辽宁师范大学生命科学学院海洋生物功能基因及蛋白质组学研究所
- 作品数：34 被引量：86H指数：6
- 相关作者：芦静张艳戴鹏刘慧玲乔旭更多>>
- 相关机构：大连医科大学药学院药理教研室大连医科大学药学院大连大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 日本七鳃鳗Lj-RGD3缺失突变体Lj-113人工合成序列的基因克隆与蛋白表达被引量：3
- 2011年
- 目的获得突变体Lj-113的基因重组蛋白,为其与野生型活性比较打下物质基础。方法对日本七鳃鳗RGD缺失突变体Lj-113进行基因全序列人工合成,并以NdeI与HindIII为酶切位点构建于pET23b载体上,获得阳性基因重组质粒pET23b-Lj113。CaC l2法将重组质粒转化入大肠杆菌BL21表达菌中,对其进行终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达,并对表达蛋白进行组氨酸亲和层析纯化蛋白。结果成功获得七鳃鳗RGD缺失突变体的基因重组蛋白的可溶性表达。结论人工合成基因序列可通过分子克隆方法获得其蛋白的表达。
- 张亚前李庆伟吕莉刘欣王继红
- 关键词：七鳃鳗缺失突变体基因克隆蛋白表达
- RGD毒素肽研究进展
- RGD毒素肽是某些有毒生物唾液腺分泌物中特有的以RGD(Arg-Gly-Asp)序列为特征性模体(motif)的小分子量蛋白.其可凭借蛋白质一级结构上特有的RGD分子序列而成为细胞外基质(ECM)与细胞整合素(integ...
- 王继红吴毓韩晓曦李庆伟
- 关键词：整合素血小板聚集血管新生
- 文献传递
- 重组日本七鳃鳗毒素蛋白rLj-RGD3及其4种突变体抗血小板聚集活性的比较
- 2015年
- 目的初步探讨r Lj-RGD3分子中3个RGD模体对野生型r Lj-RGD3抗血小板聚集活性的作用。方法全序列人工合成并重组表达、纯化4种r Lj-RGD3缺失突变体蛋白。制备富血小板血浆(PRP),与不同浓度各重组突变体蛋白共温浴,采用Born氏比浊法测定ADP诱导的血小板聚集率,并计算血小板聚集抑制百分率,以评价野生型r Lj-RGD3及其4种突变体蛋白的抗血小板聚集活性。结果成功重组表达纯化4种可溶性r Lj-RGD3缺失突变体蛋白,r Lj-RGD3抗血小板聚集活性最高,r Lj-RGD3-0不具有抗血小板聚集功能,r LjRGD3-1、r Lj-RGD3-2及r Lj-RGD3-3活性相当。结论 3个RGD模体在r Lj-RGD3抗血小板聚集功能中均十分重要,并不分伯仲,而r Lj-RGD3因分子中含有3个RGD模体而活性最强。
- 吕莉王继红邵钫钰郑媛媛王跃李玲欣肖蓉李庆伟
- 关键词：七鳃鳗突变体血小板血小板聚集
- rLj-RGD3对正常大鼠及角叉菜胶致尾混合血栓大鼠血液流变学的影响
- 2015年
- 目的研究r Lj-RGD3对正常大鼠及角叉菜胶致尾血栓模型大鼠的血液流变学的影响。方法测定给予不同剂量r Lj-RGD3后正常大鼠全血和血浆黏度,以评价r Lj-RGD3对正常大鼠血液流变学的影响;以角叉菜胶诱导大鼠尾部血栓模型,测定给予不同剂量r Lj-RGD3后血栓模型大鼠全血和血浆黏度,以评价r Lj-RGD3对血栓大鼠血液流变学的影响。结果与空白组相比,r Lj-RGD3对全血黏度及血浆黏度无明显影响;与血栓模型组相比,r Lj-RGD3呈剂量依赖性地降低全血比黏度浆和血浆比黏度的升高。结论 r Lj-RGD3可降低血栓模型大鼠血黏度,而对正常大鼠血液黏度无明显影响。
- 吕莉王继红张艳邵钫钰蒋隽舒王跃肖蓉李庆伟
- 关键词：角叉菜胶全血黏度血浆黏度
- 富含半胱氨酸分泌蛋白的结构及其离子通道方面作用的研究进展被引量：4
- 2009年
- 富含半胱氨酸分泌蛋白(Cystein-rich secretory protein,简称CRISP),在进化上非常保守,大部分成员功能尚不明了.研究发现,CRISP除广泛存在于哺乳动物、一些爬行动物和软体动物体内,近来我们还在日本七鳃鳗口腔腺中发现新的CRISP家族成员.对这些CRISP家族成员做简要综述.
