重庆理工大学化学化工学院制药工程系
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：张继兰陈海容梅翔更多>>
- 相关机构：重庆医科大学药学院重庆医科大学图书馆更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 重组人睫状神经因子的表达、纯化以及聚乙二醇修饰被引量：2
- 2009年
- 目的研究重组人睫状神经因子(rh-CNTF)的表达、纯化及聚乙二醇化修饰、纯化方法。方法重组人睫状神经因子(rh-CNTF)工程菌经37℃培养至对数生长期,加入IPTG诱导4h,经QSepharose F.F凝胶柱纯化和复性后得到纯化的rh-CNTF。以体外培养鸡胚背根神经节(DRG)方法测定重组蛋白rh-CNTF的神经营养活性。用单甲氧基聚乙二醇丁醛(mPEG-ButyrALD-20k)对rh-CNTF进行修饰,所得修饰产物经DEAESepharose F.F和Superdex 75凝胶分离纯化后获得mPEG-rh-CNTF偶联物。结果目的蛋白占总蛋白30%左右,为包涵体,经QSepharose F.F凝胶柱纯化和复性,获得纯度达90%的rh-CNTF。表达的rh-CNTF能促进培养的鸡胚背根神经节神经突起的生长。修饰后的单聚PEG-rhCNTF经DEAESepharose F.F和Superdex 75凝胶纯化后纯度达到95%。结论确立了rh-CNTF蛋白表达纯化及PEG修饰的方法。
- 王彦范开夏永鹏张继兰梅翔陈海容李秀梅邱宗荫
- 关键词：纯化聚乙二醇修饰
- 喉癌中HPV不同亚型的检测及测序被引量：4
- 2009年
- 目的:检测人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)各型DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用。方法:用PCR检测123例喉癌组织及123例喉粘膜上皮组织中HPV各型DNA。同时进行DNA测序,结果:在123例喉癌标本中,HPV-L1,-16E6/E7,-18E6/E7阳性率都明显高于其他各型。123例喉粘膜PCR结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高;HPV-L1的阳性率高于HPV-16E6、E7,随着组织病变程度加重,HPV-L1的检出率逐渐增高。结论:HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用;L1片段适合用于检测HPV感染。
- 彭方毅姜海蓉刘芳杜志银林治华彭方亮赵卫兵
- 关键词：人乳头瘤病毒聚合酶链反应喉癌
- 重组人睫状神经因子聚乙二醇化条件的优化被引量：1
- 2009年
- 目的对单甲氧基聚乙二醇丁醛(mPEG-ButyrALD,相对分子质量20×103)修饰重组人睫状神经因子(rh-CNTF)的条件进行优化。方法优化了pH值、温度、时间、rh-CNTF与PEG的修饰比例、rh-CNTF浓度等修饰条件,并对修饰产物行分离纯化。鸡胚背根节培养法检测和比较rh-CNTF和PEG-rhCNTF的体外生物学活性。结果rh-CNTF与PEG的修饰比例、rh-CNTF的浓度和pH值是主要影响因素,最佳pH为6.5,最佳rh-CNTF浓度为1～2 mg/ml,rh-CNTF与PEG的最佳质量比为1∶1,时间和温度影响甚微。rh-CNTF的体外神经营养活性约为PEG-rhCNTF的2倍。结论本法优化了修饰重组人睫状神经因子的条件。
- 王彦范开夏永鹏张继兰李秀梅邱宗荫
- 关键词：聚乙二醇修饰
