湖南中医药大学针灸推拿学院针灸生物信息分析重点实验室
- 作品数：5 被引量：82H指数：5
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省教育厅优秀青年基金湖南省高校创新平台开放基金更多>>
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- 成年SD大鼠胃窦Cajal间质细胞分离、培养及鉴定被引量：5
- 2017年
- 目的探讨成年SD大鼠胃窦起搏细胞Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)的原代分离、培养及鉴定方法,为深入研究其生理功能提供条件。方法 8~9周龄SD成年大鼠,禁食24 h,乙醚吸入麻醉,颈椎脱臼处死。无菌条件下采用精细解剖方法快速取出胃窦平滑肌组织,将其剪成1~2 mm^3小块后,使用Ⅱ型胶原酶消化法于37℃培养箱内消化60 min,离心后过200目筛,接种于DMEM/F12完全培养基(含5 ng/mL干细胞因子)中进行培养。用酪氨酸蛋白激酶受体ckit特异性抗体免疫荧光染色鉴定细胞类型。结果培养72 h后,于倒置显微镜下观察,可见细胞贴壁,呈不规则三角形、星形或梭形,有多个突起;随着培养时间的延长,各突起彼此相互连接形成网络;此原代培养细胞c-kit抗体免疫荧光染色呈阳性。结论成功建立了一套由成年SD大鼠胃窦组织采用Ⅱ型胶原酶消化法原代培养ICC的方法,为ICC的生理功能、病理改变以及胃肠道生理与病理关系的研究奠定了基础。
- 张程程彭艳陈海交杨建文刘薇薇刘丽
- 关键词：胃窦CAJAL间质细胞细胞培养技术
- 电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦促生长素mRNA、生长激素促分泌素受体mRNA表达的影响被引量：34
- 2015年
- 目的:观察电针"足三里"等穴对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃肠运动和促生长素(ghrelin)mRNA、生长激素促分泌素受体(GHSR)mRNA表达的影响,探讨电针治疗DGP的可能机制。方法:60只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、电针穴位组、电针非穴组、胃复安对照组,每组12只。采用单次腹腔注射2%链脲佐菌素配合高糖高脂饮食建立DGP大鼠模型。电针穴位组取大鼠"足三里""梁门""三阴交"穴;电针非穴组取"足三里""梁门""三阴交"穴位对照点;胃复安对照组予胃复安药液(1 mL/100g)灌胃。用血糖仪测血糖,尿糖试纸测尿糖。治疗结束后以酚红为标记物,观察大鼠胃排空率及小肠推进率;实时荧光定量多聚核苷酸链式反应法检测大鼠胃窦部ghrelin mRNA、GHSR mRNA的表达。结果:与空白对照组比较,模型组胃排空率及小肠推进率明显降低,ghrelin mRNA、GHSR mRNA表达降低(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,电针穴位组胃排空率及小肠推进率明显升高,ghrelin mRNA、GHSR mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。与电针非穴位组比较,电针穴位组胃排空率及小肠推进率明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:电针可促进DGP大鼠胃肠运动,其作用机制可能与上调ghrelin mRNA、GHSR mRNA在胃窦部的表达相关。
- 林亚平万全荃彭艳贺凤娥沈菁
- 关键词：糖尿病胃轻瘫小肠推进率促生长素生长激素促分泌素受体胃窦
- 电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦组织胰岛素生长因子1及其受体的影响被引量：15
- 2017年
- 目的:观察电针"足三里""梁门""三阴交"对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃肠动力、胃窦胰岛素样生长因子1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)表达的影响,探讨电针治疗DGP的可能机制。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、电针腧穴组、电针非穴组、胃复安对照组,每组10只。采用腹腔注射2%链脲佐菌素(55mg/kg)结合高脂高糖不规律饮食制备DGP模型。电针腧穴组取单侧"足三里""梁门""三阴交"电针治疗,电针非穴组取同侧三穴对照点电针治疗,胃复安对照组予1.7%胃复安药液(1mL/100g)灌胃,均每天1次,连续干预15d。