厦门市科技计划项目(3502Z20111042)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：蔡秋凤曹敏杰邱晓燕苏文金刘西之更多>>
- 相关机构：集美大学上海海洋大学更多>>
- 发文基金：厦门市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 青石斑鱼胃蛋白酶原的分离纯化及酶学性质被引量：6
- 2011年
- 采用硫酸铵盐析、DEAE-Sephacel,DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析、SP-Sepharose阳离子交换柱层析和Sephacryl S-200凝胶过滤柱层析,从青石斑鱼的胃中分离纯化到3种胃蛋白酶原(PG-1、PG-2和PG-3),SDS-PAGE结果显示,它们的分子量分别为35、36和37 ku。在pH 2.0下,3种胃蛋白酶原转化为有活性的胃蛋白酶P-1、P-2和P-3,分子量分别约为33、33和34 ku。3种酶的最适pH分别为3.0、2.5和2.5,最适温度均为40℃,且均能被典型的天冬氨酸蛋白酶抑制剂pepstatin A有效抑制。免疫交叉反应结果表明,3种胃蛋白酶原能与大鼠抗黄鳍鲷PG-Ⅰ,PG-Ⅱ,PG-3b,PG-3a,PG-4a及PG-4b多克隆抗体发生不同程度的免疫交叉反应。动力学参数测定结果表明,P-1、P-2和P-3对酸变性牛血红蛋白的Km、kcat及kcat/Km值分别为7.0×10-5 mol/L,17.6 S-1,2.5×105 mol/(L.S);5.5×10-5 mol/L,22.8 S-1,4.1×105 mol/(L.S)和5.2×10-5 mol/L,18.7 S-1,3.6×105 mol/(L.S)。
- 刘西之邱晓燕蔡秋凤刘光明苏文金曹敏杰
- 关键词：青石斑鱼胃蛋白酶原胃蛋白酶纯化
- 蓝圆鲹肌肉组织蛋白酶B的纯化与性质分析被引量：4
- 2012年
- 在鱼糜制品生产过程中,凝胶劣化现象是引起鱼糜品质下降的重要原因。研究表明,溶酶体中的内源性组织蛋白酶B会促进肌原纤维蛋白的降解,进而导致鱼糜凝胶劣化。迄今为止,多种鱼体肌肉中的组织蛋白酶B已有研究,但海水经济低值鱼蓝圆鲹中该酶的情况却尚未报道。本研究采用硫酸铵沉淀和柱层析相结合的方法,从蓝圆鲹肌肉中分离纯化得到分子量约为27ku的组织蛋白酶B。酶学性质结果显示,该酶最适温度和最适pH分别为55℃和5.5,半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64能有效抑制其活性。对肌原纤维蛋白的降解实验表明,在最适条件下,蓝圆鲹组织蛋白酶B对肌原纤维蛋白有一定的降解作用。因此,组织蛋白酶B参与肌原纤维蛋白的降解,更可能参与在低pH条件下鱼糜凝胶劣化。
- 钟婵沈建东蔡秋凤翁武银曹敏杰
- 关键词：蓝圆鲹组织蛋白酶B肌原纤维蛋白
