南方医科大学药学院新药评价中心
- 作品数：25 被引量：115H指数：6
- 相关作者：刘霭明吴伟斌刘晓萍姚春霞赵必舜更多>>
- 相关机构：中山大学中山医学院寄生虫学教研室中山大学中山医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市科技计划项目贵州省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 端粒酶抑制剂筛选模型诱饵载体的构建与转化
- 2009年
- 目的构建含不同人端粒酶RNA基因片段的诱饵融合表达载体并转化酵母,用于酵母三杂交方法筛选端粒酶抑制剂。方法采用RT-PCR方法从肿瘤细胞中扩增人端粒酶RNA(hTR)基因后,分别扩增hTR基因假结合体区CR4-CR5及H/ACA和CR7区hTR基因片段,纯化分离定向克隆到pRH3诱饵质粒,构建包含不同hTR目的基因片段的重组质粒,转化大肠杆菌,经PCR、酶切、测序鉴定后,将阳性重组质粒转化酵母菌,进行毒性自激活检验。结果测序结果证实,含不同hTR基因片段诱饵重组质粒pRH3—hTR构建成功,转化酵母后无毒性和自激活性。结论成功构建了酵母三杂交系统诱饵载体,可于酵母三杂交系统筛选端粒酶抑制剂及在酵母中研究hTERT和hTR间的相互作用。
- 王卫国曹莹张群王广发吴曙光庞建新
- 关键词：HTR端粒酶抑制剂
- 舒芬太尼预处理对烫伤糖尿病和非糖尿病大鼠心肌损伤的影响被引量：7
- 2014年
- 目的观察舒芬太尼预处理对烫伤糖尿病和非糖尿病大鼠心肌损伤的影响。方法取糖尿病及非糖尿病SD大鼠各40只,随机分为八组(n=10):非糖尿病对照组(NS组)、非糖尿病烫伤组(NB组)、非糖尿病舒芬太尼预处理组(NP组)、非糖尿病纳洛酮拮抗组(NN组)及糖尿病对照组(DS组)、糖尿病烫伤组(DB组)、糖尿病舒芬太尼预处理组(DP组)、糖尿病纳洛酮拮抗组(DN组)。取烫伤后6h腹主动脉血,测血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、TNF-α、心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平,观察心肌组织形态学改变等。结果与NB组比较,NP组血浆SOD活性明显增加,TNF-α和cTnI浓度明显降低,心肌含水量明显减少(P<0.05);DB组TNF-α和cTnI浓度明显升高,心肌含水量增加(P<0.05)。与DB组比较,DP组血浆SOD活性明显增加,MDA、TNF-α和cTnI浓度明显降低,心肌含水量明显减少(P<0.05)。结论糖尿病可加重烫伤大鼠的心肌损害,舒芬太尼预处理可对其产生保护作用,其机制与减轻炎性反应和抗脂质过氧化损伤有关。
- 吴财能屠伟峰马武华曹莹
- 关键词：糖尿病烫伤脂质过氧化舒芬太尼
- 高脂饮食+STZ诱导2型糖尿病动物模型的优化和评价被引量：16
- 2010年
- 目的在原有基础上进一步缩短造模时间,优化模型,使模型更加接近于2型糖尿病并且明确模型的适用范围,为抗糖尿病药物的筛选和评价提供一个更好的平台。方法进行三因素三水平的正交实验,考察不同因素间的组合对模型的影响,筛选出最佳的组合。对最佳组合进行模型稳定性和重复性考察:按照正交实验结果,对最佳的组合进行8周以上的观察,以考察其稳定性;用不同批次小鼠进行造模以考察其重复性。对优化后的模型进行药效学评价。