北京市教育委员会科技发展计划面上项目(KM201210011008) 作品数:13 被引量:55 H指数:5 相关作者: 赵磊 王成涛 王旋 李思然 唐婧 更多>> 相关机构: 北京工商大学 中国农业大学 中国食品发酵工业研究院 更多>> 发文基金: 北京市教育委员会科技发展计划面上项目 国家自然科学基金 北京市科技计划项目 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 医药卫生 更多>>
果糖酯的酶法合成及其抑菌性研究 被引量:2 2014年 目的:研究5种果糖脂肪酸酯对常见食品病原菌和腐败菌的抑菌作用。方法:采用酶法合成果糖癸酸酯、果糖月桂酸酯、果糖肉豆蔻酸酯、果糖棕榈酸酯和果糖硬脂酸酯,采用硅胶柱梯度洗脱的方法对产物进行了分离纯化,并用薄层色谱法对分离产物纯度进行鉴定。分别测定5种果糖脂肪酸酯对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌的抗菌效果。结果:果糖癸酸酯、果糖月桂酸酯对蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌均有较强的抑菌作用,且抑菌性随果糖酯浓度的增加而增强。果糖酯的脂肪酸碳链越短,对微生物的抑制作用越强。 赵磊 王成涛 张鹤龑 郝添阳 宋晓杰关键词:酶促合成 纯化 抑菌性 糖酯酶促合成及抗真菌活性的初步研究 被引量:1 2014年 研究了糖酯对食品中腐败真菌的抗菌作用。以脂肪酶作为催化剂,采用丙酮-分子筛体系进行反应,经硅胶柱层析法分离纯化制备得到糖酯。分别测定几种糖酯在不同pH值条件下对草酸青霉、塔宾曲霉、卷枝毛霉和黑根霉的抗菌效果。结果表明,果糖月桂酸酯对草酸青霉和塔宾曲霉的抗菌作用最强,并随浓度的增大,其抗真菌活性也随之增强。果糖月桂酸酯除对供试真菌的菌落直径大小有影响外,还影响到了菌落薄厚和产色素情况,其抗菌活性受pH值影响较大,在中性条件下的抗真菌活性低于酸性和碱性条件。 赵磊 李思然 张鹤龑 郝添阳 吴迪 王红关键词:糖酯 酶促合成 真菌 抗真菌活性 鹿茸糖胺聚糖提取方法的比较及其活性研究 被引量:5 2013年 目的:对鹿茸糖胺聚糖不同提取方法的效果进行比较,并对其免疫调节和抗氧化活性进行研究。方法:分别采用蛋白酶水解法、稀碱-蛋白酶水解法提取鹿茸糖胺聚糖,随后选用三氯乙酸法或Sevage法除蛋白。以提取物的基本理化性质、总糖胺聚糖、己糖醛酸和蛋白质含量为指标对4种提取方法进行比较。应用WST-8法检测鹿茸糖胺聚糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,以Fe3+还原能力、DPPH自由基及羟自由基清除能力评价鹿茸糖胺聚糖的抗氧化活性。结果:采用胰蛋白酶-木瓜蛋白酶水解,三氯乙酸法除蛋白,制备所得鹿茸糖胺聚糖纯度最高。鹿茸糖胺聚糖对ConA诱导的小鼠脾T淋巴细胞增殖呈倒U型曲线;对LPS诱导的小鼠脾B淋巴细胞增殖有抑制作用。鹿茸糖胺聚糖具有Fe3+还原能力、DPPH自由基及羟自由基清除能力。结论:蛋白酶解法适用于鹿茸糖胺聚糖的提取,鹿茸糖胺聚糖可能具有双向免疫调节作用,并具有良好的抗氧化作用。 赵磊 王成涛 魏颖关键词:鹿茸 糖胺聚糖 蛋白酶 免疫调节 抗氧化 响应面法优化无溶剂体系酶法合成己酸乙酯 被引量:4 2012年 目的:探讨无溶剂体系酶法合成己酸乙酯的最佳工艺条件。