番禺区科技计划项目(2006-Z-58-1)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：汪芳袁琨吴晖余以刚李晓凤更多>>
- 相关机构：华南理工大学更多>>
- 发文基金：番禺区科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人α-防御素5前体蛋白在毕赤酵母中分泌表达的研究被引量：1
- 2010年
- 为了探索人α-防御素5(HD5)前体蛋白基因在酵母中高效分泌表达的可行性,将其对应基因克隆到载体pPIC9K,得到重组载体pPIC9K-preproHD5,经SacI线性化后,转入Pichiapastoris GS115,得到重组毕赤酵母菌GS115/pPIC9K-preproHD5。应用PCR技术筛选高拷贝转化株,用BMGY培养GS115/pPIC9K-HD5至OD600为2～6时,用BMMY诱导培养120h,离心取上清液,用Tricien-SDS-PAGE和蛋白定量试剂盒分析人α-防御素5前体蛋白的表达量。琼脂扩散法检测人α-防御素5前体蛋白的抑菌活性,发现其对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)和大肠杆菌(ATCC10231)2种标准菌株具明显的抑菌活性。人α-防御素5前体基因可在毕赤酵母实现分泌型表达,该策略可能成为防御素工业化开发的有效途径。
- 汪芳吴晖李健兴余以刚李晓凤袁琨王少沛唐语谦
- 关键词：分泌表达生物活性
