湖南农业大学园艺园林学院国家柑橘改良中心长沙分中心
- 作品数：24 被引量：93H指数：6
- 相关作者：刘利平葛红娟周芳芳李文娟更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 冰糖橙与枸橼C-05对溃疡病菌生长特性的影响被引量：5
- 2015年
- 【目的】采用新的接种方式,比较冰糖橙与枸橼C-05叶片对溃疡病菌生长特性的的影响,探讨冰糖橙与枸橼C-05对溃疡病菌敏感度的差异性。【方法】将完全展开、颜色淡绿的冰糖橙与枸橼C-05叶片进行75%酒精和1%Na Cl O消毒并切割后,分别与溃疡病菌在离体条件下共培养,观察叶片在MT培养基(对照)、MT中间嵌入NYGA培养基(MA)中对溃疡病菌生长的影响;分别提取冰糖橙和枸橼C-05叶片的粗提液,并以25%、50%和75%的比例添加至MT培养基中,观察冰糖橙和枸橼C-05叶片提取液分别对溃疡病菌生长的影响;同时以不同比例的叶片粗提液添加至NYGB培养基中,观察冰糖橙与枸橼C-05叶片提取液分别对溃疡病菌胞外多糖含量的影响。【结果】Xac在培养冰糖橙叶片的MT培养基中生长迅速,接种1周后即出现Xac的增殖现象,菌斑直径均值比对照大0.5 mm;接种2周后菌斑直径均值为5.27 mm,几乎是对照的3倍;而2—3周为Xac的急速生长期,菌斑直径由5.27 mm快速增长至13.41 mm,是对照菌斑直径的5倍多;3周后菌斑生长缓慢趋于平稳;各个时间点的菌斑直径与对照相比均达到极显著差异水平。在培养冰糖橙叶片的MA培养基中,Xac生长1 d后菌斑直径均值为4.58 mm,小于对照的6.19 mm;接种3 d后Xac继续生长,菌斑直径几乎与对照组相同,差异不显著;但是在接种5 d后,菌斑直径快速增长至21.31 mm,大于对照组的16.33 mm,3个菌斑长势连在一起,两者差异达到极显著水平。冰糖橙的叶片提取液对溃疡病菌的生长及胞外多糖含量均有促进作用,随着其添加浓度的增加,促进效果越明显,与对照相比均可达到极显著水平。Xac在培养枸橼C-05叶片的MT培养基中生长较为缓慢,在接种1周后菌斑直径与对照相比差异不显著;2周后菌斑直径约为对照的一半;3周时,菌斑直径均值为2.06 mm,小于对照的2.62mm;2周和3周时的菌斑直径与对照相比均达到显著�
- 葛红娟龙桂友戴素明李大志李娜邓子牛
- 关键词：冰糖橙溃疡病菌胞外多糖
- 利用qPCR技术检测柑橘溃疡病菌的灵敏度分析
- 2015年
- 以常规PCR为对照,分析了实时荧光定量PCR（q PCR）检测柑橘溃疡病菌DNA和柑橘溃疡病菌菌量的灵敏度,并对接种柑橘溃疡病菌后的冰糖橙样品进行了动态监测。结果显示,q PCR检测柑橘溃疡病菌DNA和柑橘溃疡病菌菌量的灵敏度比常规PCR高1～3个数量级,且常规PCR对柑橘溃疡病菌DNA的检测会受到寄主植物DNA的干扰,q PCR不受寄主植物DNA影响;对接种后冰糖橙样品的分析,q PCR即时就能检测到柑橘溃疡病菌,并能实时观察到柑橘溃疡病菌在寄主叶片的增殖情况,而常规PCR要接种后2 d才能检测到柑橘溃疡病菌。
- 李文娟肖翠戴素明李大志邓子牛
- 关键词：实时荧光定量PCR柑橘溃疡病菌
- 抗pthA核定位信号肽单克隆抗体单链抗体基因的克隆及原核表达
- 从分泌抗pthA核定位信号肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株3D10H2中提取总RNA，采用RT-PCR，逆转录合成单链cDNA作为模板，用小鼠重链可变区和轻链可变区通用引物，克隆抗体可变区基因。在重链可变区和轻链可变区基因上加...
