高等学校骨干教师资助计划(1696)
- 作品数：4 被引量：32H指数：2
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- 有效利用木糖的肠道细菌的筛选及转化被引量：2
- 2003年
- 以木糖为惟一碳源筛选得到了 32株能利用木糖快速生长的肠道细菌 ,初步鉴定结果表明 ,有效利用木糖的菌株多为肺炎克雷伯氏杆菌 ,其次是大肠杆菌 .选择合适的质粒对其中的 94 7菌株、15 6 9菌株及E .coliJM 10 9进行转化 ,检验转化子中的质粒在无选择压力条件下的传代稳定性 ,结果野生型菌株的转化率均明显低于E .coliJM 10 9,质粒 pET 2 8a在所试验的几株菌中稳定性相对较差 ,pKK2 2 3 3能在 94 7菌株中稳定存在 .
- 孙金凤诸葛健王正祥
- 关键词：木糖肠道细菌质粒稳定性酒精发酵生产
- 利用木糖和葡萄糖合成乙醇的新型重组大肠杆菌的研究被引量：24
- 2004年
- 利用PCR方法从运动发酵单孢菌染色体DNA扩增出乙醇合成途径的关键酶基因pdc、adhB ,分别用tac启动子控制表达 ,构建了可以在EscherichiacoliJM10 9中表达的重组质粒pKK_PA、pEtac_PA。初步的乙醇发酵结果表明 ,在E .coli中只引入adhB基因不能拓宽其中的产乙醇途径 ,引入pdc基因可以与宿主自身的ADH酶协同作用 ,使碳流有效导向产乙醇方向。同时引入pdc、adhB基因可以在宿主E .coli中成功建立产乙醇途径。
- 孙金凤徐敏张峰王正祥
- 关键词：重组大肠杆菌乙醇发酵
- 古细菌Pyrococcus furiosus嗜热α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达被引量：6
- 2003年
- 用PCR方法从嗜热古细菌Pyrococcusfuriosus的基因组DNA中扩增出胞外α 淀粉酶完整结构基因 ,插入表达载体pET2 8a中构建成质粒 pET amy(sig+) ,以质粒pET amy(sig +)为底物扩增出不含信号序列的α 淀粉酶成熟肽基因片断 ,获得质粒 pET amy(sig ) ,将重组质粒分别转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)。在T7启动子和lac操纵子控制下 ,通过IPTG的诱导在重组大肠杆菌细胞内分别表达出含信号肽和不含信号肽的融合蛋白。其中不含信号肽的融合蛋白具有与P .furio sus产生的胞外α 淀粉酶相似的酶学性质 :最适pH为 5 .0 ,最适温度约为 95℃ ,在 1 2 1℃下热处理 1h酶活仍能保持 50 %以上 ;
- 沈微王正祥刘吉泉诸葛健
- 关键词：大肠杆菌细胞
- 新型产乙醇重组菌利用葡萄糖和木糖的乙醇发酵被引量：2
- 2008年
- 对构建得到的新型产乙醇重组菌JM109(pEtac-PA)、947(pEtac-PA)利用不同浓度葡萄糖或木糖的乙醇发酵进行了初步研究。结果表明,重组菌的乙醇发酵受到发酵碳源的类型、发酵液中糖浓度、发酵培养基的装液量、发酵液的pH值、重组菌的宿主类型等多种因素的影响。以野生型菌株E.coli 947为宿主的重组菌947 (pEtac-PA)发酵产乙醇的能力和乙醇得率均高于JM109(pEtac-PA),尤其是在装液量加大、高浓度糖发酵以及利用木糖发酵时更加明显。
- 孙金凤王正祥
- 关键词：乙醇发酵葡萄糖木糖
