昆明医学院基础医学院神经科学研究所
- 作品数：390 被引量：982H指数：14
- 相关作者：黄桂琴刘苏吴林艳王昭君郝春光更多>>
- 相关机构：四川大学华西基础医学与法医学院四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室云南师范大学体育学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省自然科学基金云南省教育厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学哲学宗教更多>>
- 激肽释放酶结合蛋白对大鼠视神经不完全损伤后视网膜神经细胞的保护作用及轴突再生的研究被引量：6
- 2010年
- 目的探讨激肽释放酶结合蛋白(KBP)是否对体内视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存在保护和促进其轴突再生的作用。方法在距SD大鼠视神经球侧端0.5～1.0mm的地方夹持视神经,造成大鼠视神经不完全性损伤;在大鼠视神经损伤的模型中,行玻璃体腔分别注入KBP作为实验组和PBS为对照组;分别于损伤后7d,14d和21d取材,HE染色观察视网膜结构、测量视网膜厚度及RGCs的存活数量;提取术眼视神经行蛋白免疫印迹。根据统计学分析结果,明确KBP是否有视网膜神经节细胞保护和促进其轴突再生作用。结果①大鼠不完全视神经损伤模型建立成功。②通过HE染色,我们观察了视网膜各层结构变化,通过双盲法计数RGCs,和视网膜厚度测量,经统计学分析,组间差异具有统计学意义。③对神经再生的标记蛋白GAP-43进行Western-blot,统计学分析,组间GAP-43表达差异具有统计学意义。结论①KBP对视神经损伤后的RGCs具有保护作用。②KBP在视神经损伤后可能促进了视神经的轴突再生。
- 金顺祥曾勇万静万琨李圆圆李力燕王廷华冯忠堂李燕
- 关键词：视神经损伤视网膜神经节细胞视神经再生
- 金腰带治疗对大鼠损伤脊髓BDNF、NMDA受体表达及行为学的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究中草药金腰带治疗对脊髓损伤(SCI)大鼠行为学、脑源性神经营养因子(BDNF)表达及N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体水平的影响。方法 SD成年雄性大鼠,随机分为假手术组、脊髓挫伤组(SCI组)、脊髓挫伤后金腰带治疗组〔每日1次胃内灌服金腰带50mg/(kg.d),共7次〕。各组大鼠均在术后(0d、3d、10d、28d)进行后肢行为学评价(BBB运动功能评分)。术后13d,每组取8只大鼠麻醉后取损伤脊髓T10液氮中保存,采用[3 H]MK-801放射性配基分析法测定NMDA受体亲和力(Kd)和最大结合数量(Bmax);取术后28d组大鼠损伤脊髓进行免疫组织化学染色,观察BDNF在脊髓的定位及表达变化。结果 BBB评分SCI组大鼠各时间点均低于假手术组(P均<0.05),而金腰带治疗组术后各时间点均高于SCI组(P均<0.05)。SCI后13d,脊髓内NMDA受体Bmax较假手术组增高(P<0.05),金腰带组较SCI组减少(P<0.05);SCI后28d损伤处脊髓腹角、背角BDNF阳性神经元数量较假手术组增加(P<0.05),金腰带治疗组BDNF阳性神经元数量较SCI组进一步增加(P<0.05)。结论金腰带治疗能有效改善SCI大鼠后肢运动功能,增加脊髓组织中BDNF的表达和通过影响脊髓NMDA受体减轻脊髓继发性损伤,对SCI有一定的治疗与保护作用。
- 许争光杨峻吕志平孙艳华茹金李晓松刘江华但齐琴赵楠习阳彦斌
- 关键词：脑源性神经营养因子N-甲基-D-门冬氨酸受体
- 督脉电针刺激对脊髓全横断小鼠大脑皮质运动区BDNF表达的影响被引量：9
- 2012年