- 胡春华马先锋邓子牛
- 关键词：柑橘溃疡病单链抗体原核表达
- 文献传递
- 柑橘衰退病毒基因p23 RNAi载体的构建及转化被引量：1
- 2016年
- 【目的】构建柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)含p23的RNAi载体,以获得具有抗性的柑橘转基因植株。【方法】基于转化病毒基因介导抗性,根据NCBI公布的CTV基因组序列,查找p23保守序列,设计并克隆两条不同长度的片段。对两条片段和植物表达载体p BI 121进行双酶切和连接来构建RNAi载体。初步预测所构建的载体发生RNAi抗病毒的可行性。利用农杆菌介导的瞬时表达技术将含RNAi载体的农杆菌注射入CTV指示植物墨西哥莱蒙的叶片,利用GUS组织化学染色法观察叶片中载体发生瞬时表达的情况。发生瞬时表达的叶片接种CTV T36基因型,利用酶联免疫反应(ELISA)检测病毒含量。同时,提取叶片的RNA并反转录为c DNA,利用实时荧光定量PCR(q-PCR)检测CTV p20,通过该基因的表达量反映叶片中的病毒含量。通过农杆菌介导的遗传转化将RNAi载体转入大红甜橙实生苗上胚轴节间茎段,抗生素筛选得到的芽嫁接至枳橙实生试管苗。提取大红甜橙叶片的DNA,通过PCR扩增确定其是否为转基因阳性;目的基因检测为阳性的植株二次嫁接至温室保存的酸橙实生苗;根据插入的p23基因序列设计q-PCR引物,检测转基因植株中p23的表达情况。取CTV T36基因型寄主的带皮芽,用腹接法接种大红甜橙转基因植株。取接种后新萌发枝梢上的叶片,用检测瞬时表达叶片同样的方法分析植株的抗病性。对于第1次接种后未检测出病毒感染的植株,进行第2次接种并检测分析。【结果】克隆得到CTV p23 513 bp的长片段和291 bp的短片段,与载体p BI121连接后成功构建含发夹结构的来自病原且能靶向目的基因的RNAi载体,命名为p23-RNAi。注射p23-RNAi的墨西哥莱蒙叶片经GUS染色后能够产生蓝色斑点,表明农杆菌p23-RNAi可以在叶片中发生瞬时表达;接种CTV后第15和30天,瞬时表达p23-RNAi的墨西哥莱蒙叶片ELISA检测结果均为阴性,同时q-PCR检测
- 李芳邓子牛赵亚李大志戴素明
- 关键词：柑橘衰退病毒RNAI
- 柑橘栽培管理知识与技术(2) 建园与幼树管理被引量：1
- 2015年
- （续第1期第36页）一、建园规划1.选址选择适宜的地形、地貌和海拔高度,尽量避免不利气候的影响。山地北面和山谷,光照不足,影响产量和品质,并且易发生病虫害;同时,北坡冬季易受低温冻害。靠近大型水体（如水库、江河）的地方,冬暖夏凉,全年空气湿润,有利于柑橘的生长。柑橘对土壤的适应性较强,但最适宜柑橘生长的是壤土和沙壤土,黏性强和多沙土壤需要改良后才可种植。土壤酸碱度对柑橘的影响很大,现在使用较多的砧木是枳,其适宜的土壤p H值5.5~6.5。
- 邓子牛
- 关键词：幼树管理建园土壤酸碱度光照不足低温冻害沙壤土
- 柑橘栽培管理知识与技术(4) 柑橘的修剪及花果管理被引量：1
- 2015年
- （续第3期第3 2页）
一、柑橘修剪