- 李庆伟薛壮刘欣
- 关键词：CRISP爬行动物七鳃鳗口腔腺
- CD9与免疫细胞、免疫因子相互作用及其功能的研究被引量：1
- 2010年
- CD9是Tetraspanins家族成员之一,属于白细胞分化抗原中的一种,它参与细胞黏附、运动、激活和分化等.近年有研究表明:CD9在激活T细胞、作为B细胞分子标记物以及诱导DC和MHC分子对抗原的提呈等方面都发挥着重要的作用.值得一提的是CD9在适应性免疫系统的作用可能追溯到原始的无颌类脊椎动物.对CD9与免疫细胞以及免疫因子的相互作用进行简要综述,为进一步理解和深入研究CD9在适应性免疫系统中所扮演的角色提供参考.
- 李庆伟苏鹏刘晓忠吴芬芳刘欣
- 关键词：CD9免疫细胞免疫因子相互作用
- 抗增殖蛋白研究进展被引量：8
- 2010年
- 抗增殖蛋白作为一种高度保守的蛋白广泛分布于细菌、原虫、酵母等多种生物细胞中,主要定位于细胞膜、线粒体内膜、细胞核中,参与细胞增殖、分化、衰老、凋亡等多种生物学进程。由于抗增殖蛋白结构进化上的保守性和功能的多样性,正逐渐引起广泛的关注。该文正是基于抗增殖蛋白重要的生物学意义,通过对其基因结构和功能的分析,系统地阐述了它在生物体中发挥的重要作用,并对其应用前景作以展望。
- 陈操刘欣孙晶李庆伟
- 关键词：生物学功能
- 重组七鳃鳗细胞毒素蛋白rLj-RGD3表达及对Hela细胞活性的影响被引量：8
- 2009年
- 为研究重组七鳃鳗细胞毒素蛋白rLj-RGD3的抗肿瘤活性,确定其生物学地位及意义,本研究提取成体七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺组织总RNA,经RT-PCR获得cDNA序列长度为357bp的目的基因片段,将其克隆于pET23b载体,获得带有组氨酸标签的分子量为15kD的基因重组蛋白rLj-RGD3的高效可溶性表达,通过组氨酸亲和层析纯化蛋白。采用MTT法检测不同浓度rLj-RGD3对bFGF诱导下的Hela细胞增殖的抑制作用,结果表明rLj-RGD3能显著抑制Hela细胞的增殖,IC50为2.6μmol/L。rLj-RGD3作用后的Hela细胞经Hoechst染色及DNAladder检测结果显示,细胞均发生凋亡。rLj-RGD3对Hela细胞黏附玻连蛋白(VN)作用的实验结果为有效抑制。采用Transwell细胞培养板对bFGF诱导下的Hela细胞迁移实验表明,rLj-RGD3能够抑制Hela细胞的迁移,且抑制率达60%。采用人工基质膜基质Matrigel及Transwell模仿体内环境研究rLj-RGD3对Hela细胞浸润行为实验显示,以bFGF为趋化剂的Hela细胞穿透Matrigel的浸润行为明显受到抑制。以上研究表明,rLj-RGD3具有典型的RGD毒素蛋白的功能,有望应用于抗肿瘤基因工程药物开发,具有重要的生物学意义。
- 张丕桥王继红刘欣褚丹李庆伟
- 关键词：七鳃鳗RGD模体整合素
- 日本七鳃鳗CD9分子的基因克隆、表达以及免疫学活性研究
- D9分子是4次跨膜蛋白超家族的成员,目前研究证明,该分子在细胞粘附和机体免疫应答中发挥着重要的作用。作为无颌类脊椎动物的代表之一,日本七鳃鳗因其独特的进化地位而受到人们关注,成为脊椎动物免疫系统起源与进化研究的新型模式生...
- 苏鹏吴芬芳刘欣李庆伟
- 可变淋巴受体起源与功能演化研究
- 本文主要利用Uniprot在线软件，根据VLRs的基本结构，在已知所有物种基因组数据库中寻找VLRs的踪迹。同时，将这些由不同物种基因组数据库中找到的，与VLRs具有相同结构的分子命名为VLRs-like分子，并且对不同...
- 韩英伦刘欣李庆伟
- 关键词：基因组数据库七鳃鳗
- 文献传递
