四川大学生命科学学院分子生物学与生物技术重点实验室
- 作品数：43 被引量：608H指数：14
- 相关作者：王焰玲杨晓娟胥成浩田刚赵莲更多>>
- 相关机构：广西师范大学环境与资源学院广西师范大学环境与资源学院资源与环境学系成都中医药大学针灸推拿学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金成都大熊猫繁育研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 环状芽孢杆菌C-2几丁酶基因在荧光假单胞菌中的表达被引量：2
- 2002年
- 将已克隆到的环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)C-2的几丁酶基因chi1片段克隆到质粒载体pUXBF5中，得到重组质粒pUXCH1，该重组质粒在大肠杆菌中可以表达产生具有生物活性的几丁酶并分泌到胞外．将pUXCH1分别利用感受态法和三亲本杂交法转化荧光假单胞菌(Psendomonas fluorescens)，在含有卡拉霉素的金氏B平板上筛得转化子．但将转化子点种于几丁质平板上却不能产生水解圈，提取细胞内容物后用比色法也没有检测到有效的酶活性．该研究表明环状芽孢杆菌的几丁酶基因chi1已经被成功的整合到荧光假单胞菌的染色体上，但却没有表达或表达效率极低，这可能是由于荧光假单胞菌的表达系统不能正确有效的识别存在于该chi1几丁酶基因片段中的环状芽孢杆菌基因启动子而造成的．
- 田刚王焰玲
- 关键词：环状芽孢杆菌荧光假单胞菌基因表达重组质粒
- 党参挥发油及脂溶性化学成分的研究被引量：28
- 2000年
- 目的 对党参挥发油及脂溶性物质提取和分析。方法 建立乙醚冷浸 索氏提取 水蒸汽蒸馏的方法 ,提取物化学成分经GC分离 ,用GC MS进行鉴定。结果 本法收率是其它方法的 2 0～ 5 0倍 ;分离出 2 6 8种化合物 ,利用加标定性 ,GC MS联用和计算机数据库检索鉴定出 6 7种物质。结论 本方法适于天然植物药物挥发油及脂溶性物质定性定量分析。所获数据 ,为党参药理药效作用的研究提供了科学的依据。
- 谢君张义正顾永祚
- 关键词：化学成分
- 应用基因芯片研究高胆固醇血症的分子机理
- 目的和意义:高胆固醇血症是动脉粥样硬化的重要危险因子,动脉粥样硬化是影响人类健康最严重、最常见的心血管疾病之一,是人类死亡的一个主要病因。本研究采用饲喂高胆固醇食物造成高胆固醇血症动物模型,应用基因芯片技术研究高胆固醇血...
- 李珉王刚张义正
- 关键词：高胆固醇血症基因芯片基因病理小鼠
- 文献传递
- 解淀粉芽孢杆菌DC-4豆豉溶栓酶成熟肽编码序列的克隆及表达被引量：40
- 2002年
- 利用PCR方法从解淀粉芽孢杆菌DC 4总DNA中扩增出豆豉溶栓酶 (DFE)成熟肽编码区片段 .测序结果表明 :DFE成熟肽编码区长 82 5bp,编码 2 75个氨基酸残基 ,分子量为 2 7.7× 10 3 ,推导的N’ -端氨基酸序列与豆豉溶栓酶N’ -端氨基酸测序结果完全一致 ,说明克隆到的基因确实是豆豉溶栓酶基因 .同源性分析表明 ,DFE成熟肽编码区的核苷酸和氨基酸序列与日本纳豆激酶的同源性分别为 80 .0 %和 86 .5 % ,这提示豆豉溶栓酶可能是一种新型的溶栓酶 .将表达质粒pET Nde转化E .coliBL2 1(DE3)中 ,IPTG可诱导表达大量的DFE融合蛋白 ,占菌体可溶性蛋白的 4 0 % ,主要以包涵体的形式存在 .图 3表 1参
- 彭勇张义正
- 关键词：豆鼓成熟肽克隆
- 615小鼠MHC Ⅰ cDNA重组逆转录病毒基因治疗载体的构建和包装被引量：5
- 2002年
- 目的:制备615小鼠MHCⅠ目的基因(H-2Kk)载体,获得高表达MHCⅠ分子功能的单克隆细胞株。方法:将615小鼠MHCⅠ(H-2Kk)cDNA定向连接至PLXSN逆转录病毒质粒,转染E.coli JM109,限制性酶切分析法筛选出重组质粒PLXSN-H-2Kk,继而转染PA317细胞,经G418筛选获得抗性PA317单克隆细胞株,并转染NIH3T3细胞,依抗性NIH3T3细胞克隆数目,鉴定病毒液的滴度和PA317单克隆细胞株。结果:转染成功的病毒液滴度位于1.6×104～1.1×105 CFU/ml之间,PA317单克隆细胞株成片生长良好,并高表达H-2Kk产物。结论:H-2Kk cDNA重组逆转录病毒质粒的成功构建、包装和滴度鉴定为在615小鼠上进行恶性肿瘤的MHC Ⅰ转基因治疗奠定了物质基础。
- 龚浩李龙江温玉明王昌美陈俊杰彭文珍
- 关键词：基因治疗基因载体
- 应用基因芯片研究针刺治疗高胆固醇血症的基因表达
- 目的和意义:高胆固醇血症是动脉粥样硬化的重要危险因子,动脉粥样硬化是影响人类健康最严重、最常见的心血管疾病之一,是人类死亡的一个主要病因。已有的临床实践证明,针刺丰隆穴对高胆固醇血症有确切的疗效,但其疗效机理缺乏系统研究...
