海南医学院转基因实验室
- 作品数：8 被引量：3H指数：1
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- 一个新的人乳源性生物活性肽cDNA克隆与测序分析
- 2001年
- 目的:分离、克隆人乳汁中新的生物活性肽。方法:从人初乳中提取总RNA,反转录获得cDNA,SMARTPCR扩增cDNA片段,克隆于pGEM-TEasy载体中,进行测序分析。结果:克隆一个新的cDNA并编码42个氨基酸的多肽,与人催乳素样糖蛋白部分同源,加入国际基因库,编号为:GenbankAF160979。结论:人初乳中存在核酸RNA,所克隆的新cDNA可能具有催乳素样功能。
- 董克家
- 关键词：基因生物活性肽CDNA克隆
- 一个新的胎肝发育相关因子cDNA的克隆与序列分析被引量：1
- 2001年
- 目的:从胎肝cDNA文库中,分离胎肝发育相关新cDNA。方法:分离纯化胎肝组织RNA,构建cDNA文库、T-A克隆、核酸自动测序及生物信息学分析。结果:分离克隆一个新的cDNA片段,编码71个氨基酸多肽,并且与肝脏生长/分化因子9部分同源。申请加入国际基因库,登录号为:GenbankAF157027。结论:该新cDNA(GenbankAF157027)编码的多肽可能调控肝脏的发育。
- 钱建新
- 关键词：基因分化肝脏CDNA克隆
- 奶水牛β-酪蛋白启动子的克隆及其序列分析
- 2003年
- 目的:克隆水牛乳腺β-酪蛋白启动子。方法:分离提取水牛乳腺组织DNA,PCR扩增目的片段,T-A克隆,核酸自动测序。结果:所克隆的DNA片段包含CAAT、TATA信号区,孕酮调节区等,100%同源于黑白花奶牛β酪蛋白启动子序列。结论:所克隆DNA片段是奶水牛β-酪蛋白基因上游调控序列。
- 董克家
- 关键词：水牛启动子
- miR-29b微RNA定位序列的素数组合规律
- 2009年
- 目的:探讨miR-29b微RNA定位序列的编码机制。方法:按照碱基堆积力和微RNA非编码性质,对碱基进行四进制数字编码:AUGC/0123;并且运用公式:Nmod4^n=R对微RNA序列进行模数运算和结构分析。结果:发现miR-29b微RNA的定位序列-aguguu具有素数组合规律。结论:微RNA细胞内分子邮编可能按照素数组合规律编码。
- 钱建新董克家
- 关键词：微RNA
- 奶水牛乳腺表达人FSHβ基因的载体构建
- 2003年
- 目的:构建奶水牛乳腺表达人FSHβ基因载体。方法:利用限制性内切酶和T4DNA连接酶方法将转基因构件(水牛β酪蛋白启动子、hFSHβ、SV40PolyA)插入pLXIN载体中,通过转化大肠杆菌,筛选阳性克隆。结果:通过酶切鉴定及测序分析表明pLXIN插入转基因构件。结论:奶水牛乳腺表达人FSHβ基因的载体为:pLXIN-hFSHβ。
- 董克家钱建新
- 关键词：水牛
- 转基因水牛人FSHβ基因突变的研究被引量：1
- 2003年
- 目的:检测转基因水牛人FSHβcDNA序列基因。方法:分离提取转基因水牛外周血DNA,PCR扩增,T-A克隆测序,DNAclub软件分析。结果:水牛基因组整合人FSHβcDNA序列并发生一位点缺失C44(无意义链)或G347(有意义链),突变位于人FSHβ-Seatbelt结构域。结论:转基因水牛整合人FSHβcDNA序列发生点缺失,导致阅读框架发生移码,其功能有待进一步研究。
- 董克家钱建新陈雪银符家达李晓军
- 关键词：水牛转基因CDNA
- 18S rRNA基因siRNA表达质粒的构建和鉴定
- 2006年
- 目的:构建和鉴定水牛18SrRNA干扰真核表达载体,为进一步研究18SrRNA功能奠定基础。方法:人工设计合成水牛18SrRNA-sh565干扰序列,经基因重组定向克隆插入到真核表达载体pGPH1/GFP/Neo,随机挑选2个克隆菌提取质粒并进行酶切和测序鉴定。结果:质粒酶切和测序结果显示,siRNA寡核苷酸按正确方向和序列插入质粒。结论:成功构建pGPH1/GFP/Neo-buffalo-18S rRNA-sh565干扰表达质粒。
- 王维钱建新董克家
- 关键词：RNA干扰RRNA真核细胞质粒水牛
- 转基因杂交水牛染色体核型分析被引量：1
- 2002年
- 目的:分析转基因水牛(“海医一号”)染色体核型。方法:取水牛耳源静脉血,按人类外周血染色体标本制备方法进行。结果:水牛染色体核型为２ｎ＝４９(４９,ＸＸ)。结论:转基因杂交水牛核型变化与常规杂交育种相同。
- 钱建新李晓军董克家
- 关键词：杂交染色体核型