方法:在单因素试验的基础上,以脂肪酶添加量、底物(己酸/乙醇)物质的量比、反应时间为影响因素,应用二次回归中心组合试验法进行三因素五水平试验,以己酸乙酯产率为评价指标,进行响应面分析。结果:无溶剂体系酶法合成己酸乙酯的最佳工艺条件为脂肪酶添加量0.5%、酸醇物质的量比1:1.3、反应时间12.2h、反应温度30℃,转速150r/min。在此条件下,己酸乙酯产率实际值为81.6%,与预测值相近。结论:采用中心组合试验设计——响应面法对无溶剂体系酶法合成己酸乙酯工艺条件进行优化合理可行。 赵磊 程玥 王成涛关键词:己酸乙酯 响应面 无溶剂体系 酶法合成 鹿茸水提物模拟胃肠消化物对小鼠脾细胞增殖的影响 被引量:6 2012年 研究鹿茸水提取物模拟胃肠消化物(AEVA-SGD)的分离组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。AEVA-SGD的分离采用凝胶层析法和RP-HPLC法。应用WST-8法检测各分离组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,采用高分辨质谱对有效分离组分进行初步鉴定。结果显示,AEVA-SGD经Sephadex LH-20分离后得到6个组分(A~F)。其中,组分F对小鼠脾细胞增殖的影响最为显著,可单独促进小鼠脾细胞增殖,但对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有抑制作用。经RP-HPLC将组分F分为3个部分,初步鉴定组分F1为鸟嘌呤,F2为1-甲基鸟嘌呤和黄嘌呤,F3为多种小肽的混合物。组分F3对小鼠脾细胞增殖的影响最大,组分F对小鼠脾细胞增殖的影响是其各分离组分协同作用的结果。 赵磊 籍保平 王成涛关键词:小鼠脾细胞 免疫 蔗糖癸酸酯对沙门氏菌的抗菌作用及其机理初探 被引量:5 2016年 本文研究了蔗糖癸酸酯对沙门氏菌的体外抗菌作用及其机理。采用肉汤稀释法测定了不同p H值下蔗糖癸酸酯对沙门氏菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。通过测定菌体渗漏物、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析、扫描电镜观察、DNA结合试验等,初步研究了蔗糖癸酸酯对沙门氏菌的抗菌机理。结果表明:蔗糖癸酸酯在p H 7.0时对沙门氏菌的MIC为20 m M,在酸性条件下抗菌效果更为显著。蔗糖癸酸酯能够使菌体细胞内核酸、蛋白质和还原糖等外泄,影响细胞膜结构完整性和菌体正常形态;对菌体细胞蛋白(尤其是大分子量蛋白)的合成与积累有干扰作用;同时糖酯的亲水性头基可与DNA磷酸基团以氢键的方式结合,使DNA骨架收缩。因此,可将蔗糖癸酸酯作为兼具乳化和防腐作用的多功能食品添加剂,应用于动物源性食品的加工和储藏过程中。 赵磊 张鹤龑 郝添阳 李思然关键词:沙门氏菌 抗菌机理 SDS-PAGE 扫描电镜 植物乳杆菌发酵紫薯饮料的研制 被引量:6 2014年 以紫薯为原料,利用植物乳杆菌为发酵剂,对紫薯乳酸发酵饮料的加工工艺进行研究。结果表明:紫薯用5倍水打浆,加入6U/100m L薯浆α-淀粉酶于60℃条件下酶解20min,再添加55U/100m L薯浆的糖化酶在p H4.5条件下糖化90min,可得理想的淀粉水解效果。通过正交实验,确定产品的最佳发酵工艺条件为接种量4%,发酵温度37℃,发酵时间14h;实验最佳配方为蔗糖8%,柠檬酸0.1%,黄原胶0.02%,CMC-Na 0.02%,PGA 0.02%。 