大连理工大学干细胞与组织工程研究室
- 作品数：28 被引量：54H指数：4
- 相关作者：姚立松鞠智好李瑞鹏戴明舒刘朋更多>>
- 相关机构：中国医科大学基础医学院病理生理教研室中国医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省科学技术基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程理学更多>>
- 中空纤维膜在旋转壁式生物反应器内作为细胞载体的性能被引量：6
- 2007年
- 利用中空纤维膜作为成骨细胞的载体,在旋转壁式中空纤维膜生物反应器(Rotating wall hollow-fiber membrane bioreactor,RWHMB)内对其进行大规模扩增,并在静态环境使用中空纤维膜和在旋转壁式生物反应器(Rotating wall vessel bioreactor,RWVB)中使用微载体以相同条件对照培养。每隔12h对细胞进行取样,培养5d后对细胞进行收获。对所扩增的细胞分别进行扩增能力、扫描电镜(SEM)观察、苏木精-伊红染色、碱性磷酸酶(ALP)染色、钙化结节染色等生物学性能检测。结果显示在RWHMB内动态培养的成骨细胞生长良好,分泌大量的细胞外基质。证实RWHMB能结合RWVB和中空纤维膜的优点,较好地模拟体内环境,对所培养的细胞施加适当的流体应力刺激,促进细胞的新陈代谢和物质交换,更有利于细胞的生长及增殖。
- 宋克东刘天庆赵虎李香琴崔占峰马学虎
- 关键词：中空纤维膜微载体生物反应器成骨细胞扩增
- 生物反应器内工程化软骨的三维动态构建
- 2015年
- 组织工程化软骨的体外构建,可克服传统治疗方法的一些不足,被认为是一种有望治疗关节软骨缺损的有效途径。文章旨在探究人源脂肪干细胞结合壳聚糖/明胶水凝胶支架,在体外动态环境下构建工程化软骨的优势。实验制备了壳聚糖/明胶水凝胶支架,对其理化性能进行了检测,后将人源脂肪干细胞作为种子细胞,接种在支架上进行软骨的诱导培养,其中,选用转瓶作为动态的培养环境。分别通过组织学染色、共聚焦显微镜观察、扫描电镜观察等考察了软骨的构建情况,结果显示壳聚糖/明胶支架的平均孔径为(118.25±19.51)μm,孔隙率为(82.60±2.34)%,溶胀率为(361.28±0.47)%,弹性模量为(61.2±0.16)k Pa,具有良好生物相容性。动态载支架-转瓶内水凝胶支架中细胞蛋白多糖的表达更显著,细胞生长分布更加均匀,分泌细胞外基质基本填满整个支架,可促进人源脂肪干细胞的软骨分化和体外软骨的构建。
- 宋克东杨延飞李文芳李丽颖张钰刘天庆
- 关键词：脂肪干细胞软骨细胞组织工程化软骨生物反应器种子细胞
- 壳聚糖支架材料的制备、表面修饰及细胞粘附性能的研究被引量：14
- 2008年
- 通过冷冻干燥法进行壳聚糖(Chitosan)多孔支架材料的制备,使用I型明胶对所制得的支架材料进行表面修饰,用于生物医用可降解复合材料的仿生构建。对所制备的支架材料分别进行密度、孔隙率和降解率等物理性质测定,并使用新西兰兔来源的骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)检验支架材料的细胞粘附和生物相容性能。以未经表面处理的该种材料作为对照组,对MSCs-Chitosan复合物分别进行扫描电镜和Hoechst染色等,检测MSCs(间充质干细胞)在支架材料表面的生长、粘附和分布形态。结果显示两种壳聚糖浓度制备的多孔支架材料的空隙率分别为(86.85±2.42)%和(71.50±3.29)%,孔径为90～130μm,MSCs在经明胶表面修饰的材料表面表现出良好的粘附、伸展性能。此外,本研究还对1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(1-ethyl-(3-dimethylanimopropyl)carbodiimide,EDC)交联剂对壳聚糖基支架性能的影响进行了初步研究。研究表明,通过明胶修饰构建的仿生明胶/壳聚糖人工基质材料,具有良好的生物相容性能,作为一种理想的组织工程用支架材料,适于细胞在其上的粘附与增殖。
- 文鹏飞宋克东刘天庆朱艳霞
- 关键词：壳聚糖多孔支架材料表面修饰骨髓间充质干细胞细胞粘附
- 成骨细胞在旋转壁式生物反应器内的大规模扩增被引量：4
- 2005年
- 目的 进行SD大鼠成骨细胞在旋转壁式生物反应器内大规模扩增培养的研究。方法 利用微载体悬浮培养法在旋转壁式生物反应器内大规模扩增成骨细胞 ,检测其组织形态和生物功能后。作为接种到支架材料上并于反应器内三维环境中培养组织工程骨的种子细胞。结果 成骨细胞在生物反应器中每代可以扩增十倍以上 ,同时经过倒置相差显微镜、SEM(扫描电镜 )以及ALP(碱性磷酸酶 )和MTT等生物学性能检测后 ,发现在旋转壁式生物反应器中三维培养的成骨细胞各种生物指标性能良好。结论 新型旋转壁式生物反应器可以提供低剪切力的培养环境 ,而且细胞之间有三维联系的机会 ,成骨细胞表现出良好的体外扩增能力 ,适于建立一种理想的成骨细胞体外扩增的三维培养体系。
