贵州医科大学医学科学研究所
- 作品数：14 被引量：14H指数：2
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- 硫氧还蛋白互作蛋白在肾缺血再灌注肾小管细胞损伤中的作用及机制
- 2017年
- 目的探讨硫氧还蛋白互作蛋白在肾急性缺血再灌注肾小管上皮细胞损伤中的作用及可能机制。方法体外建立肾缺血再灌注肾小管上皮细胞HK-2损伤的模型并下调TXNIP的表达,流式细胞术检测细胞内ROS水平和细胞凋亡;RT-qPCR法检测TXNIP mRNA的表达。Western Blot法检测TXNIP等相关蛋白的表达。结果与正常对照组比较,OGD/R组ROS水平和细胞凋亡率明显升高(P<0.01),GPX4蛋白表达明显降低(P<0.01);与OGD/R组比较,TXNIP siRNA组TXNIP蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.01),细胞内ROS水平和细胞凋亡率明显降低(P<0.01),GPX4蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论下调TXNIP可以抑制肾IRI引起的肾小管上皮细胞凋亡,可能机制是激活GPX4和减少ROS。
- 王岚熊英
- 关键词：缺血再灌注损伤硫氧还蛋白相互作用蛋白活性氧簇凋亡
- 达格列净在ox-LDL诱导形成的THP-1源性泡沫细胞焦亡中的作用
- 2023年
- 目的探讨达格列净(DAPA)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导形成的人髓系白血病单核细胞(THP-1)源性泡沫细胞焦亡中的作用。方法通过ox-LDL诱导THP-1源性巨噬细胞构建THP-1源性泡沫细胞焦亡模型。设置实验分组为:空白对照(NC)组、ox-LDL组和药物干预(ox-LDL+DAPA)组;以油红O法检测巨噬细胞泡沫化水平;细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)检测DAPA对泡沫细胞活力的影响;Hoechst 33342/PI双染检测THP-1源性泡沫细胞焦亡;细胞免疫荧光双染检测DAPA对泡沫细胞焦亡中焦亡关键因子Caspase-1表达的影响;采用微量酶标法检测细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性;采用qRT-PCR和Western blot分别检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、消皮素D(GSDMD)、白细胞介素(IL)-18、IL-1βmRNA和蛋白表达水平。结果CCK-8法检测结果提示DAPA的最佳干预浓度为10μmol/L;油红O染色结果示THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞焦亡模型构建成功;与NC组比较,ox-LDL组中NLRP3、Caspase-1、ASC、GSDMD、IL-18、IL-1β mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),碘化丙啶(PI)阳性细胞数及LDH活性增加(P<0.05),Caspase-1的荧光强度增强,细胞胞质内的红色脂滴增多;予DAPA干预后,ox-LDL+DAPA组中前述焦亡相关因子的mRNA和蛋白表达水平均降低(均P<0.05),PI阳性细胞数及LDH活性降低(P<0.05),Caspase-1的荧光强度减弱,细胞胞质内的红色脂滴减少(P<0.05)。结论DAPA对ox-LDL诱导形成的THP-1源性泡沫细胞焦亡具有抑制作用。
- 龚才伟赵广建刘大男欧航君赵权威李辉
- 关键词：泡沫细胞氧化低密度脂蛋白
- miR-26b对不同分化状态神经干细胞系C17.2向肝细胞生长因子趋化迁移的影响观察被引量：2