结果正交实验筛选出的最佳组合是第三周开始注射streptozotocin(STZ),注射剂量为85mg/kg(注射两次,每次间隔5d),病理切片显示胰岛有一定的破坏但又恰到好处。模型具有很好的重复性和稳定性,造模的成功率在90%以上,血糖水平在注射STZ后稳定上升,注射1周后(第5周)维持稳定并且可以持续到8周以上。模型对药物的评价效果:优化后的模型对二甲双胍和匹格列酮具有很好的评价效果;同时也很好地改善了对促胰岛素分泌类药物如格列美脲的评价功效。结论成功地优化了模型,使得其更加接近于人类2型糖尿病状态,能够更好地用于评价治疗2型糖尿病的常见药物以及新药的筛选。
- 朱文烽刘晓萍曹莹孔焕育刘霭明石光罗超王广发庞建新吴曙光
- 关键词：C57BL/6J正交实验STZ高脂饮食
- 人端粒酶RNA突变体酵母三杂交诱饵质粒的构建被引量：3
- 2009年
- 目的对人端粒酶RNA进行多位点的突变并构建该突变体的酵母三杂交诱饵质粒,且进行毒性检测。方法根据人端粒酶RNA(hTR)序列及突变位点设计引物,运用重叠延伸PCR法对hTR基因的第41位、第80位及第102位碱基进行T→A突变,将突变后的片段克隆入PMD18T载体,经测序正确后再亚克隆到酵母三杂交诱饵质粒PRH3'中,PCR及酶切鉴定。鉴定成功的重组诱饵质粒转化到酵母细胞L40ura3/pHyblex/ZeoMS2进行毒性检测。结果经过测序验证,该基因预期位点突变成功且其他序列未发生随机突变,重组诱饵质粒构建成功,转化酵母菌之后对宿主无毒性。结论成功构建了hTR突变体的重组质粒PRH3'-hTRm,可作为酵母三杂交系统中的"诱饵"。
- 曹莹王卫国李琳张慧敏王广发庞建新吴曙光
- 关键词：人端粒酶RNA重叠延伸PCR定点突变
- 舒芬太尼预处理对烫伤致大鼠心肌损伤的影响被引量：3
- 2010年
- 大面积烧伤病人常伴有心肌损伤,表现为心脏收缩功能和舒张功能降低.心肌酶升高等.由于心脏的特殊性,心肌损伤不仅可引起心功能不全,还可诱发和加重其他器官的损伤,甚至导致死亡.舒芬太尼是一种强效的阿片类镇痛药,可减轻心肌缺血再灌注损伤[1].本研究拟探讨舒芬太尼预处理对烫伤致大鼠心肌损伤的影响.
- 吴财能曹莹江鹏屠伟峰
- 关键词：大鼠心肌损伤舒芬太尼烫伤心脏收缩功能大面积烧伤病人舒张功能降低
- hTERT-CTF影响hTERT端粒功能和NF-κB信号通路抗肿瘤活性研究
- 邬贤陈嘉胜丘玉昌曹莹谢宝平王杞妹周平正庞建新
- 关键词：重组腺病毒NF-ΚB
- 五灵肩周丸镇痛抗炎作用和急性毒性研究被引量：2
- 2011年
- 目的:研究五灵肩周丸的镇痛抗炎作用及急性毒性。方法:采用小鼠扭体实验和甲醛致痛模型来观察五灵肩周丸的镇痛作用;抗炎实验采用大鼠棉球肉芽肿实验及小鼠二甲苯致耳廓肿胀模型;采用小鼠单次ig的方法测定其LD50。结果:给予3.8,7.6 g·kg-1的五灵肩周丸能明显减少醋酸所致小鼠的扭体次数(P<0.05),抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀(P<0.01);五灵肩周丸在3.8,11.4 g·kg-1时能明显减轻甲醛致痛实验中小鼠的Ⅰ相疼痛反应(P<0.01),但对甲醛引起的Ⅱ相疼痛反应没有显著影响;剂量为7.6 g·kg-1时对大鼠棉球肉芽肿的形成有明显的抑制作用(P<0.05);急性毒性试验表明,其LD50为148.4 g·kg-1。结论:五灵肩周丸具有明显的镇痛抗炎作用,且具有较高的安全性。
- 刘霭明孔焕育石光罗超曹莹谢宝平庞建新丘玉昌
- 关键词：镇痛抗炎急性毒性
