键词:羊传染性脓疱病毒 基因Ⅱ、Ⅶ型二价新城疫病毒样颗粒的制备和鉴定 被引量:6 2018年 将基因Ⅶ型新城疫NA-1株F、HN基因的胞外域与基因Ⅱ型新城疫Lasota株F、HN基因的胞内域及跨膜域进行融合,并命名为rNA-1 F/HN。利用昆虫杆状病毒表达系统构建含有新城疫LaSota株M、F、HN等3个结构基因及rNA-1F、rNA-1 HN基因的重组杆状病毒rBV-LaSota M、rBV-LaSota F、rBV-rNA-1 F、rBV-LaSota HN、rBV-rNA-1 HN。将几种重组杆状病毒共感染Sf9细胞96h后收取上清,经超速离心及蔗糖密度离心纯化病毒样粒子(virus-like particles,VLPs),并利用Western blot方法和透射电子显微镜技术检测,结果显示目的蛋白均正确表达且组装成与野生型NDV形态大小相似的VLPs。结果表明:成功制备了新城疫标准疫苗株(LaSota株)及流行强毒株(NA-1株)二价NDV VLPs,为当前新城疫的防控提供新策略。 丁佳欣 李金斗 刘亚林 张国军 姜翠翠 徐小洪 钱晶 于喜冰 吴金 尹仁福 丁壮关键词:昆虫杆状病毒表达系统 鸡毒支原体TM-1蛋白嵌合新城疫病毒样颗粒的构建及鉴定 被引量:1 2021年 鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)感染引起的禽类的慢性呼吸道病(chronicrespiratory disease,CRD)与新城疫(Newcastle disease,ND)是严重危害禽类的两种重要疾病,可呈并发或继发感染,给养禽业造成巨大的经济损失。因此,研制安全有效、免疫程序简便的ND-CRD二联疫苗显得极为重要。本研究将MG国际参考株MG R(low)株的保护性蛋白TM-1采取以替换新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)NDV-HN胞外域的方式与我国NDV流行株(基因Ⅶ型)的HN、F蛋白共同嵌合至病毒样颗粒(VLPs)表面,使其表面展示3种结构蛋白MG-TM-1、NDV-HN和NDV-F。经鉴定,间接免疫荧光显示该cVLPs各组分蛋白均正确表达;Western blot结果显示,该cVLPs可与NDV M、NDV F、NDV HN、MG TM-1的特异性阳性血清发生反应;透射电镜观察可见大小约为100nm的粒子,表面展示纤突结构,呈现典型的病毒形态,与野生型NDV形态相似,最终成功构建嵌合型病毒样颗粒MG-ND cVLPs。本试验成功制备的MG-ND cVLPs为研制新型ND与CRD二联疫苗提供候选疫苗,并为当前NDV与MG共感染的防控提供新策略。 辛梅 张頔 李金斗 丁佳欣 于喜冰 徐小洪 丁伟 邵亚男 单春辉 丁壮关键词:新城疫病毒 鸡毒支原体 病毒样颗粒 基于Fh010935蛋白的绵羊肝片吸虫感染间接ELISA检测方法的建立及初步应用 2022年 目的 利用肝片吸虫重组蛋白Fh010935建立绵羊肝片吸虫感染间接ELISA检测方法。方法 通过对抗原包被量、血清稀释度、血清孵育时间、封闭剂种类、二抗稀释倍数及孵育时间、TMB底物溶液反应时间等条件进行优化,建立间接ELISA检测方法,评价其敏感性、特异性和重复性,并对吉林和内蒙古地区临床血清样品进行检测。结果 ELISA优化试验确定的抗原最佳包被浓度为0.25μg/孔,血清稀释度为1∶400,血清孵育时间为90 min,封闭剂为1%BSA,二抗稀释倍数为1∶5000,二抗孵育时间为75 min,TMB底物溶液反应时间为15 min。优化各反应条件后建立的ELISA检测方法敏感性达到1∶800,与羊捻转血矛线虫、双腔吸虫、新孢子虫阳性血清无免疫交叉反应,批内批间变异系数均<6%。对吉林省某地区临床血清样品和粪便样品各36份进行ELISA和病原学检测,两种方法一致性为96%。对内蒙古地区90份临床血清样品进行检测,阳性率为18.9%。结论 以肝片吸虫重组蛋白Fh010935为包被抗原建立的检测绵羊肝片吸虫感染的间接ELISA方法具有较好的敏感性、特异性和重复性,可用于绵羊肝片吸虫病的快速检测及流行病学调查。 段佳慧 张楠 刘少雄 李建华 宫鹏涛 王晓岑 李新 于磊 张西臣 唐博关键词:肝片吸虫 间接ELISA 兽医公共卫生发展趋势及专业教育 被引量:8 2017年 兽医公共卫生(veterinary public health,VPH)是社会文明发展到一定阶段的产物,它是利用一切有关人类和动物健康的知识、活动及物质资源,来保障社会公共卫生与人类健康的一门综合性应用学科。兽医公共卫生是国家公共卫生体系的重要组成部分,是兽医学科与医学、食品科学、环境科学、公共卫生等学科交叉后的新兴学科,是社会发展和公共卫生需求牵引兽医学的扩展, 柳增善 胡盼 马春峰 卢士英 任洪林 李岩松关键词:兽医公共卫生 专业教育