- 2018年
- 目的观察微小RNA-26b(mi R-26b)对不同分化状态神经干细胞(NSCs)系C17. 2向肝细胞生长因子(HGF)趋化迁移的影响。方法 (1)HGF刺激下不同分化状态NSCs细胞mi R-26b检测取C17. 2细胞,置于含N2和F12的诱导分化培养基中诱导分化。将细胞分为A、B、C、D组,A、B、C组分别于诱导分化12、24、72 h三个时间点终止诱导分化,D组为诱导分化前的细胞。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞mi R-26b。将诱导分化培养基更换为含25 ng/m L的HGF完全培养基,孵育5 h,每组均设相应对照,予无HGF的完全培养基孵育5 h。检测各组细胞mi R-26b。(2)抑制、过表达mi R-26b对C17. 2细胞向HGF的趋化迁移的影响取对数生长期C17. 2细胞,分为两组,分别转染mi R-26b mimic(促进mi R-26b表达)、mi R-26b NC(对照),将完全生长培养基更换为含N2和F12的诱导分化培养基,分别于诱导分化0、12、24、72 h时终止诱导分化,采用Transwell实验测算各分化时间细胞的迁移细胞率。取对数生长期C17. 2细胞,分为两组,分别转染mi R-26b inhibitor(抑制mi R-26b表达)、mi R-26b乱序对照(ConⅠ),将完全生长培养基更换为含N2和F12的诱导分化培养基,分别于诱导分化0、12、24、72 h时终止诱导分化,采用Transwell实验测算各分化时间细胞的迁移细胞率。结果 A、B、C、D组细胞mi R-26b相对表达量分别为1. 16±0. 07、1. 39±0. 11、2. 30±0. 11、1. 00±0. 03,与D组比较,B、C组胞mi R-26b相对表达量升高,P均<0. 05。A、B、C、D组HGF处理5 h时细胞mi R-26b相对表达量分别为2. 02±0. 43、2. 28±0. 35、2. 50±0. 41、2. 21±0. 23,A、B、C、D组未经处理细胞mi R-26b相对表达量分别为1. 21±0. 12、1. 47±0. 21、2. 30±0. 20、1. 00±0. 04,与未经处理者比较,HGF处理5 h时A、B、D组细胞mi R-26b相对表达量均升高,P均<0. 05。与转染NC者比较,分化0、12、24、72 h时转染mi R-26b mimic的细胞迁移率均升高(P均<0. 05)。与转染ConⅠ者比较,�
- 熊英汪显耀秦臻田羽王岚潘际刚许键炜
- 关键词：微小RNA神经干细胞肝细胞生长因子细胞趋化细胞迁移
- hUC-MSCs对缺氧缺血脑损伤新生大鼠脑组织的保护作用研究被引量：1
- 2021年
- 目的通过移植人脐带来源的间充质干细胞(hUC-MSCs)治疗缺氧缺血诱导的新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE),并探讨hUC-MSCs对神经细胞的保护作用及机制。方法采集足月健康新生儿脐带约10 cm,运用组织块贴壁法培养hUC-MSCs,通过感染重组携带绿色荧光蛋白的腺病毒标记细胞;取18只新生健康7d龄SD大鼠,随机均分为对照(假手术)、模型、治疗组,其中模型组及治疗组建立新生大鼠缺氧缺血脑损伤模型,建模成功24 h后将标记的hUC-MSCs注射入治疗组左侧(损伤侧)侧脑室,各组大鼠hUC-MSCs移植治疗48 h后,检测hUC-MSCs在HIE大鼠大脑内的定植并采用TTC染色观察梗死脑组织,RT-qPCR测定海马组织中Beclin-2、Caspase-3 mRNA水平的变化,Western blot检测海马区细胞Beclin-2、Caspase-3蛋白的表达。结果对照组大鼠大脑没有形成梗死体积,模型组大鼠大脑梗死体积明显,梗死体积比为(41.67±4.17)%;治疗组大鼠经hUC-MSCs移植治疗48 h后,大脑梗死体积减小[(16.65±3.43)%],与模型组比较,差异有统计学意义;HIE建模48 h后,内源性Beclin-2、Caspase-3的mRNA以及蛋白的表达上调。hUC-MSCs移植治疗48 h后,Beclin-2、Caspase-3的mRNA以及蛋白的表达下降。结论hUC-MSCs能减小缺氧缺血损伤大鼠大脑梗死体积,对损伤大鼠有保护作用;hUC-MSCs能够减少大鼠脑细胞凋亡,下调缺氧缺血脑损伤大鼠海马区细胞凋亡相关Beclin-2、Caspase-3的mRNA以及蛋白水平。