- 宋克东刘天庆崔占峰李香琴葛丹孙相玉马学虎
- 关键词：成骨细胞微载体体外培养
- 体外神经干细胞三维药物筛选模型的构建
- 2009年
- 研究目的：建立中药对神经干细胞诱导转变为神经细胞的体外模型，不仅对研究脑的发育和分化以及神经系统疾病的治疗具有重要价值，而且也有助于了解中药的作用机制，为中药的临床应用提供坚实的科学依据。本研究评价体外海马神经干细胞在胶原凝胶内的生长情况，探讨胶原凝胶作为神经系统组织支架材料的可行性，以建立适合于干细胞药物筛选及作用机理研究的三维培养模型。研究方法：①细胞培养：体外培养来源于孕13天胎鼠的海马部位神经干细胞，传至第三代；根据胶原的特性，把神经干细胞均匀混合于胶原的预凝胶溶液中，便可形成“细胞．胶原”的凝胶三维结构。②检测指标：倒置相差显微镜和激光共聚焦显微镜观察胶原凝胶中神经干细胞的生长、伸展情况；通用免疫细胞化学方法及荧光显微技术鉴定神经干细胞，BrdU染色标记增殖的细胞；采用CCK-8法及Live／DeadViability／CytotoxicityKit试剂盒检测神经干细胞不同培养条件下的生存和增殖能力，筛选出最佳的胶原工作浓度。结果：①倒置相差显微镜下观察发现胶原凝胶中的神经干细胞生长状态良好；
- 关水陆瑞欣刘天庆马学虎崔占峰
- 关键词：神经干细胞药物筛选模型体外模型细胞生长状态免疫细胞化学方法胶原凝胶
- 应用搅拌式生物反应器大量扩增人胎盘间充质干细胞的实验研究被引量：2
- 2009年
- 探讨应用搅拌式生物反应器培养技术体外扩增人胎盘间充质干细胞(hPDMCs)的方法。以hPDMCs为种子细胞,利用微载体悬浮法在搅拌式生物反应器内进行体外培养,同时设置静态培养的培养瓶为对照组,观察细胞的扩增速率、细胞代谢(乳酸、葡萄糖、培养液的pH值)的变化,检测生物反应器培养前、后干细胞的表面标记物。hPDMCs在搅拌式生物反应器内每代可以扩增(10.55±1.62)倍,明显高于对照组(6.10±0.11)倍的扩增值(P<0.05),且细胞生长代谢指标优于对照组;流式细胞仪检测应用搅拌式生物反应器,培养后细胞表面标记物的表达率无明显改变(P>0.05)。搅拌式生物反应器能够提供良好的细胞生长环境,建立用于hPDMCs的大量扩增的体外三维培养体系。
- 于艳秋任海琴李昆鲍春雨刘天庆金玉楠云伟董博
- 关键词：间充质干细胞生物反应器细胞扩增人胎盘
- 骨组织冷冻过程中的CPA导入和洗脱过程的传递现象
- 通过酶解离台盼蓝染色计数法和渗透压的测定对SD大鼠颅骨骨块超低温保存过程中冷冻保护剂的导入和洗脱过程的传递特性进行了初步研究,试图找到较优的导入,洗脱方案及其规律。实验结果表明:对于SD 大鼠颅骨骨块,浓度为15％的二甲...
- 柏巍马学虎葛丹程昉刘天庆崔占峰
- 关键词：生物组织超低温冷冻渗透压骨块
- 文献传递
- 成骨细胞玻璃化冷冻保护剂的研究被引量：1
- 2003年
- 在超低温冷冻过程中,冷冻保护剂(CPA)抑制胞内冰晶形成和避免溶质效应.然而,在其导入和洗脱过程中,由于渗透压的急剧变化将导致细胞大量死亡.本文以成骨细胞为样本,通过测定冷冻保护剂的玻璃化温度、CPA导入和洗脱时渗透压变化及其对细胞活性的影响,研究冷冻保护剂浓度和不同种类保护剂的联合使用对成骨细胞玻璃化冷冻过程的影响.
- 邬霞马学虎葛丹程昉刘天庆崔占峰
- 关键词：玻璃化冷冻保护剂渗透压MTT比色法细胞活性
- 体外构建神经干细胞三维药物筛选模型
- 研究目的:建立中药对神经干细胞诱导转变为神经细胞的体外模型,不仅对研究脑的发育和分化以及神经系统疾病的治疗具有重要价值,而且也有助于了解中药的作用机制,为中药的临床应用提供坚实的科学依据。本研究评价体外海马神经干细胞在胶...
- 关水陆瑞欣刘天庆马学虎崔占峰
- 关键词：神经干细胞药物筛选胶原
- 文献传递
- 海藻酸钙/明胶微胶珠的制备、检测及神经干细胞相容性分析被引量：1
- 2015年
- 研究制备了海藻酸钙/明胶微胶珠,并探讨了此种微胶珠的机械和渗透性能及作为细胞载体用于神经干细胞体外培养的可行性。使用自制穿刺力测试仪检测不同浓度的海藻酸钠、明胶和Ca Cl2对微胶珠机械强度的影响;采用DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Media)培养基浸泡法测试微胶珠的耐浸泡能力;试验以微胶珠为对象建立扩散模型以研究葡萄糖和牛血清蛋白(Bovine serum albumin BSA)在微胶珠中的扩散情况,并模拟得扩散系数与物质浓度之间的关系,此后,通过包埋培养昆明小鼠神经干细胞探索微胶珠用于神经干细胞体外培养的可行性。通过综合分析强度和扩散性能以及培养细胞的状况等,得出海藻酸钙/明胶微胶珠的最佳制备参数:海藻酸钠1.5%(wt)、明胶0.5%(wt)、Ca Cl24%(wt),并发现所研究制备的海藻酸钙/明胶微胶珠具有良好的细胞相容性,适于作为细胞载体用于神经干细胞的体外培养。
- 宋克东虞泽李瑞鹏刘朋Lim Mayasari刘天庆
- 关键词：神经干细胞机械强度