赵磊 张秋晨 李金玉 王婷婷关键词:紫薯 乳酸发酵 植物乳杆菌 脂肪酶在尼龙网上的固定化及其酶学性质研究 被引量:5 2013年 以尼龙网为载体,戊二醛为交联剂制备固定化脂肪酶(Candida sp.99-125),并对固定化条件及固定化酶的酶学性质进行研究。结果表明,最适固定化条件为:戊二醛体积分数3%、交联时间60min、脂肪酶质量浓度10mg/mL、固定化时间6h。与游离酶相比,固定化脂肪酶的最适温度从45℃提高至50℃,最适pH值相同,均为7.0,并在pH5.0~7.0范围内均有非常高的活力。固定化脂肪酶相对于游离酶具有更好的热稳定性和pH值稳定性,并具有良好的操作稳定性,其重复操作5次后相对酶活力仍保持在80%左右。固定化脂肪酶的Km值(0.57mol/L)和最大反应速率Vmax(0.29×10-3mol/(L.s))显著高于游离酶,对底物的亲和力较游离酶弱。 赵磊 唐婧 王成涛关键词:固定化酶 尼龙网 戊二醛 鹿茸和大豆蛋白酶解物3ku超滤组分的制备及其对小鼠脾细胞增殖影响的研究 被引量:2 2015年 以鹿茸水溶性蛋白和大豆分离蛋白为原料,采用模拟胃肠消化和碱性蛋白酶水解,根据游离氨基含量变化优化水解时间,制备鹿茸蛋白和大豆分离蛋白酶解物。通过超滤分离获得各酶解物分子量<3ku的组分:鹿茸蛋白模拟胃肠消化物组分(VAWP-SGD)、鹿茸蛋白碱性蛋白酶解物组分(VAWP-APH)、大豆分离蛋白模拟胃肠消化物组分(SPI-SGD)、大豆分离蛋白碱性蛋白酶解物组分(SPI-APH),探究各组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果表明:模拟胃肠消化时间为胃蛋白酶2h+胰酶5h;碱性蛋白酶水解时间4h。在无诱导剂时,VAWP-SGD和SPI-SGD对小鼠脾细胞增殖均有显著促进作用(≥100μg/m L)。VAWP-SGD对Con A诱导的小鼠脾T细胞增殖促进作用最显著,其次是VAWP-APH,SPI-APH无明显作用,SPI-SGD对脾细胞增殖有轻微抑制作用。VAWP-SGD对LPS诱导的小鼠脾B细胞增殖促进作用最强,其次是VAWP-APH,SPI-APH及SPI-SGD。综上,VAWP-SGD对小鼠脾细胞增殖影响最大,对进一步开发鹿茸产品和免疫活性肽具有重要意义。 赵磊 王旋 谢峤菲 李思然 吴迪 倪昌征关键词:碱性蛋白酶 小鼠脾细胞 蛋白水解物对DNA和红细胞氧化损伤的保护作用 被引量:5 2016年 目的:研究鹿茸蛋白和大豆分离蛋白水解物对DNA和红细胞氧化损伤的保护作用。方法:以H2O2和AAPH诱导DNA和红细胞氧化损伤,采用DNA琼脂糖凝胶电泳和分光光度法分别评价蛋白水解物对DNA氧化损伤和红细胞溶血的影响。结果:鹿茸蛋白模拟胃肠消化物,鹿茸蛋白碱性蛋白酶水解物,大豆分离蛋白模拟胃肠消化物和大豆分离蛋白碱性蛋白酶水解物对H2O2和AAPH诱导的DNA和红细胞氧化损伤均具有保护作用。综合分析结果:大豆分离蛋白模拟胃肠消化物的抗氧化作用最强,抑制H2O2和AAPH诱导的DNA氧化损伤和红细胞溶血的IC50值分别为10.5,1.4,3.5 mg/m L和2.2 mg/m L。结论:大豆分离蛋白模拟胃肠消化物具有良好的抗氧化作用,能保护离体DNA和红细胞免受自由基诱导的氧化损伤,将其用于功能性食品和保健品具有较好的开发和应用价值。 赵磊 郝添阳 王旋 李思然 王成涛关键词:大豆分离蛋白 水解物 DNA氧化损伤 红细胞溶血