宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室
- 作品数：344 被引量：966H指数：12
- 相关作者：何芳张艳卢金霞周萍郭邦成更多>>
- 相关机构：宁夏医科大学总医院浙江理工大学生命科学学院中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 发菜GPR基因(proA)克隆及其干旱胁迫下的差异表达被引量：1
- 2019年
- proA编码的γ-谷氨酰磷酸还原酶(GPR)是脯氨酸合成途径的关键酶。该研究通过设计特异性引物克隆获得全长1 308 bp的发菜proA基因(GenBank登录号为KX553954)。与点形念珠藻的proA基因及其推译的氨基酸序列相似性分别为91%和93%;氨基酸序列中第123位的Leu疏水性最强,第80位的Lys亲水性最强;Thr、Ser和Tyr分别有19、12、4个磷酸化位点;proA编码的蛋白为膜外蛋白,其二级结构由α螺旋、β折叠、无规卷曲和β转角构成。将proA基因在大肠杆菌表达,获得一个47.22 kD的外源蛋白,MALDI-TOF-TOF/MS分析证明该外源蛋白为γ-谷氨酰磷酸还原酶。随着干旱胁迫程度的增加,发菜proA在转录水平的差异表达及脯氨酸含量均呈现增加的趋势。研究结果对深入研究发菜proA的分子功能及阐明其在干旱胁迫下的调控机制具有重要意义。
- 丁苗苗刘阳李晓旭王猛田姣王玲霞徐婷婷纳小凡梁文裕
- 关键词：干旱胁迫发菜
- 环磷酸腺苷参与哺乳动物卵泡发育的研究进展被引量：2
- 2021年
- 环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)是哺乳动物体内重要且保守的第二信使之一,可通过转导细胞外信号参与调节多种器官和组织的发育及生理功能。已有研究显示,雌性哺乳动物卵母细胞减数分裂进程与cAMP的水平变化密切相关且受到严格调控。卵母细胞中cAMP主要由腺苷酸环化酶3 (adenylyl cyclase 3, AC3)合成,其降解则受磷酸二酯酶3A (phosphodiesterase 3A, PDE3A)调控,这两者共同协调卵母细胞cAMP水平,从而使其在雌性卵巢的卵泡发育和卵子发生过程中发挥关键性作用。研究证明,处于生长卵泡中的卵母细胞胞质内高水平的cAMP可维持卵母细胞第一次减数分裂长期处于阻滞状态,只有当cAMP的合成被下调或其被PDE3A降解时,卵母细胞才能恢复减数分裂并成熟。而新近的研究显示,cAMP在卵子发生的其他阶段也发挥着重要的生理功能。为了能更全面地了解cAMP参与哺乳动物配子发生的调节作用及机制,本文综述了近年来国内外cAMP调节哺乳动物卵泡发育的相关研究成果,以期为深入理解cAMP与生殖细胞发生、发育的关系提供参考。
- 郑文影王超
- 关键词：环磷酸腺苷卵母细胞颗粒细胞
- PERK/ATF4/CHOP通路对BCG诱导THP-1细胞NLRP3炎性小体活化的调控作用被引量：1
- 2022年
- 旨在探讨牛分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1细胞后PERK/ATF4/CHOP通路对NLRP3炎性小体的调控作用。在BCG单独感染或与PERK小干扰RNA共处理THP-1细胞后,采用qRT-PCR和Western blot方法检测NLRP3炎性小体相关分子和PERK/ATF4/CHOP通路标志性分子在mRNA、蛋白水平的表达;在BCG单独感染或与PERK抑制剂GSK2656157共处理THP-1细胞后,分别采用qRT-PCR和Western blot方法检测NLRP3炎性小体相关分子和PERK/ATF4/CHOP通路标志性分子在mRNA、蛋白水平的表达,采用ELISA方法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)的释放量,采用CCK-8方法检测THP-1细胞活率,采用免疫荧光检测NLRP3与ASC的共定位。结果表明:在BCG单独感染THP-1细胞不同时间后,PERK、NLRP3、ASC和Caspase-1在蛋白水平的表达均随感染时间延长而升高,且在24 h达到最高(P<0.001),IL-1β和IL-18的释放随时间递增,24 h达到最高(P<0.001)。