- 陈茂琼陈茂琼宋海良王岚王岚张丽娟熊英何志旭许键炜何志旭秦臻
- 鱼腥草抗前列腺癌潜在机制的研究进展被引量：1
- 2021年
- 据2020年世界癌症数据报告显示,前列腺癌的患病率居男性恶性肿瘤的第2位,死亡率的第5位。在我国由于不良的生活和饮食习惯的影响,前列腺癌的患病率仍在不断上升,但由于晚期前列腺癌可通过多种机制对雄激素去势治疗相关药物产生适应和耐受,晚期前列腺癌的治疗,往往难以取得有效的治疗效果。鱼腥草是三白草科蕺菜属植物,是国家卫生健康委员会正式确定为药食两用的品种之一。迄今为止的研究表明鱼腥草可通过多靶点、多环节、多途径对前列腺癌产生抑制增殖、诱导凋亡和细胞周期停滞、抑制迁移和侵袭等抗肿瘤生物活性作用,这些抗肿瘤活性可在乳腺癌、白血病、胃癌、结直肠癌等多种肿瘤细胞中观察到。这些抗肿瘤活性主要体现在抑制细胞周期蛋白(Cyclin)和细胞周期蛋白激酶的表达,调节凋亡相关蛋白的表达并激活凋亡相关通路,减少基质金属蛋白的分泌,抑制信号转导与转录激活因子3(STAT3)/锌指蛋白(Snail)/转录因子Twist(Twist)通路,拮抗生长因子受体、雄激素、炎症及氧化应激在前列腺癌发生和发展过程中的促进作用。另外研究显示鱼腥草也可以通过抑制蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路,改善糖尿病,调节降血糖的相关通路并增强机体免疫力等方式实现对前列腺癌的发生和进展产生抑制。综上所述,鱼腥草可作为抗前列腺癌的潜在药物。
- 李威张峻豪许盛涵车邦威黄涛唐开发
- 关键词：鱼腥草前列腺癌细胞凋亡炎症免疫力
- 不同方法建立颞叶癫痫模型的体会
- 目的 探讨不同癫痫模型的制备及其在癫痫研究方面的应用.方法 选择成年雄性SD大鼠60只,平均体重223.5±1.3g,随机分为杏仁核慢点燃组、杏仁核快点燃组、注射匹罗卡品组,每组20只动物,制模成功后,观察动物行为表现,...
- 周鑫陈中玮王丽琨伍国锋
- hUC-MSC在成神经分化过程中的趋化迁移研究被引量：1
- 2021年
- 目的探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSC)向神经样细胞的分化,并对其分化的神经样细胞的趋化作用进行研究。方法检测hUC-MSC细胞表面的标记;无血清的诱导培养基[含2%二甲基亚砜(DMSO)和200μmol/L丁羟基茴香醚(BHA)]诱导其向神经细胞分化,并进行神经细胞特异性标志物神经上皮干细胞蛋白(nestin)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的免疫荧光染色检测,并对分化的成神经诱导过程中的形态变化进行鉴定。此外,不同分化状态的hUC-MSC,在加入500μL含有20 ng/mL浓度的基质细胞衍生因子(stromal Cell-derived Factor-1α,SDF-1α)的不含血清的L-DMEM培养基,利用倒置相差显微镜下拍照,统计迁移至室膜下方的细胞数。结果成功分离出hUC-MSC,行流式细胞仪检测结果显示MSC:CD71+、CD29+,而CD34-、CD45-符合MSC的生物学特征。对不同诱导时间的hUC-MSC免疫荧光结果的统计学分析,nestin的表达呈现出先增高后降低的趋势,NSE在诱导期和维持前期均为阴性,在整个过程中末期才开始表达,到维持48 h时有62.5%的细胞表达,维持72 h时有76.5%的细胞表达。不同成神经分化状态的hUC-MSC迁移能力不同,诱导30 h,细胞向SDF-1α的趋化迁移能力达到最强。结论hUC-MSC具有易分离并扩增培养的生物特性,能诱导分化成为成神经细胞,并且具有一定的迁移能力,该研究能为中枢神经系统细胞的移植提供理论基础。
