山东信得药业有限责任公司
- 作品数：14 被引量：13H指数：3
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- 相关机构：济南军区疾病预防控制中心沈阳农业大学山西农业大学更多>>
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- 猪IFN-γ基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究
- 根据Gene Bank中猪IFN-γ基因设计引物对,利用RT-PCR技术克隆并测定了猪外周血白细胞IFN-γ基因,定名为poIFNR1,其ORF长度为501个核苷酸,其成熟肽包含144个氨基酸。将其成熟肽基因序列根据大肠...
- 马凤龙李朝阳乔彦良傅兴伦赵怀龙贾世玉陈如明陈国柱
- 关键词：包涵体复性
- 重组胸腺素α1在大肠杆菌中的表达与活性检测
- 重组胸腺素alpha 1(Tα1)基因在大肠杆菌中进行表达。根据大肠杆菌密码子偏爱性合成Tα1基因并连接到pMD18-T载体上,双酶切回收的Tα1插入到pET32a后,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导,经15%SDS-...
- 马凤龙崔雪志傅兴伦刘焕奇
- 关键词：胸腺素Α1大肠杆菌可溶性表达淋巴细胞增殖
- 文献传递
- 鸡β-防御素在大肠杆菌中的高效表达及复性被引量：3
- 2007年
- 鸡β-防御素(gallinacin-3,Gal3)是鸡体内重要的防御因子,本试验研究了鸡Gal3融合蛋白在大肠杆菌中高效表达的规律,并探索了重组蛋白质的复性工艺.结果表明,加入诱导剂后1h,开始有可检出量的重组蛋白质表达,2h的表达水平已接近最大量;化学诱导剂IPTG 0.2～1.2mol/L对重组蛋白的产量没有明显影响.经Lablmage软件分析,融合蛋白的产量可达菌体总蛋白的35%以上,且主要以包涵体形式存在.将所获包涵体用8mol/L尿素溶解后,分步稀释于含有氧化型谷胱甘肽和还原型谷胱甘肽的复性系统中,重组蛋白得到完全复性.12mg/L复性的重组鸡Gal3能抑制肠炎沙门氏菌的生长,24mg/L能抑制肠致病型大肠杆菌的生长.
- 邢海云高英杰宁官保赵建增乔彦良李朝阳
- 关键词：大肠杆菌融合蛋白抑菌作用
- 蛋鸡α-干扰素基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究
- 根据Gene Bank中鸡IFN-α基因设计引物对,利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡(SPF)的IFN-α基因,定名为ChIFN-Sl,与GeneBank中IFN-α比较,ORF长度均为582个核苷酸,其成熟肽包含162...
- 马凤龙李朝阳乔彦良傅兴伦赵怀龙贾世玉陈如明陈国柱
- 关键词：包涵体复性
- 文献传递
- 牛乳素Lfcin B基因的合成及其在酵母菌中的表达研究被引量：6
- 2008年
- [目的]为临床研究和治疗某些病原微生物引起的感染提供依据。[方法]参照LfcinB的氨基酸序列,利用化学合成法合成LfcinB基因并克隆到pPIC9K载体中,转化到酵母菌GS115感受态细胞中,用抗性选择标记G418筛选出高拷贝酵母菌转化子。利用甲醇诱导表达重组LfcinB,经Tricine-SDS-PAGE电泳检测目的蛋白牛乳铁蛋白素的表达情况,同时通过体外抑菌试验检测表达产物的抑菌活性。[结果]提取的酵母菌DNA扩增出1条预期的560bp左右的特异性条带。目的基因已经成功克隆到pPIC9K载体中,并转到酵母菌GS115中而且获得了表达。重组酵母表达上清中牛乳铁蛋白素抗菌肽对沙门氏肠炎杆菌的抗菌活性为42.857IU/ml,表明LfcinB基因的酵母表达载体构建成功。[结论]该研究证明利用化学合成法直接合成编码LfcinB的DNA构建真核表达载体、通过生物发酵工程来制备LfcinB是可行的。
- 马凤龙张瑜刘焕珍乔彦良傅兴伦李朝阳
- 关键词：基因表达抑菌活性
- 猪IFN-γ基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究
- 根据GeneBank中猪IFN-γ基因设计引物对,利用RT-PCR技术克隆并测定了猪外周血白细胞IFN-γ基因,定名为poIFNRl,其ORF长度为501个核苷酸,其成熟肽包含144个氨基酸。将其成熟肽基因序列根据大肠杆...
- 马凤龙李朝阳乔彦良傅兴伦赵怀龙贾世玉陈如明陈国柱
- 关键词：包涵体复性
- 文献传递
- 牛乳素Lfcin B基因的合成及其在酵母菌中的表达研究
- 利用化学合成法直接合成编码牛乳素Lfcin B的DNA序列并克隆入pPIC9K中,然后通过化学转化法导入酵母菌GS115中,用G418筛选高拷贝转化子,利用甲醇诱导表达重组Lfcin B。通过Tricine-SDS-PA...
- 马凤龙张瑜傅兴伦乔彦良李朝阳刘焕珍
- 文献传递
- 蛋鸡α-干扰素基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达与复性研究被引量：1
- 2007年
- 根据GenBank中鸡IFN—α序列设计引物对，利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡（SPY）的IFN-α基因，命名ChIFN-S1，与GenBank中IFN-α比较，ORF长度均为582个核苷酸，其成熟肽包含162个氨基酸，相互间同源性在98．8％-99．8％。将其成熟肽基因序列克隆入pQE30表达载体后，通过ITPG诱导，收集菌体高压破碎后提取包涵体并进行初步纯化，利用胱氨酸．半胱氨酸再氧化还原法对纯化后的变性液进行分段稀释法复性。细胞病变抑制法（CEF-VSV为检测系统）测定复性液的抗病毒比活性高达10^9U／mg以上．
- 马凤龙傅兴伦乔彦良李春荣李朝阳刘焕珍
- 关键词：包涵体复性
- 蛋鸡α-干扰素基因的克隆与在大肠杆菌的高效表达与复性研究
- 根据Gene Bank中鸡IFN-α基因设计引物对,利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡(SPF)的IFN-α基因,定名为ChIFN-Sl,与Gene Bank中IFN-α比较,ORF长度均为582个核苷酸,其成熟肽包含16...
- 马凤龙李朝阳乔彦良傅兴伦赵怀龙贾世玉陈如明陈国柱
- 关键词：包涵体复性
- 农牧企业纵向整合的陷阱
- 2007年
- 近几年一条龙模式已成为中国农牧企业最热衷的业务模式!饲料企业"种禽企业"屠宰企业等都在向着自己的上下游产业整合。传统一条龙企业如温氏、大成及新实现纵向整合企业六和、通威、利源等企业的成功,纵向一体化的模式几乎成为农牧企业最热衷的模式。中国农牧业从来没有像今天这样热闹,各类的企业都在进行不同程度的纵向整合,尤其是饲料企业在完成了行业内横向整合后,都把纵向整合作为做大的主要战略选择。本文就农牧企业纵向整合的原因、纵向整合的问题以及应对措施进行了探讨,也算是热潮中做出的冷静思考。
- 李朝阳
- 关键词：通用汽车饲料质量
