浙江理工大学生命科学学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室 作品数:9 被引量:16 H指数:2 相关作者: 李伟燕 陈伟才 杨佩佩 孙爱群 魏铭 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 更多>>
副溶血弧菌Ⅲ型分泌系统(T3SS)效应蛋白及其对宿主细胞的操控 被引量:6 2017年 副溶血弧菌是典型的食源性病原菌,也是全球范围内引起肠胃炎的主要病原菌。针筒状的Ⅲ型分泌系统(T3SS)为该菌主要的毒力因子,细菌感染时可将其效应蛋白直接注射至宿主细胞中,通过效应蛋白操纵宿主细胞,介导毒力的发挥。多数临床分离的副溶血弧菌含有2套T3SSs,其中T3SS1分泌的效应蛋白主要通过诱导细胞自噬、变圆和裂解等过程来发挥其细胞毒性,而T3SS2分泌的效应蛋白则主要通过破坏细胞骨架和操控细胞信号传导来发挥肠毒性。本文主要对副溶血弧菌T3SSs的组成和目前已发现的效应蛋白及其对宿主细胞的操控进行介绍。该研究不仅对深入了解该菌的致病机制有重要意义,而且也为宿主细胞信号转导机制研究提供新视角。 李楚楚 李伟燕 潘建义关键词:副溶血弧菌 细胞骨架 信号转导 肿瘤SDH基因突变的研究进展 被引量:5 2017年 线粒体琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)是三羧酸循环和有氧电子传递呼吸链中的关键酶之一,包含A、B、C、D 4个亚基.4个亚基分别由4个基因编码,即SDHA、SDHB、SDHC和SDHD,4个基因突变可以诱发癌症,包括副神经节瘤(paraganglioma,PGL)、嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma,PHEO)、肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)、胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GIST)、Leigh综合症等.近年来,突变的SDH已经被证实是一种重要的诊断与预后的生物标志物和治疗分子标靶.本文就SDH存在的各种突变以及在肿瘤发生、发展与转移的作用机理研究的进展进行全面的论述. 曹智发 陈伟才 杨佩佩 周海梦 欧文斌关键词:琥珀酸脱氢酶 副神经节瘤 嗜铬细胞瘤 肾细胞癌 胃肠道间质瘤 Aβ42基因在大肠杆菌中的表达及诱导BALB/c小鼠的抗体产生 被引量:2 2014年 目的研究纯化大肠杆菌中Aβ42蛋白的表达情况,并探索该蛋白接种小鼠后抗体的产生情况。方法构建表达载体pGEX-4T-1-Aβ42,设置不同的诱导温度来进行Aβ42在大肠杆菌中表达。用SDS-PAGE、GST柱及Western blot来鉴定纯化目的蛋白。动物实验中,用福氏佐剂采用背部多点注射的方式免疫BALB/c小鼠3次。间接ELISA法检测免疫小鼠血清和脑组织匀浆上清液中特异性抗体的滴度。结果在25℃下,经1.0 mmol/L的IPTG诱导后该蛋白表达量最多,实现可溶性表达。小鼠实验中,第2次免疫后,Aβ42蛋白组小鼠的免疫血清有抗Aβ42抗体产生,且第三次免疫后,抗体数量增高。同时,在脑组织匀浆上清液中也可检测出低滴度的抗Aβ42抗体。结论在大肠杆菌中可获得了高纯度的可溶性Aβ42蛋白。该蛋白结合福氏佐剂免疫BALB/c小鼠后,可诱导小鼠产生特异性的抗Aβ42抗体。 牟玲燕 沈蒋君 孙爱群 舒建洪 李司关键词:大肠杆菌 AΒ42 可溶性蛋白 小鼠BDNF(mBDNF)基因的原核表达及重组Bacmid的构建 脑源性神经营养因子(brain derived neurorophie factor,BDNF)是具有促进神经生长活性的一种蛋白质。它作为神经生长因子家族成员,与神经系统发育有着密切关系,不仅对中枢神经元的发育、增殖分化... 朱世平 叶丽君 朱胜超 许静洁 孙恺 陈剑清 张耀洲CTB-APSL融合蛋白在家蚕中表达的研究 糖尿病是一种常见的代谢内分泌疾病,是遗传和环境因素共同作用而导致的慢性全身性代谢性疾病,严重威胁着人类健康,也给个人、家庭、卫生保健系统和国家带来巨大的经济后果。目前临床上仍然缺乏有效的手段控制糖尿病及其并发症的发生与进... 刘云龙 陈莹 王涛 郭庆拓 吕正兵 张耀洲文献传递 鲨肝肽在家蚕中的表达及其口服吸收研究 糖尿病的发病率逐年上升,严重威胁人类健康,胰岛素虽是有效的治疗糖尿病药物,但不是理想的糖尿病药物。早期的研究表明鲨肝活性肽(active peptide from shark liver,APSL)对小鼠损伤胰岛具有明显... 陈莹 刘云龙 吴祥甫 吕正兵 张耀洲利用家蚕杆状病毒表达系统表达虎杖白藜芦醇芪合酶基因 临床实验表明白藜芦醇对退化病有较好的预防和治疗作用,可改善内皮细胞功能,也是发挥其非酒精依赖性的心血管保护效应的机制之一。目前生产的白藜芦醇在其化学结构专一性、可食用安全度、生产周期长和原料合理利用开发及环境保护问题上都... 潘晶晶 潘华晔 严珍珍 张耀洲 吴祥甫 吕正兵BmNPV or f98对家蚕核型多角体杆状病毒复制、转录及包装的影响 被引量:1 2015年 为了研究家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)基因orf98的功能,通过λRed重组系统定点敲除BmNPVorf98基因,构建缺失型重组病毒Bm98-ko-Bacmid;以Bac-to-Bac系统补回BmNPVorf98基因,构建补回型重组病毒Bm98-re-Bacmid;将野生型病毒(wtBacmid)、缺失型病毒(Bm98-koBacmid)和补回型病毒(Bm98-re-Bacmid)分别转染家蚕细胞BmN。病毒滴度检测结果显示,Bm98-ko-Bacmid可形成侵染性的病毒粒子,但数量显著降低(P<0.05).透射电子显微镜观察发现,Bm98-ko-Bacmid只产生游离的杆状病毒粒子,数量明显减少,而wtBacmid和Bm98-re-Bacmid产生大量具有囊膜结构的成熟病毒粒子。荧光定量聚合酶链反应分析结果表明,BmNPVorf98基因缺失对BmNPV病毒复制没有影响,而早期基因lef3、晚期基因vp39和极晚期基因p10的转录水平显著降低(P<0.05)。综上所述,BmNPVorf98基因对病毒复制是非必需的,但显著影响病毒的繁殖速度和包装(P<0.05);对病毒各个时期的基因转录也具有重要影响。 史利利 蒋彩英 于威 陈琛 蒋磊 巩成见 童富淡关键词:家蚕核型多角体病毒 BAC-TO-BAC系统 病毒复制 基因转录