中国科学院上海生命科学研究院湖州营养与健康产业创新中心
- 作品数：62 被引量：19H指数：3
- 相关作者：肖功胜雷辉王滔王永兵沈雯更多>>
- 相关机构：湖州申科生物技术有限公司中国食品药品检定研究院中国科学院更多>>
- 发文基金：湖州市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程金属学及工艺更多>>
- 建立CAR-T细胞治疗产品质量控制检测方法及其定量参考品的数字PCR方法研究被引量：3
- 2021年
- 目的:本研究建立嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗产品质量控制中猿猴病毒40大T抗原(SV40LTA),腺病毒早期区域1A蛋白(E1A)和质粒残留水平的荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测方法,同时采用微流控芯片式数字PCR技术对质粒定量参考品进行赋值。方法:通过建立多重荧光定量PCR的方法,在一个反应中同时检测SV40LTA和E1A的残留水平。针对目前慢病毒等包装技术存在多种质粒组合系统(如四质粒和五质粒),对质粒的残留检测标准难以统一,本研究从同源性很高的复制子区域入手,设计和筛选引物探针,能同时检测多种不同质粒的总体残留水平。建立数字PCR技术分别对SV40LTA和E1A的质粒定量参考品拷贝数浓度标定方法进行方法学验证和赋值。结果:SV40LTA和E1A双重定量PCR方法的特异性好,最低定量限分别达到2.80×10和2.98×10 copies·μL^(-1)。质粒残留检测法的最低定量限可达到2.80×10 copies·μL^(-1)。通过采用目前快速发展的数字PCR技术进行赋值,经典吸光度法计算质粒定量参考品SV40LTA和E1A的拷贝数浓度为2.80×10^(8)和2.98×10^(8) copies·μL^(-1);经数字PCR标定分别为1.06×10^(8)和1.21×10^(8) copies·μL^(-1)。结论:本研究建立的SV40LTA,E1A和质粒检测方法灵敏度较高、特异性强,能满足CAR-T细胞治疗产品的质量控制要求。经典的吸光度法定值的结果大于数字PCR方法,大约有2倍左右的差别。
- 豆敏华朱冰美宗伟英吴晓双杨志行
- 关键词：细胞治疗
- 检测小鼠细胞残留DNA的引物及方法
- 本发明提供了检测小鼠细胞，例如NS0或SP2/0细胞基因组DNA的引物对、包含该引物对的试剂盒以及利用该引物对检测小鼠细胞基因组DNA的方法，所述引物对特异性结合于SEQ ID NO:1所示序列。利用所述引物对的PCR检...
- 王兰武刚吴婉欣宗伟英朱冰美
- 文献传递
- 紫草素的医药用途
- 本发明公开了一种紫草素用于制备抗病毒药物的医药用途，此外还公开了一种药物组合物，该组合物以治疗有效量的紫草素为活性成分。本发明公开了一种紫草素的全新的医药用途，有助于紫草素的进一步开发利用。
- 王滔王永兵宗伟英肖功胜沈雯雷辉席晓荣
- 检测CHO细胞DNA的方法
- 本发明提供了检测CHO细胞基因组DNA的引物对、包含该引物对的试剂盒以及利用该引物对检测CHO细胞基因组DNA的方法，所述引物对特异性结合CHO细胞基因组DNA上SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示区段。利...
- 孙玮洁杨志行吴婉欣文明
- 文献传递
- 一种盐酸米诺环素缓释片及其制备方法
- 本发明涉及一种盐酸米诺环素缓释片及其制备方法，由片芯和薄膜衣组成，其中片芯包含盐酸米诺环素、缓释材料、粘合剂、填充剂、润滑剂，薄膜衣包含成膜材料，所述制备方法是采用高剪切湿法制粒和沸腾床干燥获得，其中流化床干燥的物料温度...
- 蒋海松王滔王锦刚肖功胜张川川
- 文献传递
- 甘草次酸的医药用途
- 本发明涉及医药学领域，特别是涉及一种甘草次酸的医药用途。本发明的甘草次酸可用于治疗药物性肝损伤。
- 王滔魏晨肖功胜宗伟英
- 文献传递
- 胱抑素C免疫荧光即时定量检测技术的研发
- 杨志行朱进郭彦飞黄昌妹孙玮洁文明扈书霞朱冰美张乐
- 该项目通过人工合成基因技术，成功构建了胱抑素C高效原核表达载体；大量培养细胞表达胱抑素C抗原，通过亲和层析法纯化出高纯度高活性的胱抑素C抗原（纯度大于95%），利用纯化的胱抑素C抗原免疫小鼠，通过杂交瘤细胞融合技术，筛选...
- 关键词：
- 关键词：检测试剂盒
- 甘草酸或盐及其衍生物的制药用途
- 本发明涉及医药学领域，特别是涉及一种甘草酸或盐及其衍生物的医药用途。本发明的甘草酸或盐及其衍生物可用于治疗炎症性组织二次损伤。
- 师晓栋王滔邓红雨宗伟英都培双肖辉肖功胜
- 文献传递
- 肉豆蔻提取物的应用
- 本发明公开了肉豆蔻提取物在制备抗痛风药物、食品或保健品中的应用。本发明的研究发现肉豆蔻提取物对黄嘌呤氧化酶和肿瘤坏死因子α有较强的抑制作用，说明本发明的肉豆蔻提取物具有较好的抗痛风作用，可用于制备抗痛风药物、食品或保健品...
- 王滔王永兵魏晨宗伟英肖功胜蒋文丹
- 文献传递
- 红豆蔻提取物及其医药用途
- 本发明涉及医药学领域，特别是涉及一种红豆蔻提取物及其医药用途。本发明的红豆蔻提取物可用于治疗炎性病症。
- 王滔魏晨宗伟英肖功胜苏凡
- 文献传递