观察各组大鼠症状积分、血糖、胃排空率、小肠推进率,ELISA法检测胃窦组织IGF-1及IGF-1R的含量。结果:与空白对照组比较,模型对照组胃排空率及小肠推进率明显降低,血糖、症状积分、胃窦组织IGF-1及IGF-1R含量明显升高(P<0.01)。与模型对照组比较,电针腧穴组、胃复安对照组胃排空率及小肠推进率明显升高(P<0.05,P<0.01),电针腧穴组血糖、症状积分、胃窦组织IGF-1及IGF-1R含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。与电针腧穴组比较,电针非穴组及胃复安对照组症状积分、胃窦组织IGF-1及IGF-1R含量均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:电针腧穴能降低DGP大鼠血糖水平,促进胃肠动力,其作用机制可能与降低胃窦组织IGF-1及IGF-1R含量有关。
- 杨建文彭艳陈海交张程程刘薇薇刘丽刘密林亚平
- 关键词：糖尿病胃轻瘫胃动力胰岛素样生长因子1胰岛素样生长因子1受体胃窦
- 电针对糖尿病胃轻瘫模型大鼠胃肠激素的影响被引量：21
- 2015年
- 目的观察电针对糖尿病胃轻瘫(DGP)模型大鼠胃肠激素的影响,探讨电针治疗DGP可能的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为5组:空白对照组,DGP模型组,电针穴位组,电针非穴组,胃复安对照组,每组12只。采用腹腔一次性注射2%链脲佐菌素(STZ)配合高糖高脂饲料不规则饮食制备DGP大鼠模型,连续8周;用One Touch血糖仪测血糖,尿糖试纸测尿糖,实验结束后观测大鼠胃排空率、肠移行率,ELISA法检测大鼠血清生长激素(GH)水平和胃窦组织促生长素(Ghrelin)含量。结果与空白对照组比较,DGP模型组大鼠血糖及尿糖值均明显升高(P<0.01),胃排空率、肠移行率、血清GH水平及胃窦Ghrelin含量均明显下降(P<0.01或P<0.05);与DGP模型组比较,电针穴位组大鼠血糖及尿糖值均明显降低(P<0.05),胃排空率、肠移行率、血清GH水平及胃窦Ghrelin含量均明显升高(P<0.01或P<0.05)。结论电针能调节血糖水平,促进胃肠排空,改善DGP症状,其作用机制可能与电针上调血清GH水平和胃窦组织Ghrelin含量有关。
- 林亚平贺凤娥彭艳万全荃沈菁
- 关键词：糖尿病胃轻瘫电针疗法促生长素生长激素胃排空
- 电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦Cajal间质细胞超微结构及干细胞因子-kit信号途径的影响被引量：34
- 2017年
- 目的:观察电针对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃肠运动及其胃窦起搏细胞Cajal间质细胞(ICC)超微结构、c-kit受体蛋白表达及干细胞因子(SCF)基因表达的影响,探讨电针治疗DGP的机制。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、电针穴位组、电针非穴组、胃复安对照组,每组10只。腹腔注射2%链脲佐菌素结合高糖高脂饲料不规则喂养制备DGP模型。电针穴位组电针"足三里""梁门""三阴交",电针非穴组电针"足三里""梁门""三阴交"穴位对照点,胃复安对照组予1.7%胃复安药液(1mL/100g)灌胃,均每日1次,连续15d。监测血糖,酚红灌胃法测量大鼠胃排空率及小肠推进率,透射电镜法检测胃窦ICC超微结构,Western blot法、RT-PCR法分别检测大鼠胃窦c-kit蛋白及SCF mRNA表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠血糖显著升高(P<0.01),胃排空率和小肠推进率显著降低(P<0.01),ICC呈细胞凋亡样改变,SCF mRNA表达量显著下降(P<0.01);与模型组比较,电针穴位组大鼠血糖明显降低(P<0.05),胃排空率及小肠推进率显著升高(P<0.05,P<0.01),ICC数目增加,受损超微结构得到修复,SCF mRNA表达量显著升高(P<0.01);与电针非穴组比较,电针穴位组ICC受损超微结构有所恢复,SCF mRNA表达量明显升高(P<0.05)。各造模组间比较,c-kit蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针"足三里"等穴可调控DGP大鼠血糖,促进胃肠排空,其作用机制可能与上调SCF mRNA,修复受损ICC超微结构,恢复其起搏功能,进而改善胃肠运动障碍有关。
- 张程程林亚平彭艳岳增辉陈海交杨建文刘薇薇刘丽
- 关键词：糖尿病胃轻瘫CAJAL间质细胞
