贵州医科大学生物技术教研室
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
- 相关作者：胡越任春丽更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 原核表达家蝇Phormicin蛋白对金黄色葡萄球菌的抑菌活性分析被引量：1
- 2020年
- 家蝇Phormicin是一类具有广普抗菌活性的抗菌肽,属于防御素家族。本研究采用原核表达法纯化并获得家蝇Phormicin A、Phormicin B蛋白,将其作用于金黄色葡萄球菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为0.625 mmol/L和0.469 mmol/L。进一步绘制了二者对金黄色葡萄球菌的时间杀菌曲线,并利用牛津杯法进一步验证了二者的抗菌效果。结果显示,二者对金黄色葡萄球菌都具有一定的抑菌效果。本研究为进一步探索Phormicin在家蝇天然免疫和防御中的机制提供理论参考。
- 王兵杜兵韦鹏威黄伟康姚杨伍仕梅万珊万珊朱贵明
- 关键词：抗菌肽家蝇
- 孤独症大鼠前额叶皮质中Notch相关蛋白的表达被引量：4
- 2016年
- 目的观察孤独症大鼠前额叶皮质中Notch信号通路相关蛋白发状分裂相关增强子（Hes1）和星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的变化,探讨Notch信号通路在孤独症发病机制中的作用。方法健康繁殖期Wistar雌鼠20只,体重250~260g,随机选取15只在妊娠12.5d（E12.5）腹腔注射丙戊酸钠（VPA）,其子代为孤独症模型组;其余5只则注射等量生理盐水,子代为对照组。通过比较三箱实验、自梳理实验验证模型建立是否成功;Western blot方法对比孤独症模型组与对照组大鼠出生后42d（P42）前额叶皮质中Hes1以及GFAP表达水平的变化。结果 1）成功建立孤独症动物模型：与正常对照组比较,三箱实验显示模型组大鼠交互能力障碍、缺乏对新鲜事物的偏好性;自梳理实验显示模型组理毛时间显著增加（P〈0.05）;2）与正常组比较,模型组大鼠P42前额叶皮质Hes1表达显著升高（P〈0.05）,GFAP表达显著升高（P〈0.05）。结论孤独症大鼠P42前额叶皮质Notch信号通路活化增多,且伴星形胶质细胞增多,提示孤独症的发病机制可能与Notch信号通路的异常活化有关。
- 陈亦岚文敏周波童雪涛艾戎
- 关键词：孤独症NOTCH胶质纤维酸性蛋白
- 半夏块茎腐烂病原细菌拮抗菌的分离与鉴定被引量：2
- 2015年
- 为促进贵州半夏发展绿色种植,采用平板稀释法和平板对峙培养法从贵州省不同地区采集的土壤样品中筛选对半夏块茎腐烂病病原菌具有较强拮抗效果的生防菌株,结合形态学观察、生理生化检测和16SrRNA序列分析对其进行鉴定。结果表明:采集土样中共分离得到270株细菌,从中筛选到1株有较强拮抗活性的细菌HM9-1,其对块茎腐烂病病原菌胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜软腐亚种的抑菌圈直径达2.4cm。经鉴定,该菌株为巨大芽孢杆菌。
- 张洁胡琨敏李玉权任建国任春丽刘红美
- 关键词：半夏拮抗细菌巨大芽孢杆菌
- 金黄色葡萄球菌基因组表达文库的构建及免疫学初步筛选
- 2016年
- 为从基因组水平筛选金黄色葡萄球菌疫苗抗原，建立金黄色葡萄球菌基因组表达文库，用患者恢复期血清对表达文库进行血清学筛选，并对获得的阳性克隆进行序列测定及同源性分析。结果显示，构建的金黄色葡萄球菌基因组表达文库共有5x10。个克隆，片段插入正确率为91．67％。对文库进行初步筛选，共获得6个阳性克隆，经测序鉴定和同源性分析发现6个克隆涉及金黄色葡萄球菌基因组6个开放阅读框（ORF）。结果表明，本研究建立的疫苗抗原筛选方法可用于金黄色葡萄球菌疫苗抗原的系统筛选。
- 刘丽娜张洁周静钟乃凤胡祖权王赟
- 关键词：金黄色葡萄球菌免疫学筛选疫苗抗原
- 半夏块茎腐烂病化学防治药剂的筛选被引量：5
- 2016年