- 从放线菌发酵液中高通量筛选端粒酶抑制剂被引量：2
- 2010年
- 目的从2000多株放线菌发酵液中高通量筛选特异性端粒酶抑制剂。方法经对持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型即3株酵母菌PCR验证后,将其接种于含3-AT、组氨酸缺乏的酵母培养液,然后分别调整其菌液浓度和筛选样品剂量,以备高通量筛选。将酵母菌液移于96孔板,加入待测样品,振摇培养并定时经多功能微孔板分析仪进行定量分析,选取抑菌率大于0.45的样品进行复筛。结果经验证所持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型均可用于下一步的筛选,并选取酵母菌液OD595nm 0.04做为起始筛选浓度,选取放线菌发酵液剂量为5ml,通过对放线菌发酵液进行初筛和复筛,发现了14株放线菌发酵液的抑菌效率超过0.45。结论该研究首次高通量筛选端粒酶抑制剂,方法简便快捷,筛选结果稳定可靠,并筛选到14株放线菌发酵液可能具有抗肿瘤活性,为进一步研究和开发抗肿瘤新药奠定基础。
- 张慧敏曹莹王卫国李波兰沈会芳林壁润庞建新吴曙光
- 关键词：高通量筛选端粒酶抑制剂酵母三杂交系统抗肿瘤活性
- 石参总黄酮抗氧化活性研究被引量：24
- 2011年
- 目的:研究石参总黄酮的抗氧化活性。方法:采用50%乙醇回流冷凝提取石参根,提取液分别用乙醚和乙酸乙酯萃取,得到石参总黄酮。利用2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2'-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS]法检测总抗氧化能力,采用分光光度法检测对1,1-二苯基-2-苦味肼基(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazy,DPPH),羟基自由基(.OH)、一氧化氮(NO)的清除作用及对脂质过氧化的抑制作用。结果:石参总黄酮在20～100 mg·L-1对DPPH,ABTS+,.OH和NO等自由基具有明显的清除作用,最大清除率分别达到60.89%,74.87%,41.77%,81.01%;对脂质过氧化亦有明显的抑制作用,最大抑制率达41.07%,并具有浓度依赖性。结论:石参总黄酮具有较好的清除自由基活性和抑制脂质过氧化的作用。
- 罗超刘霭明邢惟青石光曹莹庞建新丘玉昌
- 关键词：总黄酮自由基脂质过氧化
- 少腹逐瘀汤活血化瘀及镇痛、抗炎作用的实验研究被引量：30
- 2012年
- 目的:评价少腹逐瘀汤的活血化瘀和镇痛、抗炎作用。方法:采用肾上腺素+冷水浸方法制作大鼠急性血瘀模型,实验分为正常组,模型组,丹参片组,少腹逐瘀汤低、中、高剂量组,通过检测血液流变性变化以及血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)水平,评价活血化瘀作用;采用小鼠醋酸扭体实验和大鼠棉球肉芽肿实验评价镇痛、抗炎作用。结果:少腹逐瘀汤能显著改善急性血瘀大鼠的的全血黏度和血浆黏度,降低急性血瘀大鼠血浆TXB2水平,升高血浆6-keto-PGF1α水平;并能显著减少醋酸所致小鼠扭体次数;抑制大鼠棉球肉芽肿的形成。结论:少腹逐瘀汤具有明显的镇痛、抗炎和活血化瘀作用,其活血化瘀作用与调节血浆TXA2/PGI2的平衡有关。
- 丘玉昌曹莹孔焕育贺巍
- 关键词：中医药疗法炎症中医药疗法少腹逐瘀汤