- 李晨卞凯鹏熊英张丽娟匡梦岚王岚王恒许键炜
- 以创新性、探索性实验深化机能设计性实验教学改革被引量：4
- 2016年
- 通过学生自主设计性实验提高学生的综合科研素质,以学生为主体,培养学生的创新意识和分析解决问题的能力,是机能实验教学改革的重要尝试。面对当前设计性实验教学中存在的问题,结合我校实际尝试选拔优秀的实验设计,深入开展探索性、创新性实验,使学生的综合能力得到了系统培养,有效提升了设计性实验课程的教学效果。
- 熊英李玲王岚吴艳俊张金娟叶兰
- 关键词：机能实验学实验教学教学改革
- 颈内动脉破裂动脉瘤行支架辅助栓塞术后口服双抗治疗的时限研究
- 2023年
- 目的:探讨与研究不同口服双抗治疗时限对颈内动脉破裂动脉瘤行支架辅助栓塞术后患者的影响。方法:2017年2到2022年1月选择在我院及贵州省职工医院已行颈内动脉瘤支架辅助栓塞术的患者282例作为研究对象,根据患者服药时间将其分为三组,A组、B组、C组分别术后都口服双抗治疗,持续时间分别为3个月、6个月与1年。结果:三组的手术时间、手术出血量、支架种类对比无显著差异(P>0.05)。三组术后1年的改良Rankin量表(MRS),评分都明显高于术前,A组术后1年的MRS评分都明显高于B组与C组(P<0.05)。三组术后1年的血清肿瘤坏死因子(TNF-α)与白细胞介素(IL-6)含量都明显低于术前,A组术后1年的血清TNF-α与IL-6含量也明显低于B组与C组(P<0.05)。A组术后1年的血栓、再出血事件发生率分别为2.1%、1.1%,都明显低于B组与C组的19.1%、10.6%、18.1%、11.7%(P<0.05)。结论:颈内动脉破裂动脉瘤行支架辅助栓塞术具有很好的应用可行性,术后短期口服双抗治疗更能改善患者的预后,降低血栓、再出血事件的发生率。
- 刘骏驰刘旭柳明富刘大男向欣彭翰刘昊楠杨华
- 复方鳖甲软肝片对小鼠肾纤维化的防治作用被引量：2
- 2019年
- 目的:观察复方鳖甲软肝片对小鼠肾纤维化的防治作用。方法:40只昆明种小鼠随机分为对照组、模型组、治疗组和干预组,模型组、治疗组和干预组皮下注射CCl4与橄榄油混合液持续6周建立肾纤维化动物模型,干预组于造模同时开始给予复方鳖甲软肝片干预,共12周,对照组代以等体积橄榄油皮下注射;造模后治疗组复方鳖甲软肝片连续灌胃给药6周,模型组和对照组则予等体积生理盐水灌胃;实验第12周时检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平,ELISA法检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC III)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-Col),采用HE染色和Masson染色评价肾间质纤维化损伤程度,免疫组织化学染色检测肾脏组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)和肿瘤坏死因子(TNF-α)表达。结果:与对照组比较,模型组血清BUN、Scr、HA、LN、PC III、Ⅳ-Col均明显增高(P <0. 05),肾间质纤维化明显,肾组织α-SMA和TNF-α高表达(P <0. 05);与模型组比较,治疗组和干预组上述肾功能和肾纤维化指标均显著降低(P <0. 05),肾间质纤维化改善,肾组织中α-SMA和TNF-α表达降低(P <0. 05)。结论:复方鳖甲软肝片能有效减轻并预防CCl4诱导的小鼠肾纤维化及肾脏损害。
- 熊英刘宗泽李佑敬王岚秦臻许键炜
- 关键词：肾纤维化Α-平滑肌动蛋白肿瘤坏死因子Α