- 目的:筛选出高效药剂防治半夏块茎腐烂病,为半夏栽培提供依据。方法:对15种化学药剂进行了病原菌拮抗试验和盆栽试验。结果:拮抗试验结果表明,42%三氯异氰尿酸、80%乙蒜素、15%噁霉灵·爱诺助剂、72%农用硫酸链霉素和40%多·福对半夏块茎腐烂病病原菌产生强抑菌作用。抑菌最高稀释倍数分别为15 000倍液、5 000倍液、4 000倍液、500倍液和500倍液。盆栽试验表明,72%农用硫酸链霉素稀释500倍液、80%乙蒜素稀释1 000倍液和42%三氯异氰尿酸稀释1 000倍液,防治效果均可达70%以上。结论:从防治效果和价格综合考虑,建议生产上将42%三氯异氰尿酸、80%乙蒜素和72%农用硫酸链霉素交替使用来防治半夏块茎腐烂病。
- 李玉权祝学海石建龙任建国周静刘红美
- 关键词：半夏块茎腐烂病药剂筛选三氯异氰尿酸乙蒜素
- 家蝇u93基因编码蛋白多克隆抗体的制备与鉴定
- 2018年
- 目的:制备特异性的u93基因编码蛋白的多克隆抗体。方法:采用原核表达技术,体外诱导表达u93重组蛋白;采用蛋白免疫法,以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体;用ELISA法检测多克隆抗体效价,运用Western-blot方法对u93多克隆抗体的纯度和特异性进行分析。结果:制备的兔抗u93重组蛋白多克隆抗体效价为1∶4 000,Western-blot结果显示该多克隆抗体能特异性识别u93重组蛋白。结论:成功制备u93基因编码蛋白的多克隆抗体。
- 马素贞王涛龙慧玲国果杨阳常振策王兵吴建伟
- 关键词：家蝇基因重组蛋白原核表达多克隆抗体
- 家蝇 u93基因的原核表达与体外抗菌活性检测被引量：1
- 2018年
- 目的:构建家蝇u93基因原核表达体系,检测重组表达产物的体外抗菌活性。方法:采用生物信息学方法,分析u93基因编码蛋白的理化特性;将前期构建的p ET29a-u93重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21/DE3中,以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白并通过SDS-PAGE对表达产物进行分析;纯化重组蛋白,采用微量稀释法检测u93重组蛋白的体外抗菌活性。结果:生物信息学分析显示,u93编码基因开放阅读框全长363 bp,共编码120个氨基酸,理论分子量为13. 35 k D,等电点为7. 52,信号肽位于1~20位氨基酸之间;u93重组蛋白在大肠杆菌BL21/DE3中主要以包涵体形式表达,重组蛋白的相对分子质量与理论值相一致; u93重组蛋白对白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC)为21 mg/L、对近平滑念珠菌MIC为12. 5 mg/L、对克柔念珠菌MIC为12. 5 mg/L、对热带念珠菌MIC为12. 5 mg/L,但不能抑制金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌的生长繁殖。结论:成功构建u93原核表达系统,重组表达的u93蛋白对念珠菌具有较强的抑杀活性。
- 马素贞王涛龙慧玲国果杨阳常振策王兵吴建伟
- 关键词：家蝇基因原核表达抗菌活性
- 短短芽孢杆菌DFG对金黄色葡萄球菌的抑制效果被引量：2
- 2016年
- 为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)DFG菌株的开发应用提供参考,采用不同化学物质处理方法结合琼脂打孔法研究不同培养基、接种量和发酵时间对其发酵液抑菌活性的影响,并在此基础上研究温度、蛋白酶、酸碱、紫外线照射和反复冻融等因素对其抑菌物质稳定性的影响。结果表明:NA培养基培养的DFG菌株其发酵液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑制作用最强,抑菌圈直径达2.4cm;发酵液经100℃处理30min,抑菌率仍达65%;对酸碱也具有较强的稳定性;经紫外线照射和反复冻融后性质稳定;对胃蛋白酶、胰蛋白酶及蛋白酶K不敏感,可用有机溶剂对短短芽孢杆菌DFG菌株抑菌物质进行部分萃取。
- 刘红美胡越李玉权陶小买任建国
- 关键词：金黄色葡萄球菌发酵液抑菌物质抑菌特性
