湖州申科生物技术有限公司
- 作品数：26 被引量：3H指数：1
- 相关机构：中国科学院上海生命科学研究院湖州营养与健康产业创新中心中国食品药品检定研究院广州派真生物技术有限公司更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程金属学及工艺更多>>
- 检测小鼠细胞残留DNA的引物及方法
- 本发明提供了检测小鼠细胞，例如NS0或SP2/0细胞基因组DNA的引物对、包含该引物对的试剂盒以及利用该引物对检测小鼠细胞基因组DNA的方法，所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检...
- 王兰武刚吴婉欣宗伟英朱冰美
- 文献传递
- 用于检测MDCK细胞DNA片段大小分布的引物对及检测方法
- 本发明涉及生物检测领域，尤其涉及用于检测MDCK细胞DNA片段大小分布的引物对、及检测方法，所述引物对至少包含4组引物对；其中：各引物对中的正向引物和反向引物分别特异性结合于MDCK细胞基因组DNA上SEQ ID NO:...
- 吴婉欣袁小铃宗伟英吴晓双
- 文献传递
- 一种检测产黄青霉菌基因组DNA的方法
- 本发明提供了检测产黄青霉菌基因组DNA的引物对、包含本发明引物对的检测试剂或试剂盒以及利用所述引物对检测产黄青霉菌基因组DNA的方法，所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检测方法操...
- 许明哲王琰宗伟英吴晓双李进张培培姚尚辰尹利辉王兰朱伟宏吴怡
- 一种评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的方法
- 本发明提供一种评估HCP检测用多克隆抗体的覆盖率的方法，所述方法先将HCP多克隆抗体偶联于固体基材，再利用这种固体基材捕获HCP样品中的蛋白，随后分离所捕获的HCP蛋白并检测HCP样品中的蛋白总数和所捕获蛋白的数量就能够...
- 杨志行豆敏华富金金史斐斐邹佳
- 文献传递
- 建立CAR-T细胞治疗产品质量控制检测方法及其定量参考品的数字PCR方法研究被引量：3
- 2021年
- 目的:本研究建立嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗产品质量控制中猿猴病毒40大T抗原(SV40LTA),腺病毒早期区域1A蛋白(E1A)和质粒残留水平的荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测方法,同时采用微流控芯片式数字PCR技术对质粒定量参考品进行赋值。方法:通过建立多重荧光定量PCR的方法,在一个反应中同时检测SV40LTA和E1A的残留水平。针对目前慢病毒等包装技术存在多种质粒组合系统(如四质粒和五质粒),对质粒的残留检测标准难以统一,本研究从同源性很高的复制子区域入手,设计和筛选引物探针,能同时检测多种不同质粒的总体残留水平。建立数字PCR技术分别对SV40LTA和E1A的质粒定量参考品拷贝数浓度标定方法进行方法学验证和赋值。结果:SV40LTA和E1A双重定量PCR方法的特异性好,最低定量限分别达到2.80×10和2.98×10 copies·μL^(-1)。质粒残留检测法的最低定量限可达到2.80×10 copies·μL^(-1)。通过采用目前快速发展的数字PCR技术进行赋值,经典吸光度法计算质粒定量参考品SV40LTA和E1A的拷贝数浓度为2.80×10^(8)和2.98×10^(8) copies·μL^(-1);经数字PCR标定分别为1.06×10^(8)和1.21×10^(8) copies·μL^(-1)。结论:本研究建立的SV40LTA,E1A和质粒检测方法灵敏度较高、特异性强,能满足CAR-T细胞治疗产品的质量控制要求。经典的吸光度法定值的结果大于数字PCR方法,大约有2倍左右的差别。
- 豆敏华朱冰美宗伟英吴晓双杨志行
- 关键词：细胞治疗
- 首批HEK293细胞DNA含量测定国家标准品的制备
- 2024年
- 目的制备HEK293细胞DNA含量测定用国家标准品,以期为行业内HEK293细胞残余DNA的测定提供支持。方法使用Genomic-tip 500/G以及基因组DNA纯化试剂制备HEK293细胞DNA,以其为标准物质原料,采用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法进行纯度和含量筛选,随后稀释至浓度约为100 ng/μL后,按160μL/支进行分装。组织5家不同实验室,采用紫外分光光度法进行协作标定,并评价其稳定性和适用性。结果制备的HEK293细胞DNA国家标准品经检测,A260/A280均在1.8~2.0之间,电泳图谱为单一条带,符合规定。该标准品经5家实验室协作标定,共得到78个有效数据,平均含量为104.8 ng/μL,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为4.2%,均数的95%可信区间为103.8~105.8 ng/μL,单次测定的95%参考值范围为96.0~113.6 ng/μL,平均可信限率为1.0%,推荐保存条件为-80℃。采用2个不同型号的荧光定量PCR仪进行适用性研究,该标准品在0.3~3000 pg/反应范围内适用性良好,扩增效率分别为101%和95%,标准曲线R^(2)分别为0.9992和0.9995。结论该批HEK293细胞DNA国家标准品各项指标均符合要求,可作为国家标准品用于荧光定量PCR检测,含量定为104.8 ng/μL,批号为270039-202301。
- 王光裕杨靖清魏长龙周泽鑫杨志行黄钰周勇
- 关键词：HEK293细胞国家标准品荧光定量PCR
- 分析和检测慢病毒载体介导的目的基因的拷贝数的方法
- 本发明提供了一种分析和检测慢病毒载体介导的目的基因的拷贝数的方法。具体地，本发明采用双重荧光定量PCR方法，检测慢病毒载体系统中含目的基因转移质粒上的包装序列Psi和宿主细胞中单拷贝基因，计算得到样本中目的基因拷贝数/细...
- 豆敏华史斐斐陈秋燕
- 川楝子提取物在制备抗病毒药物中的应用及其提取方法
- 本发明公开了一种川楝子提取物的提取方法，所述方法包括如下步骤：（a）将川楝子用乙醇回流提取；（b）用大孔吸附树脂柱纯化。本发明的川楝子提取物具有较好的抗病毒作用，可用于制备抗疱疹病毒、水疱性口炎病毒及流感病毒药物或药物组...
- 王滔王永兵魏晨宗伟英肖功胜
- 文献传递
- 全自动核酸提取仪（rHCDpurify前处理系统）
- 1.本外观设计产品的名称：全自动核酸提取仪（rHCDpurify前处理系统）。;2.本外观设计产品的用途：本外观设计产品是一种核酸提取仪器，针对生物制品核酸检测前处理要求，用于生物制品中宿主细胞DNA或支原体DNA检测的...
- 杨志行王允诺朱伟宏陈晴
- 检测水稻重组蛋白质中残留DNA的引物对及方法
- 本发明提供了检测水稻重组蛋白质中残留DNA的引物对及探针、包含该引物对及探针的试剂盒以及利用该引物对及探针检测水稻重组蛋白质中残留DNA的方法，所述引物对及探针特异性结合水稻基因组DNA上SEQ ID NO:1所示区段。...
- 吴婉欣豆敏华唐佳
- 文献传递