- 目的研究督脉电针刺激对脊髓全横断(spinal cord transection,SCT)小鼠大脑皮质运动区脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法将绿色荧光蛋白转基因小鼠在T9、T10间行SCT,随机分为电针(EA)组、对照组,每组9只小鼠。EA组于术后第1d开始电针刺激至第13d结束,对照组仅做SCT。术后28d时,取小鼠大脑皮质运动区脑组织,用免疫组化、原位杂交、逆转录-聚合酶链式反应、酶联免疫吸附试验检测皮质运动区BDNF的表达变化。结果 BDNF蛋白和mRNA阳性产物主要表达于皮质运动区神经元。EA组、对照组皮质运动区BDNF蛋白表达分别为(1973.41±194.71)pg/mg、(1615.22±137.21)pg/mg,差异有统计学意义(P<0.05);而BDNFmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论脊髓损伤后督脉电针刺激能够有效增加小鼠大脑皮质运动区BDNF蛋白表达,这有助于揭示电针刺激促进脊髓损伤修复的机制。
- 张向飞邹宇赵娅王廷华章为
- 关键词：脊髓全横断电针刺激脑源性神经营养因子小鼠
- 骨髓单个核细胞移植对大鼠损伤脑组织BDNF表达的调节被引量：1
- 2012年
- 目的探讨骨髓单个核细胞移植对创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、脑外伤组(TBI组)和TBI+单核细胞移植治疗组。建立自由落体TBI大鼠脑损伤模型,取骨髓分离纯化单个核细胞(5×106/mL),经颈动脉注射移植(单核细胞移植治疗组大鼠每只注射1mL)。各组动物分别于TBI后第1、3、7、10d进行神经功能缺损评分(NSS)。TBI后7d取损伤处脑组织行RT-PCR检测BDNF mRNA表达,TBI后10d取损伤处脑组织行原位杂交和免疫组化染色,确定BDNF mRNA和蛋白的细胞定位,计数BDNF阳性细胞数量变化。结果骨髓单个核细胞移植治疗明显减少TBI大鼠NSS评分,与TBI组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。BDNF主要分布于皮质神经元,移植组BDNF mRNA和蛋白表达水平均明显上调(P均<0.05)。结论单个核细胞移植能改善TBI大鼠神经功能,减少神经功能缺损。其机制可能与BDNF表达上调有关。
- 赵楠但齐琴刘俊马钢李俊彦金华习阳彦斌
- 关键词：创伤性脑损伤单个核细胞脑源性神经营养因子
- 海洛因依赖与5-HTR_(2A)基因多态性的关系被引量：7
- 2005年
- 目的探讨海洛因依赖和5-羟色胺2A受体(5-HTR2A)基因的关系。方法应用聚合酶链反应技术检测270例海洛因依赖者和230例正常对照的5-HTR2A基因-1438G/A多态性。结果海洛因依赖者和对照组5-HTR2A的基因和等位基因频率的差异具有统计学意义(2χ=6.593,P=0.037和χ2=5.347,P=0.021)。结论可初步认为5-HTR2A基因-1438G/A多态性与海洛因依赖有关联。
- 徐振波王廷华张杰胡海洋李晓斌杜舟林勇
- 关键词：海洛因依赖5-羟色胺2A受体多态性
- 大鼠神经营养因子4基因克隆及表达载体的构建
- 2006年
- 目的:克隆大鼠神经营养因子4全长基因,构建真核细胞表达质粒。方法:实验于2004-06/2005-12在昆明医学院神经病学研究所完成。选用成年SD大鼠,用反转录聚合酶链反应以大鼠海马总RNA为模板,应用基因重组技术将大鼠神经营养因子4的全长基因克隆到真核表达载体pcDAN3中,构建重组表达质粒。用限制性内切酶酶切分析和DNA测序对重组质粒载体pcDNA3-神经营养因子4进行鉴定。结果:提取的总RNA电泳出现18S和28S两个条带,聚合酶链反应扩增目的基因为720bp的条带,测序结果为720bp。重组质粒的测序结果经比对与GeneBank上报道的序列一致(M86742),说明神经营养因子4基因已成功克隆至pcDNA3载体中。结论:正确的克隆了大鼠神经营养因子4基因全序列。