1.原则以改善果园和树体通光为核心,调节生产与结果的关系,确保病虫防治的效果,稳产提质。
- 邓子牛
- 关键词：管理知识柑橘花果管理栽培病虫防治树体
- 干旱胁迫对枳的氮含量及氮代谢相关基因表达的影响被引量：4
- 2018年
- 以枳为试验材料,进行干旱胁迫处理(对照组的基质相对持水量维持在55%~65%),分别在处理后第7、17、27、37天采样,研究干旱胁迫对枳侧根、主根、茎、叶片中全氮含量的影响以及氮代谢途径中NRT、NR、NiR、GS、GOGAT、GDH等16个相关基因在侧根和叶片中的表达。结果表明:随着干旱时间的延长,枳的侧根、主根、茎、叶中全氮含量与对照相比均显著下降,其中侧根全氮含量下降最为显著;枳叶片中与氮代谢相关的16个基因均能被干旱胁迫诱导而上调表达,且多数基因在干旱第27天上调至最高水平,而后随着叶片的萎蔫而下调;枳侧根中有8个基因(NRT1.2、NRT1.7、GS2、NADH–GOGAT2、NADP–GDH、GDH1、GDH2、GDH3)在干旱处理后27天呈现不同程度的上调表达,有4个基因(NRT1.1、NRT1.5、GS1、NADH–GOGAT3)的表达基本不受干旱胁迫的影响,还有4个基因(NR、NiR、Fd–GOGAT、NADH–GOGAT1)的表达显著下调。
- 曹雄军卢晓鹏熊江谢深喜
- 关键词：干旱胁迫氮代谢基因表达
- 糖橙新品种‘橘湘元’的选育被引量：8
- 2019年
- '橘湘元’是从埃及糖橙芽变中选育的无核糖橙新品种。果实圆球形,果形指数为0.95。平均单果质量173 g,大小较均匀,果面较光滑,有光泽,果肉橙黄色,平均每果实含0.4粒种子。可食率达77.09%,果实出汁率54.6%,可溶性固形物13.63%,可滴定酸0.14%,维生素C含量60.57 mg·100 mL^(-1)。‘橘湘元’在树形树势、叶片大小、花瓣宽度等方面与埃及糖橙均存在明显差异。果实生育期260 d,在湖南省永兴县11月中下旬成熟。SSR结果分析表明‘橘湘元’在300 bp处较‘埃及糖橙’多1条带,具有遗传特异性。‘橘湘元’可在山地和旱地种植,表现生长快,抗性较强。
- 龙桂友黄洪张凤Alessandra Gentile邓子牛李娜
- 关键词：柑橘芽变无核
- 柑橘溃疡病致病基因pthA核定位信号序列(NLS)的原核表达及抗血清制备
- 采用PCR法扩增出pthA基C末端包含3个核定位信号的序列,并将其克隆到原核表达载体PET32a(+)上,经双酶切及核酸序州测定鉴定为阳性克隆(PET-NLS),其序列与登陆到Genbank上的pthA序列有99.9％的...
- 胡春华徐磊马先锋刘昆玉龙柱友邓子牛
- 关键词：柑橘溃疡病原核表达
- 文献传递
- 特早熟柑橘新品种‘橘湘早’被引量：2
- 2020年
- 特早熟柑橘新品种‘橘湘早’由‘大分早生’温州蜜柑中发现的特早熟芽变选育而成。树势强。果实扁圆,果形指数0.78~0.80,平均单果质量115 g;完熟后果皮橙色,光滑,果肉味浓、化渣,含可溶性固形物12.2%,可滴定酸0.55%,维生素C 385 mg·L^-1。9月上中旬成熟,采收期长,丰产稳产,平均产量65280 kg·hm^-2。
- 李娜邓子牛李大志张勇李树举彭际淼龙桂友
- 关键词：柑橘