- 李珉赵征宇张义正
- 关键词：基因芯片高胆固醇血症针刺基因表达小鼠
- 文献传递
- 615小鼠H-2Kk基因cDNA的克隆、序列测定和分析
- Objective: To clone and sequence the MHC I molecular antigen recognizing gene (H-2Kk) of 615 mice, and to prov...
- 龚浩李龙江陈俊杰王若菡温玉明王昌美
- 文献传递
- 碱性蛋白酶№.8的脱毛条件研究被引量：8
- 2002年
- 本文对新型碱性蛋白酶№ 8在制革浸水、脱毛、软化应用中的最适条件进行了系统研究。结果表明 :碱性蛋白酶№ 8应用的最适 pH为 10、浸水最适浓度为 30 - 5 0u/g ,脱毛最适浓度为 10 0 - 15 0u/g ,软化最适浓度为 5 0 - 10 0u/g ,温度 18- 38℃。通过与 1398酶的脱毛效果 ,和胰酶的软化效果比较以及酶脱毛对后工序的影响和工艺平衡等方面的研究 ,确定№ 8酶应用的最适条件 ,为该酶今后在制革生产中得到应用 。
- 刘彦杨志华张义正
- 关键词：酶脱毛酶软化皮革清洁化工艺
- 人端粒酶逆转录酶真核表达质粒转染人成纤维细胞的体外培养及生物学特性研究被引量：15
- 2002年
- 目的 分析人端粒酶逆转录酶 (h TERT)真核表达质粒 p GRN14 5转染人成纤维细胞的生物学特性。方法 体外分离培养小儿包皮成纤维细胞 ,脂质体法将构建的 p GRN14 5转染人成纤维细胞 ,经潮霉素 B筛选 ,扩增培养阳性克隆。 RT- PCR法、TRAP- PCR法分析细胞端粒酶活性。流式细胞术检测细胞增殖周期及细胞凋亡率 ,对转染后细胞行染色体核型分析及免疫组织化学法检测胶原分泌能力。结果 转染后培养的人成纤维细胞形态与转染前相比无明显改变 ,转染细胞稳定地表达端粒酶活性 ,流式细胞术分析转染前后成纤维细胞的增殖周期无明显改变 ,细胞凋亡率较转染前降低。经 p GRN14 5转染的人成纤维细胞保持正常的二倍体核型 ,具有正常分泌 、 型胶原的能力。结论 p GRN14 5转染的人成纤维细胞稳定地表达端粒酶活性 ,细胞寿命明显延长。
- 解慧琪杨志明屈艺李秀群秦廷武赵金梅刘军
- 关键词：人端粒酶逆转录酶真核表达质粒体外培养生物学特性端粒酶成纤维细胞
- 纳豆杆菌纳豆激酶成熟肽基因的克隆与同源性分析被引量：10
- 2002年
- 纳豆杆菌 (Bacillusnatto)是从日本传统食品纳豆中筛选出来的 ,它具有较强的溶栓作用 .根据已发表的纳豆激酶基因序列设计一对引物 ,利用聚合酶链式反应 (PCR) ,从纳豆杆菌的基因组DNA中扩增和克隆到纳豆激酶基因 .序列分析表明 ,该纳豆激酶基因成熟肽编码区含有 82 5bp ,编码 2 75个氨基酸残基 ,与文献已报道的序列分别有 93.4 %和 94 .5 %的同源性 ,显示了极高的同源性 .但该基因与该室克隆的豆豉溶栓酶基因的同源性仅为 80 .1%,这表明纳豆激酶与豆豉溶栓酶确实不是同一种酶 .
- 彭勇黄庆张义正
- 关键词：纳豆激酶基因克隆同源性分析