- 朱榆红晏燕王廷华韩志桐邓兴力孙冰
- 关键词：神经组织蛋白质类
- 面神经损伤大鼠脑内移植绿色荧光蛋白转基因胎鼠神经干细胞的成活及迁移被引量：1
- 2009年
- 背景:目前面神经损伤后的修复主要集中在外周神经干,但面神经损伤后会导致部分中枢运动神经元凋亡。现阶段关于干细胞植入面神经损伤大鼠脑后对面神经核团内凋亡神经元的影响相关报道甚少。目的:观察大鼠面神经损伤后,脑内移植绿色荧光蛋白转基因胎鼠的神经干细胞的成活和迁移情况。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-07/12在昆明医学院神经科学研究所完成。材料:孕14～16d的绿色荧光蛋白转基因蛋白小鼠1只,用于制备转基因神经干细胞。清洁级SD雄性大鼠24只,随机分为3组:面神经损伤转基因细胞组12只、面神经损伤细胞培养液组6只、面神经正常转基因细胞组6只。方法:面神经损伤转基因细胞组、面神经损伤细胞培养液组大鼠建立面神经切断模型。造模后1周,行转基因神经干细胞立体定向移植,注射点为前囟后方11.30mm、背侧9.00mm、正中线位置。面神经损伤转基因细胞组、面神经正常转基因细胞组各注入10μL转基因神经干细胞悬液(含5×106个细胞),面神经损伤细胞培养液组注入10μL神经干细胞培养液,4周后制作脑组织冰冻切片。主要观察指标:荧光显微镜观察移植部位绿色荧光蛋白阳性神经干细胞的存活情况,及其向损伤侧面神经核团周围迁移的情况。结果:①移植处:面神经损伤转基因细胞组、面神经正常转基因细胞组均可见数量不等的绿色荧光蛋白阳性细胞,其中部分绿色荧光蛋白阳性细胞位于血管内;面神经损伤细胞培养液组未见绿色荧光蛋白阳性细胞。②面神经核团周围:仅面神经损伤转基因细胞组可见数量不等的绿色荧光蛋白阳性细胞迁移于损伤侧面神经核团周围,而健侧面神经核周围未见绿色荧光蛋白阳性细胞;余2组双侧面神经核周围均未见绿色荧光蛋白阳性细胞。③移植处与面神经核团周围之间:未见绿色荧光蛋白阳�
- 李宗芳刘流叶峻杰田伟王廷华王福科
- 关键词：神经干细胞面神经
- 成年恒河猴和大鼠脊髓神经元及星型胶质细胞的特异识别被引量：1
- 2011年
- 目的研究成年恒河猴和大鼠脊髓神经元及星型胶质特异标记核蛋白(NeuN)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在两类动物脊髓的分布及其特异性.方法取成年恒河猴和大鼠脊髓组织,冰冻切片,用NeuN抗体和GFAP抗体行免疫组织化学SP法染色,观察NeuN和GFAP在大鼠和猴脊髓的免疫反应分布,探讨抗体标识特异性.结果猴和大鼠脊髓灰质神经元胞浆、突起和胞核均有NeuN阳性染色,但大鼠脊髓染色强于猴脊髓染色,特异性更高.GFAP在大鼠和猴脊髓星型胶质细胞均有分布,白质强于灰质,两者类似.结论识别鼠类的神经元核蛋白抗体NeuN和GFAP抗体可于灵长类脊髓染色,能有效标示灵长类脊髓神经元和星型胶质细胞.
- 李玉王波但齐琴王廷华
- 关键词：脊髓NEUNGFAP
- 脊髓腹角神经元共存NGF,BDNF,NT_3,NT_4和GDNF被引量：4
- 2000年
- 用NGF ,BDNF ,NT3,NT4 和GDNF抗血清 ,以免疫组织化学方法观察NGF ,BDNF ,NT3,NT4 及GDNF在成年猫L5脊髓腹角神经元是否共存 结果 :L5脊髓腹角神经元均含有上述被检测的 5种神经营养因子的免疫反应物 ,表明腹角神经元共存NGF ,BDNF ,NT3,NT4 及GDNF ,提示这
- 李维平王廷华徐蔚
- 关键词：NGFNT3GDNF
- 鸡胚背根节神经细胞微团悬滴培养法的建立及应用
- 2000年
- 采用神经细胞微团悬滴培养法培养Hamburger35期鸡胚背根节 (dorsalrootganglion ,DRG)神经元 .结果 ,神经元于培养 2 4h后开始生长 ,5～ 8d神经突起联成网状 ,说明本法可行 .该法为今后进一步探讨神经营养因子对培养神经元存活、生长的影响奠定了基础 .
- 王廷华陈彦红张辉董丁贵张晓
- 关键词：鸡胚背根节