在BCG单独感染或与PERK小干扰RNA共处理THP-1细胞24 h后,与未感染对照组相比,siNC+BCG感染组NLRP3、ASC、Caspase-1、PERK、ATF4、CHOP分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著(P<0.001)上调,而siPERK+BCG感染组与siNC+BCG感染组相比,NLRP3等关键分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著下调(P<0.01,P<0.001);在BCG单独感染或与GSK2656157共同作用THP-1细胞24 h后,与未感染对照组相比,BCG感染组NLRP3、ASC、Caspase-1、PERK、ATF4、CHOP分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上调,IL-1β和IL-18的释放极显著增加(P<0.001),细胞活率极显著下调(P<0.001),而BCG+GSK2656157感染组与BCG单独感染组相比,上述分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著下调(P<0.01),IL-1β和IL-18的释放显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)减少,细胞活率显著上调(P<0.05),免疫荧光的结果显示NLRP3与ASC存在共定位,且GSK2656157可以极显著抑制
- 马伯利聂雪伊刘悦阳苗申奥陈通杨易徐金瑞
- 关键词：卡介苗THP-1细胞
- 4种检测超广谱β-内酰胺酶方法的比较被引量：4
- 2009年
- 以头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松和氨曲南为指示底物,用双纸片协同实验、纸片表型确证实验、三维实验和E-test法4种方法检测45株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性和59株产ESBLs阴性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌.结果发现,4种方法的敏感性依次为95.56%,97.78%,93.33%,97.78%,特异性依次为96.61%,100.00%,98.31%,100.00%;头孢噻肟为宁夏地区用于检测ESBLs的最适指示底物;纸片表型确证实验和E-test法是4种检测方法中用于检测产ESBLs较可靠的方法,用三维实验检测产ESBLs菌株适合标本量较少的小型医院,双纸片协同实验和纸片表型确证实验在所有医院都适用.
- 杜军李敏崔景荣朱永红王玉炯
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶大肠埃希菌肺炎克雷伯菌
- 组蛋白去乙酰化酶1/2参与调控小鼠卵子发生的研究进展被引量：2
- 2021年
- 卵子发生是雌性哺乳动物的基本生殖过程,是后续受精及胚胎发育的基础。近年来研究表明,表观修饰在调控哺乳动物生殖过程(如卵子发生、精子发生、植入前胚胎发育及性别分化等)中扮演着重要的角色。以组蛋白乙酰化为例,组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferases, HATs)和去乙酰化酶(histone deacetylases, HDACs)的动态变化参与调控生殖过程中众多关键生理事件发生时的基因激活与失活。其中,结构高度同源且功能冗余的HDAC1和HDAC2在卵子发生过程中扮演了关键的生理角色。HDAC1/2共同调控生长卵母细胞的整体转录水平以及凋亡水平,从而影响其后续发育,这体现了两者的功能冗余性。除此之外,HDAC1/2也能够不依赖于对方、独立地发挥作用。现有研究表明,HDAC2在卵子发生中更加重要,其可单独调控卵母细胞重新甲基化以及减数分裂染色体分离。HDAC1则在植入前胚胎发育过程中更为关键,单独缺乏HDAC1的胚胎干细胞增殖率降低,拟胚体体积减小且形状不规则。本综述拟就HDAC1/2在小鼠卵子发生中的调控作用及现有研究进展加以综述,为进一步认识表观修饰与生殖调控的关系提供参考。
- 高萌王超
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶1
- 新型含氨基二硫代甲酸酯的2(5H)-呋喃酮类化合物的合成及其抗肿瘤活性被引量：3
- 2014年
- 以糠醛和醇[薄荷醇(3a),冰片(3d)和甲醇(3g)]为原料,经3步反应制得中间体5-取代基-3,4-二溴-2(5H)-呋喃酮(5a,5d和5g);在无溶剂和无催化剂的条件下,5,仲胺和CS2通过"一锅法"快速合成了一系列新型的含氨基二硫代甲酸酯的2(5H)-呋喃酮类化合物(7a^7j),其结构经1H NMR,13C NMR和IR表征。运用MTT法测定了5-(S)-5-(l-孟氧基)-3-溴-4-(N-甲基-N'-苄基氨基二硫代甲酸)-2(5H)-呋喃酮(7c)抑制Hela人宫颈癌细胞增殖的体外活性。结果表明,7c具有较好的抑制活性,其IC50为0.14μM。
- 李天才康蕾李学强高晓慧周学章
- 关键词：2(5H)-呋喃酮抗肿瘤活性
- 布鲁氏菌S19毒力基因BvfA的原核表达及生物信息学分析被引量：4
- 2021年
- 试验旨在对布鲁氏菌S19毒力因子A(BvfA)基因进行克隆及原核表达,并对其编码的BvfA蛋白结构进行生物信息学分析。登录GenBank下载布鲁氏菌S19的1号染色体(登录号:CP030751.1),根据文献报道的布鲁氏菌S19 BvfA基因的位置和BvfA蛋白的分子质量,在NCBI的ORF Finder中预测编码BvfA蛋白的开放阅读框(ORF),根据ORF预测的BvfA基因设计扩增BvfA基因的引物,克隆该序列并连接到表达载体pET-32a(+)上,构建重组质粒pET-32a(+)-BvfA,并诱导其在大肠杆菌BL21(Ril)感受态细胞中表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blotting验证,并用生物信息学方法对BvfA蛋白结构进行在线预测。结果显示,BvfA基因ORF全长为336 bp,表达纯化得到分子质量为11 ku的分泌型BvfA蛋白;生物信息学分析显示,BvfA蛋白属于不稳定的亲水性蛋白,无跨膜结构,第1-28位氨基酸处存在信号肽区域,BvfA蛋白55.6%定位于细胞外,有12个可能的磷酸化位点,无O-糖基化位点,BvfA蛋白二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成。以上结果可为后续研究BvfA蛋白在布鲁氏菌中的致病机制及寻找布鲁氏菌病新的治疗靶点提供一定的参考。
- 杨江流乔军伟宋青山贾芳
- 关键词：布鲁氏菌原核表达生物信息学分析
- 晶维他复合液体维生素对蛋肉鸡免疫性能及血液生化指标的影响被引量：4
- 2016年
- 为了确定晶维他复合液体维生素的合理给药剂量,试验采用自乳化技术制备了水溶性复合液体维生素,选择1日龄蛋肉鸡300只,随机分成3组,将1 mL晶维他稀释于1.5 L水中,分别采用全天、隔天供应维生素饮水液和全饮纯化水的方式饲喂,试验期为21 d,测定了蛋肉鸡生长性能、免疫器官及血液生化指标。结果表明:自乳化技术处理的晶维他溶于水后分散均匀,能与水以任意比例互溶。适量补充晶维他复合液体维生素能够有效促进钙、磷吸收,增强机体免疫力,提升抗应激能力,降低发病率。但长期过量补充维生素会对肝脏和肾脏造成不良反应,影响机体发育,降低免疫力。
- 何芳马次郎周倩宇李雪张玉彦高蔚丰周学章
- 关键词：免疫指标血液生化指标免疫器官新城疫抗体
- 枸杞甜菜碱含量测定方法的比较研究被引量：24
- 2007年
- 通过比较分光光度法和高效液相色谱法测定枸杞甜菜碱含量,以确定适宜的甜菜碱含量测定方法。试验采用甲醇加热回流提取枸杞甜菜碱,分光光度法和NH2柱未经衍生高效液相色谱法分别测定甜菜碱含量。结果表明,NH2柱未经衍生高效液相色谱法快速、简便、重复性好,所测甜菜碱含量明显高于分光光度法。试验认为,NH2柱未经衍生高效液相色谱法能快速准确地测定枸杞甜菜碱含量,可用于枸杞的质量控制。
- 张自萍郭荣廖国玲马佳卉
- 关键词：枸杞甜菜碱高效液相色谱法分光光度法
- 大孔吸附树脂脱除枸杞多糖色素技术研究被引量：8
- 2014年
- 以宁夏枸杞为原料提取枸杞多糖,采用9种大孔吸附树脂对多糖提取液中色素脱除技术进行研究。在静态实验的基础上,采用正交实验筛选出色素脱除效果最佳的树脂。以脱色率、多糖保留率和蛋白清除率为指标,衡量树脂脱色效果。结果表明:D318树脂脱除色素的效果最佳,样液质量浓度3mg/mL、树脂用量3g/25mL、pH7、处理3h时D318树脂的脱色率、多糖保留率和蛋白清除率分别为67.32%、85.49%和58.76%。
- 鲁晓丽刘继婷张自萍
- 关键词：枸杞多糖大孔树脂脱色
